| 目录 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-16页 |
| ABSTRACT | 第16-23页 |
| 符号说明 | 第23-24页 |
| 第一章 前言 | 第24-28页 |
| ·双底物特异性络氨酸磷酸化调节激酶(DYRK1A) | 第24-25页 |
| ·表达方式和活性分析 | 第24页 |
| ·剪切异构体 | 第24-25页 |
| ·DYRK1A作用底物及与其他蛋白的相互作用 | 第25页 |
| ·DYRK1A的生理和病理作用 | 第25页 |
| ·神经元限制性沉默因子(Neuron Restrictive Silencing Facto,NRSF)/Rel沉默性转录因子(Repressor Element(Re)-1-Silencing Transcription Factor,REST) | 第25-28页 |
| ·REST简介 | 第25-26页 |
| ·REST表达方式、活性以及病理生理功能 | 第26页 |
| ·DYRKA和REST的相互作用 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-49页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·细菌培养 | 第29页 |
| ·细胞培养 | 第29页 |
| ·PCR仪器 | 第29页 |
| ·蛋白检测 | 第29-30页 |
| ·离心机 | 第30页 |
| ·高水准试剂配制相关仪器 | 第30页 |
| ·酶标仪 | 第30页 |
| ·切片机 | 第30页 |
| ·高压消毒 | 第30页 |
| ·质粒构建 | 第30-34页 |
| ·人类DYRK1A启动子质粒的构建 | 第30-32页 |
| ·表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·sIRNA的构建 | 第33-34页 |
| ·细胞培养 | 第34-35页 |
| ·细胞转染 | 第35页 |
| ·双荧光素酶报告基因分析 | 第35-36页 |
| ·蛋白质的半衰期检测 | 第36页 |
| ·逆转录-多聚酶链反应 | 第36-39页 |
| ·细胞及脑组织准备 | 第36页 |
| ·RNA提取 | 第36-37页 |
| ·cDNA合成 | 第37-38页 |
| ·普通半定量PCR | 第38页 |
| ·实时定量PCR | 第38-39页 |
| ·Western Blot蛋白分析 | 第39-40页 |
| ·免疫共沉淀(CO-IP) | 第40-41页 |
| ·免疫荧光 | 第41-42页 |
| ·凝胶迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA) | 第42-43页 |
| ·核蛋白的提取 | 第42页 |
| ·EMSA实验 | 第42-43页 |
| ·染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,CHIP) | 第43-48页 |
| ·体内交联和裂解 | 第43-44页 |
| ·超声剪切DNA | 第44-45页 |
| ·交联蛋白/DNA的免疫沉淀 | 第45-46页 |
| ·蛋白质/DNA复合体的洗脱 | 第46页 |
| ·游离DNA | 第46页 |
| ·纯化DNA | 第46-47页 |
| ·PCR | 第47-48页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·核苷酸序列编号 | 第48页 |
| ·数据分析 | 第48-49页 |
| 第三章 结果 | 第49-63页 |
| ·REST可以激活DYRK1A基因的转录 | 第49-51页 |
| ·人类DYRK1A基因启动子中功能性NRSE位点的确立 | 第51-55页 |
| ·DYRK1A和REST协同表达 | 第55-57页 |
| ·DYRK1A表达量的变化可以改变REST蛋白稳定性 | 第57-60页 |
| ·DYRK1A表达量的变化可以降低REST的转录活性 | 第60-63页 |
| 第四章 结论和讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第74-75页 |
| 外文论文 | 第75-129页 |
