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基于体内生物应用的多功能荧光探针设计、合成及应用

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 前言第13-44页
   ·绪论第13-14页
     ·分子识别与分子探针第13-14页
   ·荧光分子探针的组成第14-16页
     ·探针受体简介第14-15页
     ·探针荧光团简介第15-16页
   ·荧光分子探针识别机理第16-23页
     ·光诱导电子转移PET(Photoinduced Electron Transfer)第16-18页
     ·分子内共轭电荷转移ICT(Intramolecular Charge Transfer)第18-19页
     ·扭曲的分子内电荷转移TICT(Twisted Intramolecular Charge Transfer)第19-20页
     ·激发单体-激基缔合物(Monomer-Excimer)第20-21页
     ·荧光共振能量转移FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer)第21-22页
     ·激发态分子内质子转移ESIPT(Excited-State Intramolecular Proton Transfer)第22-23页
   ·荧光探针技术的应用第23-42页
     ·荧光探针生物活性酶检测中的应用第24-31页
     ·荧光探针在氨基酸检测中的应用第31-34页
     ·荧光探针在金属离子检测中的应用第34-42页
   ·本文的研究思想和研究目标第42-44页
第二章 高选择性碳酸酐酶Ⅸ(CA Ⅸ)荧光探针的设计、合成及生物应用第44-71页
   ·探针分子设计背景第44-51页
     ·碳酸酐酶概述第44-47页
     ·碳酸酐酶Ⅸ简介第47-48页
     ·荧光探针在碳酸酐酶检测中的应用第48-51页
   ·探针分子设计原理第51-53页
     ·探针分子骨架设计第51页
     ·受体分子的选择第51-52页
     ·荧光团分子的选择第52页
     ·荧光探针开关型设计原理第52-53页
     ·目标荧光探针的设计第53页
   ·合成路线第53-54页
   ·实验部分第54-60页
     ·原料与仪器第54页
     ·目标化合物的合成第54-60页
   ·目标化合物性能测试方法第60-62页
     ·探针pH滴定实验第60页
     ·探针溶液的配制和稀释第60页
     ·探针和酶络合常数的测定实验第60页
     ·CAⅨ的克隆、表达、纯化第60-61页
     ·探针对CAⅠ、CAⅡ和CAⅨ抑制常数的测定第61页
     ·探针对CAI、CAII和CAIX荣光响应曲线的测定第61页
     ·探针在有氧和乏氧条件下的细胞学实验第61-62页
   ·结果与讨论第62-70页
     ·pH值对化合物紫外荧光光谱的影响第62-63页
     ·Z1对不同碳酸酐酶的抑制常数的测定第63-64页
     ·探针Z1对CAⅠ、CAⅡ、CAⅨ和GST蛋白的荧光响应曲线第64-67页
     ·探针Z1对CAⅨ的荧光偏正检测第67页
     ·探针Z1在细胞中的测试以及生物学成像第67-70页
     ·CAⅨ纯化电泳图第70页
   ·本章小结第70-71页
第三章 基于萘酰亚胺与铜(Ⅱ)复合物的组氨酸荧光探针的设计、合成及生物应用第71-94页
   ·探针设计背景第71-76页
     ·组氨酸荧光检测方法介绍第71-76页
   ·探针设计原理第76页
   ·探针合成路线第76-77页
   ·实验部分第77-81页
     ·原料与仪器第77页
     ·目标化合物的合成第77-81页
   ·目标化合物性能测试方法第81-83页
     ·探针pH滴定实验第81页
     ·探针溶液的配制和稀释第81页
     ·Cu~(2+)离子滴定曲线的绘制第81页
     ·探针S1络合物在不同pH值下荧光紫外曲线的滴定第81-82页
     ·His滴定曲线的绘制第82页
     ·Job曲线的绘制第82页
     ·结合常数的测定第82页
     ·相对荧光量子产率的测定第82-83页
   ·结果和讨论第83-93页
     ·pH值对M2荧光发射的影响第83页
     ·M2的Cu~(2+)离予滴定曲线第83-84页
     ·pH值对探针S1紫外吸收和荧光发射的影响第84-86页
     ·不同浓度的组氨酸对探针S1紫外吸收和荧光强度曲线的影响第86-87页
     ·不同种类氨基酸对探针S1荧光强度曲线的影响第87页
     ·探针S1对组氨酸与其它氨基酸选择性及竞争性第87-88页
     ·探针S1 Job曲线的测定第88-89页
     ·M2和Cu~(2+)以及探针S1和组氨酸结合常数的测定第89-90页
     ·探针S1在结合组氨酸前后的荧光量子产率的测定第90页
     ·质谱法用于检测探针S1和组氨酸配合物的研究第90-91页
     ·探针S1对富含和非富含组氨酸残基的蛋白质的检测第91-92页
     ·探针S1对细胞内游离组氨酸的识别及成像第92-93页
   ·本章小结第93-94页
第四章 基于萘酰亚胺的多功能金属离子探针的设计、合成及应用第94-119页
   ·探针设计背景第94-95页
   ·多功能性金属离子荧光探针概述第95-100页
   ·探针设计原理第100-101页
   ·探针合成路线第101页
   ·实验部分第101-103页
     ·原料与仪器第101页
     ·目标化合物的合成第101-103页
   ·目标化合物性能测试方法第103-105页
     ·探针pH滴定实验第103-104页
     ·探针溶液的配制和稀释第104页
     ·金属离子滴定曲线的绘制第104页
     ·Job曲线的绘制第104页
     ·结合常数的测定第104页
     ·相对荧光量子产率的测定第104-105页
   ·结果和讨论第105-118页
     ·不同浓度的E3探针在缓冲体系中的紫外吸收和荧光发射光谱第105-106页
     ·pH值对E3探针紫外吸收和荧光发射的影响第106-107页
     ·不同金属离子对E3荧光光谱的影响第107页
     ·不同浓度的Co~(2+)离子对E3紫外吸收和荧光光谱的影响第107-109页
     ·不同浓度的Ni~(2+)对E3紫外吸收和荧光光谱的影响第109-110页
     ·不同浓度的Cu~(2+)对E3紫外吸收和荧光光谱的影响第110-112页
     ·Co~(2+)、Cu~(2+)和Ni~(2+)与其它金属离子对E3竞争性影响的研究第112-114页
     ·Co~(2+)、Cu~(2+)和Ni~(2+)对E3荧光发射光谱时间依赖性的影响第114-115页
     ·Co~(2+)、Cu~(2+)和Ni~(2+)两两混合后对E3荧光发射光谱时间依赖性的影响第115-116页
     ·Co~(2+)、Cu~(2+)和Ni~(2+)与E3结合配位比的测定第116-117页
     ·Co~(2+)、Cu~(2+)和Ni~(2+)对E3结合常数以及结合动力学速率常数的测定第117-118页
   ·本章小结第118-119页
结论第119-120页
参考文献第120-141页
论文创新点第141-142页
攻读博士期间发表的文章第142-144页
致谢第144-145页
附录第145-150页

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