缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-13页 |
参考文献 | 第11-13页 |
2 材料 | 第13-15页 |
·菌株、细胞株及质粒 | 第13页 |
·引物合成及序列测定 | 第13页 |
·分子生物学工具酶 | 第13页 |
·常用分子生物学试剂盒 | 第13页 |
·细胞培养试剂与耗材 | 第13页 |
·GST 沉降实验试剂及免疫印迹试剂 | 第13-14页 |
·细胞免疫荧光染色试剂 | 第14页 |
·RNA 提取相关试剂 | 第14页 |
·其它常规试剂 | 第14页 |
·大型仪器 | 第14-15页 |
3 方法 | 第15-23页 |
·重组质粒构建、阳性克隆的鉴定 | 第15-16页 |
·Fhit 突变体融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化 | 第16页 |
·GST 沉降技术 | 第16-17页 |
·免疫印迹实验 | 第17页 |
·转染质粒的制备 | 第17页 |
·细胞培养与转染 | 第17-19页 |
·细胞中总RNA 的提取及RT-PCR 鉴定 | 第19-20页 |
·细胞免疫荧光染色 | 第20页 |
·细胞克隆形成测定(细胞存活实验) | 第20-21页 |
·MTT 实验 | 第21页 |
·细胞辐射及化学试剂处理 | 第21页 |
·流式细胞计量测定(细胞G2 期阻滞测定) | 第21-22页 |
·其它 | 第22-23页 |
4 结果 | 第23-38页 |
第一部分:含Fhit 突变体基因的表达载体的构建 | 第23-28页 |
1 含Fhit 突变体基因的原核表达载体pGEX-KG/Fhit 的构建 | 第23-25页 |
2 含Fhit 突变体基因的真核表达载体pREP10-HA/Fhit 的构建 | 第25-28页 |
第二部分: Fhit 突变体与RPA 相互作用的研究 | 第28-34页 |
1 Fhit 突变体与RPA 的相互作用研究 | 第28-30页 |
2 Fhit 突变体与RPA 在细胞中的定位研究 | 第30-34页 |
第三部分:Fhit 突变体在DNA 损伤应答中的作用 | 第34-38页 |
1 Fhit 突变体与RPA 相互作用对G2 检查点的影响 | 第34-35页 |
2 Fhit 突变体与RPA 相互作用对细胞辐射敏感性的影响 | 第35-38页 |
5 讨论 | 第38-41页 |
6 小结 | 第41-42页 |
7 附录 | 第42-44页 |
8 综述 | 第44-50页 |
参考文献 | 第48-50页 |
9 在职硕士期间发表的文章 | 第50-51页 |
10 个人简历 | 第51-52页 |
11 致谢 | 第52页 |