摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-17页 |
1 猪圆环病毒 | 第13页 |
2 鸡传染性贫血病毒 | 第13-14页 |
3 鸭圆环病毒 | 第14-17页 |
·鸭圆环病毒的病原学 | 第14-15页 |
·鸭圆环病毒的基因组 | 第15-16页 |
·鸭圆环病毒的流行病学 | 第16页 |
·鸭圆环病毒的诊断 | 第16-17页 |
第二部分 鸭圆环病毒广西株的全基因序列分析 | 第17-25页 |
摘要 | 第17页 |
1 材料与方法 | 第17-20页 |
·病料 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·引物设计 | 第18-19页 |
·构建质粒 | 第19-20页 |
·PCR产物的回收 | 第19-20页 |
·连接载体 | 第20页 |
·转化 | 第20页 |
·阳性的选取及序列测定 | 第20页 |
·鸭圆环病毒的序列分析 | 第20页 |
2 结果 | 第20-23页 |
3 讨论 | 第23-25页 |
第三部分 分子生物学检测方法的建立 | 第25-46页 |
试验一 鸭圆环病毒LAMP可视化检測方法的建立 | 第25-32页 |
摘要 | 第25-26页 |
1 材料与方法 | 第26-27页 |
·病毒株 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·引物的设计与合成 | 第26页 |
·DNA抽提 | 第26页 |
·LAMP反应条件的优化 | 第26-27页 |
·特异性和灵敏度检验 | 第27页 |
·临床样品检测 | 第27页 |
2 结果 | 第27-31页 |
·LAMP反应条件的优化 | 第27-28页 |
·特异性检验 | 第28-29页 |
·灵敏度实验 | 第29-30页 |
·临床样品检测 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-32页 |
试验二 SYBER GREEN I焚光定量PCR检測鸭圆环病毒方法的建立 | 第32-39页 |
摘要 | 第32页 |
1 材料与方法 | 第32-35页 |
·病毒株 | 第32-33页 |
·主要试剂和设备 | 第33页 |
·引物的设计与合成 | 第33页 |
·DNA抽提 | 第33页 |
·标准品的制备 | 第33-34页 |
·标准曲线、熔解曲线的制作及敏感性试验 | 第34页 |
·特异性试验 | 第34页 |
·重复性试验 | 第34-35页 |
2 结果 | 第35-37页 |
·测定质粒DNA浓度 | 第35页 |
·标准曲线的制作 | 第35-36页 |
·敏感性试验 | 第36页 |
·特异性试验 | 第36-37页 |
·重复性试验 | 第37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
试验三 鸭圆环病毒和鸭I型肝炎病毒二重PCR检測方法的研究 | 第39-46页 |
摘要 | 第39-40页 |
1 材料和方法 | 第40-42页 |
·试验毒株 | 第40页 |
·主要试剂与设备 | 第40页 |
·供试毒(菌)株核酸的抽提 | 第40页 |
·引物设计和合成 | 第40-41页 |
·反转录 | 第41页 |
·PCR反应 | 第41页 |
·不同引物浓度和二重PCR扩增条件的优化 | 第41-42页 |
·二重PCR的特异性试验 | 第42页 |
·二重PCR的敏感性试验 | 第42页 |
·临床样品实验 | 第42页 |
2 结果 | 第42-44页 |
·不同引物浓度的二重PCR条件的优化 | 第42页 |
·二重PCR的特异性扩增结果 | 第42-43页 |
·二重PCR的敏感性扩增结果 | 第43-44页 |
·部分临床样品实验 | 第44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
个人简历 | 第52页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第52页 |