| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·GLP-1的特性 | 第10-11页 |
| ·GLP-1R的结构 | 第11页 |
| ·GLP-1的生理功能 | 第11-16页 |
| ·GLP-1抑制胰岛β细胞凋亡的信号转导机制 | 第16-17页 |
| ·基于GLP-1信号的新型治疗策略 | 第17-20页 |
| 第2章 前言 | 第20-22页 |
| 第3章 实验材料 | 第22-25页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·主要培养基与溶液 | 第23-25页 |
| 第4章 实验方法 | 第25-33页 |
| ·目的基因~2Gly-hGLP-1-HSA的克隆 | 第25-26页 |
| ·pPIC9/~2Gly-hGLP-1-HSA表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·表达载体转化工程菌株及目的蛋白的诱导表达 | 第28-31页 |
| ·重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA的纯化 | 第31页 |
| ·重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA的纯度分析 | 第31页 |
| ·用Lowry法测定纯化后重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA的浓度 | 第31页 |
| ·重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA生物学活性鉴定 | 第31-33页 |
| 第5章 实验结果 | 第33-39页 |
| ·目的基因~2Gly-hGLP-1-HSA的克隆 | 第33-34页 |
| ·表达载体pPIC9/~2Gly-hGLP-1-HSA的构建 | 第34页 |
| ·表达载体转化工程菌株及阳性克隆的诱导表达筛选 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA的纯化 | 第36-37页 |
| ·用Lowry法测定纯化后~2Gly-hGLP-1-HSA的浓度 | 第37页 |
| ·重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA的生物活性测定 | 第37-39页 |
| 第6章 讨论 | 第39-44页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统及对表达产物的降解 | 第39页 |
| ·白蛋白作为体内延长半衰期的载体蛋白 | 第39-40页 |
| ·毕赤酵母偏爱密码子的选择 | 第40页 |
| ·GLP-1基因的优化改进 | 第40-41页 |
| ·~2Gly-hGLP-1基因的获得 | 第41页 |
| ·巴斯德毕赤酵母菌的转化方法 | 第41-42页 |
| ·巴斯德毕赤酵母工程菌发酵条件的优化 | 第42页 |
| ·重组蛋白~2Gly-hGLP-1-HSA的活性检测 | 第42-44页 |
| 第7章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 附录1 缩略词表 | 第50页 |
| 附录2 研究生期间主要成果 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
