中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
1 前言 | 第7-11页 |
1.1 紫花苜蓿国内外研究概况 | 第7-11页 |
1.1.1 紫花苜蓿的起源 | 第7页 |
1.1.2 紫花苜蓿的分布 | 第7页 |
1.1.3 中国苜蓿品种资源的来源及发展 | 第7-8页 |
1.1.4 苜蓿的利用价值 | 第8-9页 |
1.1.5 分子标记技术在苜蓿中的研究进展 | 第9-11页 |
1.1.5.1 分子标记辅助育种和种质渐渗研究 | 第9-10页 |
1.1.5.2 遗传连锁图谱的绘制 | 第10页 |
1.1.5.3 种质鉴定和遗传多样性研究 | 第10-11页 |
1.2 微卫星标记研究进展 | 第11页 |
2 本项目研究的目的意义 | 第11-12页 |
3 材料与方法 | 第12-17页 |
3.1 试验材料 | 第12页 |
3.2 试验器材与试剂 | 第12-14页 |
3.2.1 器材 | 第12页 |
3.2.2 试剂 | 第12页 |
3.2.3 引物 | 第12-13页 |
3.2.4 主要试剂及缓冲溶液的配制 | 第13-14页 |
3.3 试验方法 | 第14-16页 |
3.3.1 样本采集 | 第14页 |
3.3.2 DNA提取 | 第14页 |
3.3.3 DNA浓度和质量检测 | 第14-15页 |
3.3.4 SSR反应体系及反应条件的优化 | 第15页 |
3.3.5 引物筛选 | 第15页 |
3.3.6 电泳检测PCR扩增产物 | 第15-16页 |
3.3.7 电泳结果数字化记录与多态性判断 | 第16页 |
3.3.8 标准分子量DNA(简写为M)与SSR分子量范围估测 | 第16页 |
3.4 SSR扩增带分析 | 第16-17页 |
3.4.1 扩增片段多态性 | 第16页 |
3.4.2 等位基因频率 | 第16-17页 |
3.4.3 平均杂合度 | 第17页 |
3.4.4 多态信息含量 | 第17页 |
3.4.5 聚类分析 | 第17页 |
4 结果与分析 | 第17-39页 |
4.1 模板DNA的纯度和浓度的检测 | 第17-19页 |
4.2 模板DNA降解程度的检测 | 第19页 |
4.3 紫花苜蓿SSR扩增因子优化结果 | 第19-20页 |
4.4 引物筛选结果 | 第20页 |
4.5 SSR扩增带的多态性 | 第20-33页 |
4.5.1 6对引物扩增带带型数据 | 第20-32页 |
4.5.2 6对引物在8个紫花苜蓿品种DNA样本中的SSR扩增总带数、特异带和特有带 | 第32-33页 |
4.6 品种内的DNA多态性 | 第33-36页 |
4.6.1 品种内的DNA多态性片段 | 第33页 |
4.6.2 品种内的遗传相似系数及遗传距离 | 第33页 |
4.6.3 品种内的杂合度和多态信息含量 | 第33-36页 |
4.6.3.1 各品种的6个微卫星座位的等位基因频率 | 第33-35页 |
4.6.3.2 品种内的杂合度和多态信息含量 | 第35-36页 |
4.7 品种间的DNA多态性 | 第36-39页 |
4.7.1 品种间的DNA多态性片段 | 第36-37页 |
4.7.2 品种间的遗传相似系数及遗传距离 | 第37页 |
4.7.3 品种间的基因分化系数 | 第37页 |
4.7.4 品种间的聚类关系 | 第37-39页 |
5. 讨论 | 第39-43页 |
5.1 紫花苜蓿DNA的提取 | 第39页 |
5.2 微卫星PCR反应体系及循环条件的影响因素 | 第39-40页 |
5.2.1 模板浓度 | 第39-40页 |
5.2.2 TaqDNA聚合酶 | 第40页 |
5.2.3 dNTP | 第40页 |
5.2.4 Mg~(2+)浓度 | 第40页 |
5.2.5 循环条件 | 第40页 |
5.3 影响银染效果的几个因素 | 第40-41页 |
5.3.1 染色时间 | 第40页 |
5.3.2 显色及停显 | 第40-41页 |
5.3.3 PCR产物上样量 | 第41页 |
5.4 关于微卫星位点多态性 | 第41页 |
5.5 品种内的遗传分析 | 第41-42页 |
5.6 品种间的遗传分析 | 第42-43页 |
5.6.1 基因分化系数 | 第42-43页 |
5.6.2 遗传距离 | 第43页 |
6. 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-53页 |
致谢 | 第53页 |