玉米淀粉合成关键酶基因shys的遗传转化
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-29页 |
| ·玉米遗传转化中常用的两种转化技术 | 第12-18页 |
| ·农杆菌介导法 | 第13-16页 |
| ·农杆菌介导的玉米遗传转化发展 | 第13页 |
| ·农杆菌浸染法的原理 | 第13-14页 |
| ·转化效率的影响因素 | 第14-16页 |
| ·基因枪法 | 第16-18页 |
| ·基因枪法的原理 | 第16-17页 |
| ·基因枪法的特点 | 第17页 |
| ·影响基因枪法转化效率的因素 | 第17-18页 |
| ·玉米遗传转化常用的受体系统 | 第18-20页 |
| ·原生质体再生系统 | 第18页 |
| ·种质系统 | 第18-19页 |
| ·愈伤组织再生系统 | 第19页 |
| ·直接分化再生系统 | 第19-20页 |
| ·幼胚 | 第20页 |
| ·遗传转化的目的基因 | 第20-22页 |
| ·选择标记基因 | 第20页 |
| ·报道基因 | 第20-21页 |
| ·功能基因 | 第21-22页 |
| ·抗虫基因 | 第21页 |
| ·抗除草剂基因 | 第21页 |
| ·雄性不育基因的利用 | 第21-22页 |
| ·改良玉米蛋白质的基因 | 第22页 |
| ·外源基因在转基因后代中的表达及稳定性 | 第22-23页 |
| ·转化后代外源基因的表达 | 第22页 |
| ·外源基因在转化后代中的稳定性 | 第22-23页 |
| ·淀粉合成相关酶的研究 | 第23-28页 |
| ·国内外研究情况 | 第23页 |
| ·参与淀粉合成的主要酶 | 第23-26页 |
| ·腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPP) | 第24页 |
| ·淀粉合成酶（SS） | 第24-25页 |
| ·淀粉分支酶（SBE） | 第25-26页 |
| ·淀粉去分支酶（SDBE） | 第26页 |
| ·转基因技术对淀粉合成途径的操纵 | 第26-28页 |
| ·AGP 基因 | 第26-27页 |
| ·SS 基因 | 第27页 |
| ·SBE 基因 | 第27-28页 |
| ·玉米转基因研究现状 | 第28-29页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-39页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·受体材料 | 第29页 |
| ·试验主要仪器设备 | 第29-30页 |
| ·主要试验试剂 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-39页 |
| ·目的基因和标记基因 | 第31页 |
| ·质粒载体和菌株 | 第31-32页 |
| ·培养基 | 第32页 |
| ·根癌农杆菌的培养与浸染 | 第32-33页 |
| ·农杆菌的培养与活化 | 第32页 |
| ·愈伤组织的浸染强度优化 | 第32-33页 |
| ·愈伤组织的浸染和抗性筛选 | 第33页 |
| ·基因枪轰击 | 第33-36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·微弹的制备 | 第33-34页 |
| ·质粒 DNA 提取方法(碱裂解法) | 第34页 |
| ·PCR 产物的转化及检测 | 第34-35页 |
| ·基因枪转化 | 第35-36页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选、分化与植株再生 | 第36页 |
| ·转基因植株 T0 代的分子检测 | 第36-39页 |
| ·转化植物 DNA 提取 | 第36-37页 |
| ·PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第38-39页 |
| ·Southern blotting | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·农杆菌适宜浸染强度的确定 | 第39-42页 |
| ·A188 不同浸染强度下的愈伤褐化率和分化率 | 第39-41页 |
| ·18-599 不同浸染强度的褐化率和分化率 | 第41-42页 |
| ·基因枪轰击参数的优化 | 第42-44页 |
| ·轰击距离对愈伤褐化率的影响 | 第42页 |
| ·轰击次数对愈伤褐化率的影响 | 第42-43页 |
| ·质粒浓度对愈伤褐化率的影响 | 第43-44页 |
| ·ABT 生根粉对幼苗生根的影响 | 第44页 |
| ·转基因植株的获得过程 | 第44-45页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第45-48页 |
| ·PCR 检测 | 第45-47页 |
| ·目的基因 shys 的 PCR 检测 | 第46页 |
| ·标记基因 NPTⅡ的 PCR 检测 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第47页 |
| ·Southern blotting 检测 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的种子收获 | 第48-49页 |
| ·两种转化方法的转化率 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第49-50页 |
| ·基因枪法的遗传转化 | 第50-52页 |
| ·培养基中生根粉对抗性苗生根的影响 | 第52页 |
| ·抗性植株炼苗移栽 | 第52页 |
| ·转化苗的检测 | 第52-53页 |
| ·AGPase 活性与籽粒淀粉含量的关系 | 第53页 |
| 5 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第66页 |
