| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-22页 |
| 1.Aurora-A | 第9-12页 |
| 2.Cyclin B1 | 第12-16页 |
| 3.蛋白质泛素化降解 | 第16-21页 |
| 4.小结 | 第21-22页 |
| 技术路线 | 第22-23页 |
| 实验材料 | 第23-32页 |
| 1.菌种、质粒及细胞株 | 第23页 |
| 2.食管癌临床组织标本 | 第23页 |
| 3.主要试剂 | 第23-26页 |
| 4.引物 | 第26-27页 |
| 5.重要试剂的配制 | 第27-30页 |
| 6.生物信息学分析软件 | 第30页 |
| 7.仪器设备 | 第30-32页 |
| 实验方法 | 第32-44页 |
| 1.细胞培养和冻存 | 第32页 |
| 2.细菌培养 | 第32页 |
| 3.质粒DNA的制备及纯化 | 第32-34页 |
| 4.质粒DNA的浓度测定及纯度鉴定 | 第34页 |
| 5.在KYSE150细胞中转染pEGFP-C1 | 第34-35页 |
| 6.提取细胞总RNA | 第35页 |
| 7.RNA浓度测定 | 第35页 |
| 8.逆转录 | 第35-36页 |
| 9.PCR | 第36页 |
| 10.Western-blot | 第36-38页 |
| 11.流式细胞仪检测细胞周期 | 第38-39页 |
| 12.细胞周期同步化 | 第39页 |
| 13.蛋白稳定性实验 | 第39页 |
| 14.免疫组化 | 第39-40页 |
| 15.细胞免疫荧光 | 第40-41页 |
| 16.GsT融合蛋白沉降技术 | 第41-43页 |
| 17.免疫共沉淀 | 第43页 |
| 18.数据的获取及统计学分析 | 第43-44页 |
| 实验结果 | 第44-64页 |
| 1.细胞系培养、鉴定 | 第44-46页 |
| 2.Aurora-A可能调节的下游靶蛋白筛选 | 第46-49页 |
| 3.Aurora-A高表达对食管癌细胞周期分布的影响 | 第49-50页 |
| 4.Auorra-A高表达对Cyclin B1 mRNA水平的影响 | 第50-51页 |
| 5.Aurora-A高表达抑制Cyclin B1降解,提高其稳定性 | 第51-53页 |
| 6.Aurora-A高表达抑制Cyclin B1泛素化 | 第53-56页 |
| 7.Auorra-A与Cyciln B1存在体外相互作用 | 第56-58页 |
| 8.Aurora-A与Cyelin B1存在体内相互作用 | 第58-59页 |
| 9.Aurora-A高表达与Cylin B1的亚细胞定位 | 第59-61页 |
| 10.食管癌组织中Aurora-A与Ccylin B1的表达相关性 | 第61-64页 |
| 讨论分析 | 第64-75页 |
| 一、结果讨论 | 第64-71页 |
| 二、分析Aurora-A参与肿瘤发生发展的可能机制 | 第71-75页 |
| 全文小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-96页 |
| 文献综述 | 第96-103页 |
| 缩写表 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 附录 | 第107-108页 |
