致谢 | 第1-5页 |
目录 | 第5-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-18页 |
·表观遗传学 | 第9-11页 |
·DNA 甲基化 | 第9页 |
·蛋白质共价修饰 | 第9页 |
·RNA 调控的基因沉默 | 第9-10页 |
·副突变 | 第10页 |
·染色质重塑 | 第10页 |
·遗传印记 | 第10-11页 |
·植物的 DNA 甲基化及其生物学功能 | 第11-12页 |
·甲基化胞嘧啶在植物基因组中的分布 | 第11页 |
·DNA 甲基化与植物的生长发育 | 第11-12页 |
·植物发育过程中 DNA 甲基化模式的变化 | 第11-12页 |
·DNA 甲基化与春化作用的关系 | 第12页 |
·DNA 甲基化与基因组印记 | 第12页 |
·DNA 甲基化调控基因表达的可能的机理 | 第12页 |
·MBD 研究进展 | 第12-16页 |
·MBD 蛋白的结构特点 | 第12-13页 |
·拟南芥 MBD 研究进展 | 第13-16页 |
·其他植物 MBD 研究进展 | 第16页 |
·RNA 干扰技术在植物基因功能中的研究现状及展望 | 第16-18页 |
·水稻遗传转化方法的研究进展及应用前景 | 第18页 |
2 引言 | 第18-19页 |
3 材料与方法 | 第19-31页 |
·试验材料 | 第19-21页 |
·受体材料 | 第19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·工具酶及试剂盒 | 第19页 |
·质粒与菌株 | 第19页 |
·主要试剂配制 | 第19-20页 |
·PCR 引物 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-31页 |
·总 RNA 提取操作步骤(Trizol 法)及质量检测 | 第21-23页 |
·试剂 | 第21页 |
·实验准备 | 第21页 |
·总 RNA 提取 | 第21-22页 |
·总 RNA 质量及浓度测定 | 第22页 |
·总 RNA 的纯化 | 第22-23页 |
·目的基因的克隆 | 第23-27页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第23页 |
·基因克隆的 PCR 反应 | 第23-24页 |
·PCR 扩增产物的检测与回收纯化 | 第24页 |
·回收产物与 pBS-T 载体的连接 | 第24页 |
·重组载体对大肠杆菌的转化 | 第24-25页 |
·DNA 的热击转化 | 第25页 |
·重组质粒的阳性鉴定 | 第25页 |
·重组质粒的提取、纯化及序列分析 | 第25-27页 |
·植物表达载体的构建 | 第27-29页 |
·水稻 pCAMPVII-35s-MBD701-i 表达载体的构建 | 第27-28页 |
·水稻 pCAMPVII-RGA-MBD701-i 植物表达载体的构建 | 第28-29页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第29-31页 |
·根癌农杆菌介导法遗传转化水稻 | 第29-30页 |
·转基因植株的初步鉴定 | 第30-31页 |
4 结果与分析 | 第31-41页 |
·MBD701 基因的全长 cDNA 序列分析 | 第31-35页 |
·RNA 质量检测及第一链的获得 | 第31页 |
·MBD701 基因的克隆及序列分析 | 第31-35页 |
·植物表达载体的构建 | 第35-38页 |
·水稻 pCAMPVII-35s-MBD701-i 表达载体的构建 | 第35-38页 |
·水稻 pCAMPVII-RGA-MBD701-i 表达载体的构建 | 第38页 |
·水稻遗传转化结果 | 第38-41页 |
·水稻胚性愈伤的获得 | 第38-39页 |
·抗性愈伤组织筛选及植株再生 | 第39-40页 |
·转基因植株的 PCR 鉴定 | 第40-41页 |
5 结论与讨论 | 第41-43页 |
·克隆了 MBD701 基因,并系统分析其结构特征 | 第41页 |
·成功构建了植物表达载体 | 第41-42页 |
·获得了初步鉴定的转基因水稻 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
Abstract | 第47-48页 |