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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶(ppGalNAc-T20)的酶活检测与抗体制备

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 前言第12-21页
   ·ppGalNAc-Ts family概述第12-14页
   ·ppGalNAc-Ts家族的酶活特性与分布第14-18页
     ·ppGalNAc-Ts家族的酶活特性第14-15页
     ·ppGalNAc-T成员的酶活特性第15-16页
     ·ppGalNAc-Ts家族的分布第16-18页
   ·ppGalNAc-T10 的酶活特性及其与T20 的关系第18页
   ·ppGalNAc-T10 与ppGalNAc-T20 的序列比对第18-19页
   ·本论文主要研究工作第19-21页
第二章 ppGalNAc-Truncated-T20 酶活性的测定第21-45页
   ·引言第21页
   ·材料与试剂第21-25页
     ·实验材料第21-22页
     ·实验试剂第22页
     ·试剂配制第22-24页
     ·实验仪器第24-25页
   ·实验方法第25-32页
     ·截短T20 酶的设计第25页
     ·质粒构建第25-28页
     ·细胞培养第28-29页
     ·细胞转染第29页
     ·酶的精制第29页
     ·Western Blot第29-30页
     ·银染第30-31页
     ·酶活性的测定第31-32页
   ·实验结果第32-44页
     ·截短T20 酶(FLAG-ppGalNAc-truncated-T20)的设计第32页
     ·真核表达载体的构建第32-33页
     ·酶的精制第33-35页
     ·底物制备第35页
     ·T20 全长酶与T10 全长酶的酶活特性比较第35-37页
     ·T20 全长与T20 截短酶活特性比较第37-39页
     ·T20 酶活与结构的分析第39-44页
   ·本章小结第44-45页
第三章 ppGalNAc-T10 和ppGalNAc-T20 抗体的制备第45-59页
   ·引言第45-46页
   ·材料与试剂第46-47页
     ·实验材料第46-47页
     ·实验试剂第47页
     ·试剂配制第47页
     ·实验仪器第47页
   ·实验方法第47-50页
     ·抗原序列的设计第48页
     ·质粒构建第48-49页
     ·抗原蛋白的表达和纯化第49页
     ·抗体的表达和纯化第49-50页
     ·细胞培养第50页
     ·细胞转染第50页
     ·细胞裂解第50页
     ·Western Blot第50页
   ·实验结果第50-58页
     ·抗原序列的设计第50-51页
     ·原核表达载体的构建第51-52页
     ·GST融合蛋白的表达第52-53页
     ·GST融合蛋白的纯化第53-54页
     ·抗体的表达和纯化第54-55页
     ·抗体特异性检测第55-57页
     ·抗体灵敏度检测第57-58页
   ·本章小结第58-59页
第四章 全文总结与展望第59-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
发表论文情况第70页
申请专利情况第70-71页
所获奖励与资助第71-73页

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