| 目录 | 第1-6页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 符号说明 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-20页 |
| ·双底物特异性酪氨酸磷酸化调节激酶(DYRK1A) | 第14-16页 |
| ·DYRK1A的组成与功能 | 第14页 |
| ·DYRK1A的分布 | 第14页 |
| ·DYRK1A的作用底物和与其他蛋白的相互作用 | 第14-15页 |
| ·DYRK1A与疾病 | 第15-16页 |
| ·肌细胞增强因子2(MEF2) | 第16-20页 |
| ·MEF2家族 | 第16页 |
| ·MEF2基因结构与功能 | 第16页 |
| ·MEF2的信号通路 | 第16-17页 |
| ·MAKP信号途径 | 第16-17页 |
| ·Ca~(2+)信号途径 | 第17页 |
| ·Calcineurin信号通路 | 第17页 |
| ·MEF2在多系统发育中的调节作用 | 第17-20页 |
| ·MEF2调节脊椎动物肌细胞的分化 | 第17-18页 |
| ·MEF2调控脊椎动物心脏的发育 | 第18页 |
| ·MEF2调控神经嵴的发育 | 第18页 |
| ·MEF2调节血管的完整性 | 第18-19页 |
| ·MEF2在骨发育中的作用 | 第19页 |
| ·MEF2调控T细胞的发育 | 第19-20页 |
| ·MEF2调节神经元的分化和生存 | 第20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·试剂 | 第20-23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·细菌培养仪 | 第23页 |
| ·细胞培养仪 | 第23页 |
| ·PCR仪器 | 第23页 |
| ·蛋白检测仪 | 第23页 |
| ·离心机 | 第23页 |
| ·高水准试剂配制相关仪器 | 第23-24页 |
| ·酶标仪 | 第24页 |
| ·高压消毒器 | 第24页 |
| ·质粒的构建 | 第24-26页 |
| ·DYRK1A启动子质粒的构建 | 第24-25页 |
| ·MEF2D突变质粒的构建 | 第25-26页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·细胞培养基的制备 | 第26页 |
| ·细胞的消化 | 第26页 |
| ·细胞转染 | 第26-27页 |
| ·双荧光素酶活性检测 | 第27-28页 |
| ·反转录PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR) | 第28-29页 |
| ·细胞及脑组织的制备 | 第28页 |
| ·RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·cDNA的合成 | 第29页 |
| ·半定量-PCR(Semi-Quantification-PCR) | 第29页 |
| ·Western Blotting | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP) | 第30-31页 |
| ·核蛋白的提取和EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay)实验 | 第31-32页 |
| ·核蛋白的提取 | 第31-32页 |
| ·EMSA实验 | 第32页 |
| ·染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP) | 第32-35页 |
| ·细胞收集及溶液配制 | 第32-33页 |
| ·超声分割DNA | 第33页 |
| ·交联蛋白/DNA的IP | 第33-34页 |
| ·蛋白/DNA的洗脱 | 第34页 |
| ·分离蛋白/DNA复合体 | 第34页 |
| ·酚-氯仿提纯DNA | 第34页 |
| ·PCR | 第34-35页 |
| ·细胞爬片 | 第35页 |
| ·数据分析 | 第35-36页 |
| 第三章 实验结果 | 第36-47页 |
| ·MEF2D可以激活人类DYRK1A基因 | 第36-37页 |
| ·MEF2D激活DYRK1A荧光素酶活性 | 第36-37页 |
| ·MEF2D可以上调DYRK1A的mRNA表达 | 第37页 |
| ·DYRK1A启动子上含有MEF2反应元件 | 第37-40页 |
| ·构建不同片段的含荧光酶报告基因质粒 | 第37-38页 |
| ·验证MEF2D的结合区域 | 第38-40页 |
| ·DYRK1A与MEF2D在细胞中及小鼠脑的共表达 | 第40-41页 |
| ·DYRK1A与MEF2D在细胞中共定位 | 第40页 |
| ·DYRK1A与MEF2D在小鼠脑中共表达 | 第40-41页 |
| ·MEF2D的表达可以通过DYRK1A的磷酸化作用增加 | 第41-45页 |
| ·MEF2D和DYRK1A蛋白相互作用 | 第41-42页 |
| ·DYRK1A增加了MEF2D蛋白的稳定性 | 第42-43页 |
| ·DYRK1A磷酸化MEF2D及其磷酸化位点 | 第43-45页 |
| ·DYRK1A对MEF2D转录活性的调节 | 第45-47页 |
| ·DYRK1A可下调MEF2D的转录活性 | 第45-46页 |
| ·DYRK1A可下调MEF2D的靶基因Nur77的转录 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论与总结 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第55-56页 |
| 外文论文 | 第56-101页 |
