| 英文缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 绪论 | 第13-26页 |
| ·干扰素概述 | 第14-17页 |
| ·干扰素的来源和分类 | 第14-15页 |
| ·干扰素的结构特征 | 第15-16页 |
| ·干扰素的性质和生物学特性 | 第16-17页 |
| ·干扰素的生物功能和作用机制 | 第17-18页 |
| ·抗病毒作用及其作用机制 | 第18页 |
| ·抗肿瘤作用及其作用机制 | 第18页 |
| ·免疫调节作用及其作用机制 | 第18页 |
| ·抗寄生虫、细菌作用及其作用机制 | 第18页 |
| ·干扰素发挥作用的信号转导通路 | 第18-19页 |
| ·IFN 信号调节因素 | 第19-20页 |
| ·干扰素在临床兽医中的应用 | 第20-22页 |
| ·基因工程干扰素的研究进展 | 第22页 |
| ·重组水貂干扰素的研究进展及生物制剂需求的迫切性 | 第22-23页 |
| ·水貂干扰素的应用和展望 | 第23-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-39页 |
| ·试验材料 | 第26-29页 |
| ·菌株、细胞 | 第26页 |
| ·载体 | 第26页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第26-29页 |
| ·试验方法 | 第29-39页 |
| ·水貂 IFN-α、IFN-β基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·设计引物 | 第29页 |
| ·组织 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·水貂干扰素基因的 RT-PCR 扩增 | 第29-31页 |
| ·水貂干扰素基因片段 PCR 产物的纯化回收 | 第31页 |
| ·目的基因的连接、转化及鉴定 | 第31-34页 |
| ·目的基因与 PEasy-T1 载体的连接体系 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞（E.coli DH5α）的制备 | 第31-32页 |
| ·连接产物转化 | 第32页 |
| ·重组质粒 DNA 的提取 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33页 |
| ·阳性克隆序列测序 | 第33-34页 |
| ·水貂α、β干扰素基因的遗传进化分析 | 第34页 |
| ·水貂干扰素基因真核表达载体(PCDNA3.1)的构建 | 第34-35页 |
| ·干扰素基因片段的回收 | 第34页 |
| ·真核表达载体质粒 PCDNA3.1 的回收 | 第34-35页 |
| ·真核表达载体重组质粒的构建和鉴定 | 第35页 |
| ·水貂干扰素基因真核表达载体(pPIC9K)的构建 | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·pPIC9K -MiIFNα、pPIC9K-MiIFNβ的构建 | 第35-36页 |
| ·水貂干扰素基因原核表达载体(PET32a)的构建 | 第36-39页 |
| ·引物设计和 PCR 扩增 | 第36页 |
| ·PET32a-MiIFNα、PET32a-MiIFNβ的构建 | 第36页 |
| ·诱导物浓度选择 | 第36-37页 |
| ·表达蛋白存在形式确定 | 第37页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第37页 |
| ·表达的重组 PET32a-MiIFN-α/β蛋白的 Western blot 鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组水貂 IFN-β蛋白纯化 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·水貂α、β干扰素基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·水貂α、β干扰素基因的克隆结果 | 第39-40页 |
| ·酶切鉴定 | 第40页 |
| ·MiIFN-α和 MiIFN-β基因测序结果分析 | 第40-44页 |
| ·MiIFN-α、β基因序列分析 | 第41-42页 |
| ·MiIFN-α、β基因的遗传进化分析 | 第42-44页 |
| ·MiIFN-α、β基因的进化树 | 第44页 |
| ·真核表达载体（PCDNA3.1）的构建 | 第44-45页 |
| ·真核表达载体（pPIC9K）的构建 | 第45页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·原核表达重组质粒在大肠杆菌中的表达结果 | 第46-47页 |
| ·表达 PET32a-MiIFNα/β蛋白的 Westen-blot 结果 | 第47-48页 |
| ·重组水貂 IFN-β蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·水貂外周血淋巴细胞总 RNA 的提取 | 第49页 |
| ·水貂 IFN-α，β基因的扩增及序列分析 | 第49-50页 |
| ·表达载体的构建 | 第50页 |
| ·表达的蛋白形成包涵体的原因 | 第50-51页 |
| 5 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 研究生期间发表论文 | 第64页 |
