| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| ·小麦白粉病的研究现状 | 第12-15页 |
| ·小麦白粉病的发生和危害 | 第12-13页 |
| ·小麦白粉菌的侵染过程 | 第13页 |
| ·小麦白粉病抗白粉病基因及其定位 | 第13-15页 |
| ·植物病原真菌无毒基因的研究进展 | 第15-17页 |
| ·植物专性寄生病原真菌无毒基因的克隆 | 第16页 |
| ·植物抗病基因(R)与病原物无毒基因(Avr)相互作用的机制 | 第16-17页 |
| ·cDNA文库的研究进展 | 第17-19页 |
| ·cDNA文库的概念 | 第17-18页 |
| ·cDNA文库的分类 | 第18页 |
| ·全长cDNA文库的构建方法 | 第18-19页 |
| ·表达序列标签(Express Sequence Tags,ESTs)的应用 | 第19-21页 |
| ·构建遗传学图谱 | 第19-20页 |
| ·分子遗传标记 | 第20页 |
| ·分离鉴定新基因 | 第20页 |
| ·基因电子克隆 | 第20页 |
| ·基因表达谱的分析 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量PCR研究进展 | 第21-23页 |
| ·荧光定量PCR的工作原理 | 第21-22页 |
| ·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23页 |
| 第二章 小麦白粉菌cDNA文库的构建 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·试验菌株 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·白粉菌的纯化和扩繁 | 第24-25页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第25页 |
| ·总RNA中残留DNA的清除 | 第25-26页 |
| ·cDNA第一条链和第二条链的合成 | 第26-27页 |
| ·均一化处理 | 第27-29页 |
| ·PCR产物纯化 | 第29页 |
| ·SfiⅠ酶切 | 第29-30页 |
| ·连接转化 | 第30页 |
| ·文库原始滴度的计算 | 第30-31页 |
| ·菌落鉴定 | 第31页 |
| ·扩增文库的滴度测定 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第32页 |
| ·ds-cDNA的合成 | 第32页 |
| ·均一化处理 | 第32-33页 |
| ·文库的重组率、文库滴度 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·总RNA提取及其质量 | 第34页 |
| ·cDNA文库质量评价 | 第34-35页 |
| 第三章 表达序列标签(EST)分析 | 第35-43页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·EST测序 | 第35页 |
| ·EST序列的质量控制 | 第35-36页 |
| ·EST序列的聚类和拼接 | 第36页 |
| ·开放阅读框(ORF,open reading frame)预测 | 第36页 |
| ·基因功能注释 | 第36页 |
| ·功能分类 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·序列质量分析 | 第37页 |
| ·序列拼接结果分析 | 第37-38页 |
| ·开放阅读框分析 | 第38页 |
| ·基因注释 | 第38-39页 |
| ·同源序列的物种来源 | 第39页 |
| ·功能分类 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·聚类和拼接 | 第41-42页 |
| ·EST序列的功能注释和分类 | 第42-43页 |
| 第四章 Avr_(a-10)-like基因的表达研究 | 第43-57页 |
| ·材料 | 第44-46页 |
| ·供试菌株和小麦 | 第44页 |
| ·供试引物 | 第44页 |
| ·主要试剂 | 第44-45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-51页 |
| ·目标基因Avr_(a_10)-like的生物信息学分析 | 第46页 |
| ·接种方法 | 第46页 |
| ·总RNA提取与检测(见第二章) | 第46页 |
| ·总RNA中残留DNA的清除(见第二章) | 第46页 |
| ·第一条链cDNA的合成 | 第46-47页 |
| ·引物的筛选和最适Tm的确定 | 第47页 |
| ·标准品的制备 | 第47-50页 |
| ·双标准曲线及溶解曲线的建立 | 第50-51页 |
| ·测定待测样品 | 第51页 |
| ·数据分析 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-55页 |
| ·生物信息学分析 | 第51-52页 |
| ·引物特异性的检测 | 第52-53页 |
| ·标准品的制备和双标准曲线的建立 | 第53-54页 |
| ·溶解曲线的分析及待测样品测定 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·小麦白粉菌的接种和取样 | 第55-56页 |
| ·引物的特异性 | 第56页 |
| ·荧光定量检测 | 第56-57页 |
| 第五章 结论与展望 | 第57-59页 |
| ·结论 | 第57-58页 |
| ·展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
