| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一部分 杆状病毒相关研究进展 | 第12-32页 |
| 第一章 杆状病毒的分子生物学 | 第12-22页 |
| 1.杆状病毒的分子结构 | 第12-15页 |
| 2.杆状病毒对宿主的侵染 | 第15-20页 |
| ·侵染历程 | 第15-16页 |
| ·病毒粒子侵入宿主细胞 | 第16-20页 |
| ·ODV侵染细胞的机制 | 第16-17页 |
| ·BV侵染细胞的机制 | 第17页 |
| ·杆状病毒的复制与装配 | 第17-20页 |
| 3.杆状病毒DNA的复制 | 第20-22页 |
| ·杆状病毒DNA的复制起始点(ori) | 第20页 |
| ·杆状病毒DNA的复制方式 | 第20-21页 |
| ·杆状病毒对宿主幼虫的感染的症状 | 第21-22页 |
| 第二章 杆状病毒的表达系统 | 第22-32页 |
| 1.杆状病毒表达载体系统的特征 | 第22-23页 |
| ·杆状病毒表达载体系统的优势 | 第22-23页 |
| ·杆状病毒表达载体系统的不足 | 第23页 |
| 2.杆状病毒表达系统的策略 | 第23-25页 |
| 3.杆状病毒表面展示系统 | 第25-29页 |
| 4.杆状病毒表达系统的进一步发展 | 第29-32页 |
| 第二部分 研究部分 | 第32-72页 |
| 第一章 重组型穿梭载体的构建和表达 | 第32-66页 |
| 引言 | 第32-35页 |
| 1.实验材料 | 第35-39页 |
| ·质粒、菌株、酶、试剂 | 第35-36页 |
| ·血清、培养基、细胞和病毒 | 第36页 |
| ·PCR引物以及片段扩增 | 第36-37页 |
| ·穿梭载体及Bacmid-egfp图谱部分 | 第37-39页 |
| 2.实验方法与重组穿梭载体构建 | 第39-52页 |
| ·构建流程 | 第39-42页 |
| ·感受态细胞制备 | 第42-43页 |
| ·限制性酶切 | 第43-44页 |
| ·凝胶电泳检测以及片段回收 | 第44-45页 |
| ·连接 | 第45-47页 |
| ·转化 | 第47页 |
| ·质粒的提取分离 | 第47-49页 |
| ·重组型质粒检测 | 第49-52页 |
| 3.Bac to Bac技术 | 第52-54页 |
| ·转座 | 第52-53页 |
| ·重组Bacmid DNA的提取 | 第53页 |
| ·大质里粒检测 | 第53-54页 |
| ·菌种的保存 | 第54页 |
| 4.细胞技术 | 第54-55页 |
| ·细胞培养基的配制(以Grace为例) | 第54页 |
| ·细胞传代培养 | 第54-55页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第55页 |
| 5 细胞转染及转染结果分析 | 第55-66页 |
| ·脂质体转染 | 第55-56页 |
| ·转染结果和荧光分析 | 第56-66页 |
| ·pFBDM-ph-AcBacmid-egfp荧光表达结果 | 第56-57页 |
| ·pFBDM-ph-ph-AcBacmid-egfp荧光表达结果 | 第57-58页 |
| ·pFBDM-Mcherry-AcBacmid-egfp的荧光表达 | 第58-59页 |
| ·pFBDM-Mcherry-AcBacmid-egfp和pFBDM-ph-ph-AcB acmid-egfp的上清液混合染表达结果 | 第59-61页 |
| ·pFastBacl-IE2-red-IRES-egfp-AcBacmid荧光表达结果 | 第61-66页 |
| 第二章 Inv基因介导的PFBDM-ph-ph-Acbacmid-egfp的表达 | 第66-72页 |
| 引言 | 第66-67页 |
| 1 材料与方法 | 第67-70页 |
| ·制备DH10B-asd-PGB_2-inv电转感受态 | 第68页 |
| ·电转PFBDM-ph-ph-Acbacmid-egfp到DH10B-asd PGB2 Ω-inv | 第68-69页 |
| ·摇菌保种 | 第69页 |
| ·DH10B-asd inv-PFBDM-ph-ph-Acbacmid-egfp转染昆虫细胞sf21 | 第69-70页 |
| 2.结果与分析 | 第70-71页 |
| 3.结论与讨论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
