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顺铂对MCF-7细胞DNA损伤分子机制的初步研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第6-8页
英文缩写词简表第8-9页
前言第9-13页
技术路线第13-14页
一、材料与方法第14-26页
 1.材料第14-19页
   ·细胞系第14页
   ·引物第14页
   ·主要试剂第14-15页
   ·主要抗体第15页
   ·主要试剂配制第15-18页
   ·主要实验仪器第18-19页
 2.方法第19-26页
   ·细胞培养第19页
   ·MTT测定DDP作用于MCF-7细胞的的IC_(50)值第19页
   ·RNA水平检测DNA损伤修复相关基因的变化第19-21页
   ·免疫荧光组织化学第21-22页
   ·Western blotting检测损伤修复相关基因表达情况第22-24页
   ·hochest 33258荧光染色,观察细胞形态学变化第24-25页
   ·统计学分析第25-26页
二、结果第26-35页
 1.MTT测DDP作用MCF-7细胞的IC_(50)值第26页
 2.DDP对DSBs判断标准γ-H2AX及BRCA1的表达水平的影响第26-28页
   ·DDP作用于MCF-7细胞不同时间点的γ-H2AX焦点及BRCA1的变化第26-27页
   ·Western blotting方法检测DDP作用于MCF-7细胞株不同时间后γ-H2AX、BRCA1蛋白表达水平的变化第27-28页
 3.RT-PCR检测DNA损伤修复相关基因表达影响第28-30页
 4.Western blotting检测DDP对MCF-7细胞株中ATM及其磷酸化形式ATM(Ser1981)的表达水平的影响第30-31页
 5.Western blotting检测DDP对MCF-7细胞株中Chk2及其磷酸化形式Chk2(Thr68)、Chk2(Ser19)的表达水平的影响第31-32页
 6.DDP对P53、P27、P21、Rb蛋白表达水平变化的影响第32-33页
 7.DDP对MCF-7细胞凋亡形态学的影响第33页
 8.DDP作用MCF-7细胞后,Caspase-3蛋白的表达情况第33-35页
三、讨论第35-38页
四、结论第38-39页
参考文献第39-42页
综述第42-51页
 参考文献第49-51页
致谢第51-52页
攻读硕士期间发表的学术论文及摘要第52页

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