玉米Mo17CMS-J线粒体DNA R区域物理图谱构建及多型性分析
摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-26页 |
·课题的提出 | 第10-18页 |
·为什么利用S组 | 第10-11页 |
·植物CMS的分子机理简述及研究R区域的意义 | 第11-17页 |
·构建R区域物理图谱的意义 | 第17-18页 |
·构建物理图谱的常用方法 | 第18-26页 |
·DNA杂交法 | 第19-21页 |
·用大的基因组酶切片段为探针杂交 | 第19页 |
·单一探针法 | 第19-20页 |
·连接探针法 | 第20-21页 |
·指纹杂交法 | 第21页 |
·基因组的重叠缺失区域排列法 | 第21-22页 |
·双向高压脉冲电泳法 | 第22页 |
·部分酶切法 | 第22-23页 |
·转座子介导的物理图谱构建法 | 第23页 |
·酶切盒引入法 | 第23-24页 |
·双酶切法 | 第24页 |
·指纹印迹法 | 第24-26页 |
2 实验材料和方法 | 第26-35页 |
·构建物理图谱 | 第26-32页 |
·实验材料 | 第26页 |
·方法 | 第26-32页 |
·目标克隆的筛选 | 第26-28页 |
·质粒DNA的提取 | 第28页 |
·酶切 | 第28-30页 |
·连锁群的延伸 | 第30-31页 |
·酶切作图 | 第31-32页 |
·不同胞质R区域存在的证实和测序 | 第32-35页 |
·实验材料 | 第32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·引物设计 | 第32页 |
·玉米总DNA提取及纯化 | 第32-33页 |
·PCR产物的克隆 | 第33-34页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及DNA转化 | 第34页 |
·检测 | 第34页 |
·测序 | 第34-35页 |
3 实验结果与分析 | 第35-43页 |
·物理图谱的构建 | 第35-40页 |
·第一次筛选克隆的结果 | 第35页 |
·酶切结果 | 第35页 |
·消化克隆子V48 | 第35-37页 |
·克隆子B39、V48的物理图谱 | 第37-38页 |
·杂交 | 第38-39页 |
·被选择的阳性克隆的鉴定 | 第39页 |
·克隆子V48的BamHI+PstI消化结果 | 第39-40页 |
·不同胞质类型材料R区的证实和序列分析 | 第40-43页 |
·扩增结果 | 第40-41页 |
·测序结果 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-49页 |
·S组胞质中R的存在特点 | 第43页 |
·用双酶消化法组建DNA的物理图谱注意事项 | 第43-44页 |
·本实验方建物理图谱优点及局限 | 第44-45页 |
·物理图谱在今后研究中的应用 | 第45页 |
·关于S组CMS机理的讨论 | 第45-46页 |
·不同玉米胞质中R的存在 | 第46-49页 |
5 参考文献 | 第49-56页 |
致谢 | 第56页 |