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能量限制对肉仔鸡脾脏和法氏囊基因表达效应的研究

致谢第1-6页
摘要第6-10页
1 文献综述第10-17页
   ·能量限制的作用和意义第10页
   ·肉仔鸡免疫器官及其功能第10-12页
   ·能量限制对生产性能的影响第12页
   ·能量限制对免疫器官及其功能的影响第12-13页
   ·能量限制对差异表达基因的影响第13页
   ·目前研究差异表达基因的方法第13-17页
     ·传统的研究差异表达基因的方法第14页
     ·mRNA 差异显示技术及其他差异基因分析方法第14-15页
     ·ACP~(TM)技术和 GeneFishing~(TM)DEG Premix Kits第15-17页
2 试验设计第17-19页
   ·研究的目的和意义第17页
   ·研究内容及方法第17-18页
   ·技术路线第18-19页
3 试验材料与方法第19-29页
   ·材料与方法第19-29页
     ·试验材料第19-20页
       ·试验样本第19页
       ·试验主要仪器第19页
       ·主要试剂第19-20页
       ·工具酶及试剂盒第20页
     ·试验方法第20-29页
       ·常用试剂配置第20-21页
       ·固体和液体 LB 培养基的制备第21页
       ·GenFishing~(TM)DEG Premix Kit 试剂盒中引物第21-22页
       ·脾脏和法氏囊总 RNA 的提取和质量检测方法第22页
         ·脾脏和法氏囊总 RNA 的提取第22页
         ·脾脏和法氏囊总 RNA 浓度测定第22页
       ·GeneFishing~(TM)RT—PCR 操作方法第22-23页
       ·反转录方法第23页
       ·反转录得 cDNA 检测方法第23-24页
       ·GeneFishing~(TM)差异显示 PCR 方法第24-25页
       ·差异片段回收、克隆、测序方法第25-26页
       ·半定量 RTPCR 二次验证方法第26-28页
       ·差异表达基因序列分析方法第28-29页
4 结果与分析第29-56页
   ·能量限制对肉仔鸡脾脏差异表达基因的影响第29-43页
     ·脾脏总 RNA 的提取、纯化与检测第29页
     ·脾脏差异表达 EST第29-38页
       ·第一链 cDNA 质量的检测第29-30页
       ·GeneFishing~(TM)RTPCR 获得的脾脏差异显示片段第30-38页
     ·差异表达基因的生物信息学分析第38-43页
       ·差异表达 EST 在 NCBI 网站进行的 EST 搜索第38-41页
       ·差异表达 EST 在 NCBI 网站进行 BLAST 搜索第41-43页
   ·能量限制对肉仔鸡法氏囊差异表达基因的影响第43-56页
     ·法氏囊总 RNA 的提取、纯化与检测第43-44页
     ·法氏囊差异表达 EST第44-52页
       ·第一链 cDNA 质量检测第44页
       ·法氏囊 GeneFishingTM差异显示 RT-PCR 电泳结果第44-52页
     ·差异表达基因的生物信息学分析第52-56页
       ·差异表达 EST 在 NCBI 网站进行 BLAST 搜索结果第52-54页
       ·差异表达 EST 在 NCBI 网站进行 BLAST 搜索第54-56页
5 讨论第56-60页
   ·RNA 质量要求及对后期实验结果的影响第56页
   ·GeneFishing~(TM)RT—PCR 反应第56-58页
     ·基因差异表达研究技术第56-57页
     ·GeneFishingTMRT—PCR 差异表达结果第57-58页
   ·半定量 RT-PCR 验证差异表达基因第58-59页
   ·获得的差异表达 EST 序列分析第59-60页
6 结论第60-61页
参考文献第61-69页
附录第69-78页
 附录 1 脾脏差异表达片段克隆测序第69-73页
 附录 2 法氏囊差异表达克隆序列第73-78页
Abstract第78-79页

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