| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-33页 |
| 1 环境污染简介 | 第16-17页 |
| 2 遗传毒性检测技术的研究概况 | 第17-23页 |
| ·体外实验 | 第18-22页 |
| ·建立在细胞基础上的遗传毒性检测技术 | 第18-21页 |
| ·哺乳动物细胞的基因突变实验 | 第18页 |
| ·单细胞凝胶电泳实验 | 第18-19页 |
| ·微核实验 | 第19-20页 |
| ·荧光原位杂交技术 | 第20页 |
| ·体外染色体畸变实验 | 第20-21页 |
| ·建立在细菌基础上的遗传毒性检测实验-Ames 实验 | 第21-22页 |
| ·体内实验 | 第22-23页 |
| ·转基因动物基因突变实验 | 第22页 |
| ·显性致死实验 | 第22-23页 |
| ·体内染色体畸变实验（Ishidate，1988） | 第23页 |
| 3 p53 信号通路与 DNA 损伤 | 第23-25页 |
| 4 p21 基因的表达与 DNA 损伤 | 第25-26页 |
| 5 转染技术简介 | 第26-28页 |
| 6 双荧光素酶报告基因系统介绍 | 第28-29页 |
| 7 牙鲆鳃细胞系简介 | 第29-30页 |
| 8 本文的立题依据、研究目的及采用的技术路线 | 第30-33页 |
| 第二章 FG 细胞系转染条件的优化及其 p53 信号通路完整性的确定 | 第33-48页 |
| 1 前言 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·细胞系 | 第34页 |
| ·质粒 | 第34页 |
| ·化学药品 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·细胞培养 | 第36页 |
| ·DNA 质粒提取 | 第36-38页 |
| ·质粒的转化（以 pGL-p21-luc 为例，其他质粒类似操作，操作过程参照 Trans10 ChemicallyCompetent Cell 说明书） | 第36-37页 |
| ·质粒的提取（以 pGL-p21-luc 为例，其他质粒相同操作） | 第37-38页 |
| ·FG 细胞转染条件的优化 | 第38-42页 |
| ·转染试剂的选择 | 第38-40页 |
| ·共转染质粒之间比例的优化 | 第40-42页 |
| ·FG 细胞的内源性 p53 信号通路完整性的检测 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·质粒的提取 | 第43页 |
| ·转染试剂的选择 | 第43-44页 |
| ·共转染质粒之间最佳比例的确定 | 第44-45页 |
| ·FG 细胞内源性 p53 信号通路完整性的确定 | 第45-47页 |
| 4 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 稳定转染 p21FGLuc 细胞的建立 | 第48-55页 |
| 1 前言 | 第48-49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-53页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·FG 细胞 | 第49页 |
| ·质粒 | 第49页 |
| ·化学药品 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·G418 对 FG 细胞的最佳筛选浓度 | 第50页 |
| ·稳定转染 p21FGLuc 细胞的建立 | 第50-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-54页 |
| ·FG 细胞的最佳 G418 筛选浓度 | 第53-54页 |
| ·稳定转染 p21FGLuc 细胞的建立 | 第54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| 第四章 转基因鱼类细胞(p21FGLuc)遗传毒性检测系统的特异性和灵敏性的验证 | 第55-76页 |
| 1 前言 | 第55-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-63页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要的仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-63页 |
| ·溶液配制 | 第57-58页 |
| ·MTT 检测 | 第58-59页 |
| ·p21FGLuc 细胞遗传毒性检测系统特异性的验证 | 第59-60页 |
| ·三种药物诱导 FG 细胞荧光信号表达的时间效应关系检测 | 第59-60页 |
| ·三种药物诱导 FG 细胞荧光信号表达的剂量效应关系检测 | 第60页 |
| ·p21FGLuc 细胞遗传毒性检测系统灵敏度的验证 | 第60-62页 |
| ·p21FGLuc 细胞遗传毒性检测系统可靠性的验证 | 第62-63页 |
| 3 实验结果 | 第63-72页 |
| ·MTT 检测实验结果 | 第63-65页 |
| ·p21FGLuc 细胞遗传毒性检测系统特异性的验证 | 第65-68页 |
| ·p21FGLuc 细胞遗传毒性检测系统灵敏度的验证 | 第68-71页 |
| ·p21FGLuc 细胞遗传毒性检测系统可靠性的验证 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简介 | 第84页 |
