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hCUL4A过表达对缺氧/缺血—再供氧/再灌注损伤的保护作用及机制初探

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
英文縮写注释第15-17页
前言第17-20页
技术路线第20-23页
第一章 缺氧-再供氧诱导PC12细胞Cul4A基因表达第23-35页
   ·材料与方法第23-31页
     ·材料第23-25页
     ·方法第25-31页
   ·结果第31-33页
     ·缺氧系统效果评估第31-32页
     ·H/R诱导PC12细胞内源性Cul4A mRNA表达第32-33页
   ·讨论第33-35页
     ·细胞系的选择第33页
     ·评估细胞缺氧系统的有效性及稳定性第33-34页
     ·PC12细胞内源性Cul4A基因对H/R的响应第34-35页
第二章 人CUL4A重组腺病毒载体的构建及其在PC12细胞中的表达特点第35-55页
   ·材料与方法第35-47页
     ·材料第35-39页
     ·方法第39-47页
   ·结果第47-53页
     ·穿梭质粒pDC315-hCUL4A-EGFP的构建第47-48页
     ·pDC315-hCUL4A-EGFP质粒表达检测第48-50页
     ·腺病毒包装、纯化及滴度测定第50页
     ·PC12细胞表达hCUL4A-GFP第50-51页
     ·hCUL4A-GFP融合蛋白在PC12细胞中的表达特征第51-53页
   ·讨论第53-55页
第三章 过表达人CUL4A对PC12细胞缺氧-再供氧损伤的保护作用及其机制探讨第55-71页
   ·材料与方法第55-62页
     ·材料第55-57页
     ·方法第57-62页
   ·结果第62-68页
     ·过表达hCUL4A促进H/R后的PC12细胞存活第62-65页
     ·过表达hCUL4A抑制PC12细胞H/R后DNA损伤第65页
     ·过表达hCUL4A调节PC12细胞H/R后细胞凋亡相关蛋白的表达第65-68页
   ·讨论第68-71页
     ·CUL4A对细胞凋亡相关蛋白的影响第68-69页
     ·CUL4A在H/R引起的损伤中的蛋白降解与非蛋白降解功能第69-71页
第四章 过表达hCUL4A对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用第71-93页
   ·材料与方法第71-82页
     ·材料第71-73页
     ·方法第73-82页
   ·结果第82-90页
     ·hCUL4A-GFP融合蛋白在大鼠脑中的表达特点第82-84页
     ·hCUL4A过表达对I/R导致的脑梗塞体积及脑水肿程度的影响第84-86页
     ·hCUL4A过表达对I/R导致的神经组织病理改变的影响第86-89页
     ·hCUL4A过表达对I/R后大鼠神经行为的影响第89-90页
   ·讨论第90-93页
     ·CUL4A在脑I/R损伤中的作用第90-92页
     ·前景与展望第92-93页
结论第93-94页
参考文献第94-101页
附录1 pOTB7-CUL4A质粒图谱第101-102页
附录2 pDC315-EGFP质粒图谱第102-103页
附录3 pBHG lox ΔE1,3 Cre质粒图谱第103-104页
综述 CUL4A与缺氧再供氧、缺血再灌注损伤的研究进展第104-120页
 参考文献第113-120页
致谢第120-122页
攻读学位期间主要的研究成果第122-124页

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