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玉米Mo17CMS-J线粒体DNA R区域物理图谱构建及多型性分析

摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
1 前言第10-26页
   ·课题的提出第10-18页
     ·为什么利用S组第10-11页
     ·植物CMS的分子机理简述及研究R区域的意义第11-17页
     ·构建R区域物理图谱的意义第17-18页
   ·构建物理图谱的常用方法第18-26页
     ·DNA杂交法第19-21页
       ·用大的基因组酶切片段为探针杂交第19页
       ·单一探针法第19-20页
       ·连接探针法第20-21页
       ·指纹杂交法第21页
     ·基因组的重叠缺失区域排列法第21-22页
     ·双向高压脉冲电泳法第22页
     ·部分酶切法第22-23页
     ·转座子介导的物理图谱构建法第23页
     ·酶切盒引入法第23-24页
     ·双酶切法第24页
     ·指纹印迹法第24-26页
2 实验材料和方法第26-35页
   ·构建物理图谱第26-32页
     ·实验材料第26页
     ·方法第26-32页
       ·目标克隆的筛选第26-28页
       ·质粒DNA的提取第28页
       ·酶切第28-30页
       ·连锁群的延伸第30-31页
       ·酶切作图第31-32页
   ·不同胞质R区域存在的证实和测序第32-35页
     ·实验材料第32页
     ·方法第32-35页
       ·引物设计第32页
       ·玉米总DNA提取及纯化第32-33页
       ·PCR产物的克隆第33-34页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备及DNA转化第34页
       ·检测第34页
       ·测序第34-35页
3 实验结果与分析第35-43页
   ·物理图谱的构建第35-40页
     ·第一次筛选克隆的结果第35页
     ·酶切结果第35页
     ·消化克隆子V48第35-37页
     ·克隆子B39、V48的物理图谱第37-38页
     ·杂交第38-39页
     ·被选择的阳性克隆的鉴定第39页
     ·克隆子V48的BamHI+PstI消化结果第39-40页
   ·不同胞质类型材料R区的证实和序列分析第40-43页
     ·扩增结果第40-41页
     ·测序结果第41-43页
4 讨论第43-49页
   ·S组胞质中R的存在特点第43页
   ·用双酶消化法组建DNA的物理图谱注意事项第43-44页
   ·本实验方建物理图谱优点及局限第44-45页
   ·物理图谱在今后研究中的应用第45页
   ·关于S组CMS机理的讨论第45-46页
   ·不同玉米胞质中R的存在第46-49页
5 参考文献第49-56页
致谢第56页

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