摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
英文縮写注释 | 第15-17页 |
前言 | 第17-20页 |
技术路线 | 第20-23页 |
第一章 缺氧-再供氧诱导PC12细胞Cul4A基因表达 | 第23-35页 |
·材料与方法 | 第23-31页 |
·材料 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-31页 |
·结果 | 第31-33页 |
·缺氧系统效果评估 | 第31-32页 |
·H/R诱导PC12细胞内源性Cul4A mRNA表达 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
·细胞系的选择 | 第33页 |
·评估细胞缺氧系统的有效性及稳定性 | 第33-34页 |
·PC12细胞内源性Cul4A基因对H/R的响应 | 第34-35页 |
第二章 人CUL4A重组腺病毒载体的构建及其在PC12细胞中的表达特点 | 第35-55页 |
·材料与方法 | 第35-47页 |
·材料 | 第35-39页 |
·方法 | 第39-47页 |
·结果 | 第47-53页 |
·穿梭质粒pDC315-hCUL4A-EGFP的构建 | 第47-48页 |
·pDC315-hCUL4A-EGFP质粒表达检测 | 第48-50页 |
·腺病毒包装、纯化及滴度测定 | 第50页 |
·PC12细胞表达hCUL4A-GFP | 第50-51页 |
·hCUL4A-GFP融合蛋白在PC12细胞中的表达特征 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第三章 过表达人CUL4A对PC12细胞缺氧-再供氧损伤的保护作用及其机制探讨 | 第55-71页 |
·材料与方法 | 第55-62页 |
·材料 | 第55-57页 |
·方法 | 第57-62页 |
·结果 | 第62-68页 |
·过表达hCUL4A促进H/R后的PC12细胞存活 | 第62-65页 |
·过表达hCUL4A抑制PC12细胞H/R后DNA损伤 | 第65页 |
·过表达hCUL4A调节PC12细胞H/R后细胞凋亡相关蛋白的表达 | 第65-68页 |
·讨论 | 第68-71页 |
·CUL4A对细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第68-69页 |
·CUL4A在H/R引起的损伤中的蛋白降解与非蛋白降解功能 | 第69-71页 |
第四章 过表达hCUL4A对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 | 第71-93页 |
·材料与方法 | 第71-82页 |
·材料 | 第71-73页 |
·方法 | 第73-82页 |
·结果 | 第82-90页 |
·hCUL4A-GFP融合蛋白在大鼠脑中的表达特点 | 第82-84页 |
·hCUL4A过表达对I/R导致的脑梗塞体积及脑水肿程度的影响 | 第84-86页 |
·hCUL4A过表达对I/R导致的神经组织病理改变的影响 | 第86-89页 |
·hCUL4A过表达对I/R后大鼠神经行为的影响 | 第89-90页 |
·讨论 | 第90-93页 |
·CUL4A在脑I/R损伤中的作用 | 第90-92页 |
·前景与展望 | 第92-93页 |
结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-101页 |
附录1 pOTB7-CUL4A质粒图谱 | 第101-102页 |
附录2 pDC315-EGFP质粒图谱 | 第102-103页 |
附录3 pBHG lox ΔE1,3 Cre质粒图谱 | 第103-104页 |
综述 CUL4A与缺氧再供氧、缺血再灌注损伤的研究进展 | 第104-120页 |
参考文献 | 第113-120页 |
致谢 | 第120-122页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第122-124页 |