| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-25页 |
| 第一章 鸡白细胞介素2的研究 | 第11-25页 |
| 1 分子生物学研究 | 第11-16页 |
| ·鸡IL-2基因的克隆与表达 | 第11-14页 |
| ·IL-2的蛋白质结构及其二硫键 | 第14-16页 |
| 2 鸡IL-2的纯化、复性及活性检测 | 第16-25页 |
| ·IL-2的纯化 | 第16-19页 |
| ·IL-2的复性 | 第19-22页 |
| ·IL-2的活性检测 | 第22-25页 |
| 第二部分 研究内容 | 第25-71页 |
| 第一章 重组鸡白细胞介素2的制备与单体分离 | 第25-51页 |
| 1 材料 | 第26页 |
| ·质粒、菌株及生化试剂 | 第26页 |
| ·主要酶及试剂 | 第26页 |
| ·常用缓冲液及培养基配置 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-33页 |
| ·rchIL-2的原核表达和鉴定 | 第26-30页 |
| ·可溶性rchIL-2蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·不溶性rchIL-2蛋白的纯化 | 第31-33页 |
| ·rchIL-2单体的分离 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-47页 |
| ·rchIL-2表达蛋白的SDS-PAGE和Western-blotting鉴定 | 第33-34页 |
| ·rchIL-2的可溶性分析 | 第34页 |
| ·rchIL-2诱导表达的影响因素 | 第34-37页 |
| ·表达菌的破碎 | 第37-39页 |
| ·可溶性rchIL-2的非变性纯化 | 第39-40页 |
| ·可溶性rchIL-2非变性纯化的影响因素 | 第40-41页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第41-42页 |
| ·包涵体的裂解 | 第42-43页 |
| ·不溶性rchIL-2的变性纯化 | 第43页 |
| ·不溶性rchIL-2变性纯化的影响因素 | 第43-44页 |
| ·rchIL-2单体的制备及其优化 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| ·诱导条件的摸索 | 第47页 |
| ·表达菌的破碎 | 第47-48页 |
| ·可溶性rchIL-2的纯化 | 第48页 |
| ·包涵体的洗涤及其裂解 | 第48-49页 |
| ·不溶性rchIL-2的纯化 | 第49页 |
| ·单体的分离 | 第49-51页 |
| 第二章 重组鸡白细胞介素一2的复性及其生物学活性 | 第51-60页 |
| 1 材料 | 第51-52页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·常用缓冲液及培养基配置 | 第51-52页 |
| 2 方法 | 第52-54页 |
| ·rchIL-2的复性 | 第52-53页 |
| ·rchIL-2复性产物体外生物活性检测 | 第53-54页 |
| ·rchIL-2复性产物的疏水性检测 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-58页 |
| ·rchIL-2透析法复性折叠中点的寻找及可溶性摸索 | 第54-55页 |
| ·rchIL-2稀释法复性可溶性摸索 | 第55-56页 |
| ·rchIL-2复性产物的脱盐 | 第56页 |
| ·rchIL-2复性产物生物活性的检测 | 第56-57页 |
| ·rchIL-2复性产物疏水性的检测 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 二硫键对重组鸡白细胞介素2生物活性的影响 | 第60-64页 |
| 1 材料 | 第60页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·主要生物试剂 | 第60页 |
| ·常用缓冲液配置 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-61页 |
| ·二硫键断开rchIL-2及对照的制备 | 第60-61页 |
| ·生物活性的检测 | 第61页 |
| ·疏水性检测 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-63页 |
| ·rchIL-2变性纯化产物的非还原和还原电泳及Western-blotting鉴定 | 第61-62页 |
| ·生物活性的检测 | 第62页 |
| ·疏水性的检测 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录 常用缓冲液及培养基配方 | 第71-77页 |
| 攻读硕士期间的科研成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
