摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-21页 |
·ppGalNAc-Ts family概述 | 第12-14页 |
·ppGalNAc-Ts家族的酶活特性与分布 | 第14-18页 |
·ppGalNAc-Ts家族的酶活特性 | 第14-15页 |
·ppGalNAc-T成员的酶活特性 | 第15-16页 |
·ppGalNAc-Ts家族的分布 | 第16-18页 |
·ppGalNAc-T10 的酶活特性及其与T20 的关系 | 第18页 |
·ppGalNAc-T10 与ppGalNAc-T20 的序列比对 | 第18-19页 |
·本论文主要研究工作 | 第19-21页 |
第二章 ppGalNAc-Truncated-T20 酶活性的测定 | 第21-45页 |
·引言 | 第21页 |
·材料与试剂 | 第21-25页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·实验试剂 | 第22页 |
·试剂配制 | 第22-24页 |
·实验仪器 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-32页 |
·截短T20 酶的设计 | 第25页 |
·质粒构建 | 第25-28页 |
·细胞培养 | 第28-29页 |
·细胞转染 | 第29页 |
·酶的精制 | 第29页 |
·Western Blot | 第29-30页 |
·银染 | 第30-31页 |
·酶活性的测定 | 第31-32页 |
·实验结果 | 第32-44页 |
·截短T20 酶(FLAG-ppGalNAc-truncated-T20)的设计 | 第32页 |
·真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
·酶的精制 | 第33-35页 |
·底物制备 | 第35页 |
·T20 全长酶与T10 全长酶的酶活特性比较 | 第35-37页 |
·T20 全长与T20 截短酶活特性比较 | 第37-39页 |
·T20 酶活与结构的分析 | 第39-44页 |
·本章小结 | 第44-45页 |
第三章 ppGalNAc-T10 和ppGalNAc-T20 抗体的制备 | 第45-59页 |
·引言 | 第45-46页 |
·材料与试剂 | 第46-47页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·实验试剂 | 第47页 |
·试剂配制 | 第47页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-50页 |
·抗原序列的设计 | 第48页 |
·质粒构建 | 第48-49页 |
·抗原蛋白的表达和纯化 | 第49页 |
·抗体的表达和纯化 | 第49-50页 |
·细胞培养 | 第50页 |
·细胞转染 | 第50页 |
·细胞裂解 | 第50页 |
·Western Blot | 第50页 |
·实验结果 | 第50-58页 |
·抗原序列的设计 | 第50-51页 |
·原核表达载体的构建 | 第51-52页 |
·GST融合蛋白的表达 | 第52-53页 |
·GST融合蛋白的纯化 | 第53-54页 |
·抗体的表达和纯化 | 第54-55页 |
·抗体特异性检测 | 第55-57页 |
·抗体灵敏度检测 | 第57-58页 |
·本章小结 | 第58-59页 |
第四章 全文总结与展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
发表论文情况 | 第70页 |
申请专利情况 | 第70-71页 |
所获奖励与资助 | 第71-73页 |