| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-21页 |
| 1 本研究的目的意义 | 第11-13页 |
| ·禽流感的抗体治疗 | 第11-12页 |
| ·禽流感的 SIgA 抗体预防 | 第12-13页 |
| 2 预防性 SIgA 类抗体的研究 | 第13-15页 |
| ·SIgA 是免疫系统的第一道防线 | 第13-14页 |
| ·SIgA 具有优良的抗感染特性 | 第14页 |
| ·重组 SIgA 研究 | 第14-15页 |
| 3 基因工程抗体研究进展 | 第15-17页 |
| 4 重组抗体表达系统的研究 | 第17-18页 |
| 5 本研究的内容及方案 | 第18-21页 |
| ·SIgA 相关基因的克隆及序列分析 | 第18-19页 |
| ·抗 H5N1-HA 单抗可变区基因的克隆及序列分析 | 第19页 |
| ·嵌合 IgA 抗体基因的融合及轻重链真核表达质粒的构建 | 第19页 |
| ·人 IgJ 和pIgR 基因真核表达质粒的构建 | 第19页 |
| ·抗 H5N1-HA 嵌合抗体在 CHO 细胞中的表达及特性分析 | 第19-20页 |
| ·技术路线图（见下） | 第20-21页 |
| 研究报告 | 第21-82页 |
| 第一部分 人SIgA 相关基因的克隆及序列分析 | 第21-37页 |
| 1 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-31页 |
| 2 结果 | 第31-36页 |
| ·直接从基因组扩增pIgR 基因cDNA | 第31-32页 |
| ·直接从基因组扩增 IgJ 基因cDNA | 第32-33页 |
| ·直接从基因组扩增 IGHA 基因gDNA | 第33-34页 |
| ·IGHA、IgJ 和pIgR 基因的克隆 | 第34页 |
| ·IGHA、IgJ 和pIgR 基因克隆的DNA 序列分析 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 第二部分 抗H5N1-HA 单抗可变区基因的克隆及序列分析 | 第37-53页 |
| 1 材料和方法 | 第38-43页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| 2 结果 | 第43-52页 |
| ·McAb VH 和VK 基因的PCR 扩增 | 第43页 |
| ·重组质粒的 PCR 鉴定与酶切鉴定 | 第43-45页 |
| ·DNA 序列测定与分析 | 第45-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第三部分 嵌合IGA 抗体基因的融合及真核表达质粒的构建 | 第53-65页 |
| 1 材料和方法 | 第53-59页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-59页 |
| 2 结果 | 第59-63页 |
| ·嵌合 IgA 抗体基因的融合 | 第59页 |
| ·嵌合 IgA 抗体基因的克隆及序列分析 | 第59-63页 |
| ·人/鼠嵌合 IgA 抗体基因表达质粒的构建 | 第63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第四部分 人IgJ 和SC 基因真核表达质粒的构建 | 第65-73页 |
| 1 材料和方法 | 第66-69页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-69页 |
| 2 结果 | 第69-71页 |
| ·人 IgJ 链真核表达质粒的构建 | 第69-70页 |
| ·人分泌片基因(SC)真核表达质粒的构建 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 第五部分 抗H5N1-HA 嵌合抗体在CHO 细胞中的表达及特性分析 | 第73-82页 |
| 1 材料和方法 | 第74-77页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-77页 |
| 2 结果 | 第77-80页 |
| ·嵌合 IgA 抗体的 ELISA 检测 | 第77页 |
| ·嵌合 IgA 抗体的纯化 | 第77-78页 |
| ·嵌合 IgA 抗体的 SDS-PAGE 及 Western 印迹分析 | 第78-79页 |
| ·嵌合 SIgA 抗体 ELISA 检测 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-82页 |
| 全文结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 附录 | 第90-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 作者简历 | 第98页 |
