| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-14页 |
| ·引言 | 第8页 |
| ·国内外研究动态 | 第8-13页 |
| ·花发育的ABC模型及发展 | 第8-10页 |
| ·植物MADS-box基因的研究进展 | 第10-13页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第13-14页 |
| 2 草原龙胆C类MADS-box基因的克隆及分析 | 第14-24页 |
| ·试验材料 | 第14-15页 |
| ·植物材料 | 第14页 |
| ·主要仪器与药品 | 第14-15页 |
| ·试验方法 | 第15-19页 |
| ·草原龙胆总RNA的提取 | 第15-16页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第16页 |
| ·3′RACE反应 | 第16-17页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第17-18页 |
| ·目的片断与载体的连接 | 第18页 |
| ·连接产物的转化 | 第18页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第18-19页 |
| ·目的基因片段的测序与BLAST分析 | 第19页 |
| ·结果与分析 | 第19-23页 |
| ·总RNA的质量检测 | 第19页 |
| ·mRNA的纯化 | 第19-20页 |
| ·草原龙胆MADS-box基因3′cDNA的克隆 | 第20-21页 |
| ·目的基因片段的BLAST分析 | 第21-23页 |
| ·讨论 | 第23页 |
| ·本章小结 | 第23-24页 |
| 3 草原龙胆D类MADS-box基因的克隆及分析 | 第24-32页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·主要仪器与药品 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-27页 |
| ·草原龙胆总RNA的提取 | 第25页 |
| ·草原龙胆D类MADS-box基因的克隆 | 第25页 |
| ·反转录产物PCR | 第25-26页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第26页 |
| ·目的片断与载体的连接 | 第26页 |
| ·连接产物的转化 | 第26页 |
| ·菌种保存 | 第26页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第26-27页 |
| ·目的基因片段的测序与BLAST分析 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-30页 |
| ·总RNA的质量检测 | 第27页 |
| ·RT-PCR产物的扩增及纯化 | 第27-28页 |
| ·亚克隆结果 | 第28页 |
| ·菌液PCR阳性克隆的鉴定 | 第28页 |
| ·目的基因序列测定结果分析 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 4 草原龙胆C/D类MADS-box基因的Southern及Northern杂交 | 第32-43页 |
| ·试验材料 | 第32-33页 |
| ·植物材料及质粒 | 第32页 |
| ·试剂及仪器 | 第32-33页 |
| ·试验方法 | 第33-37页 |
| ·D基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·EgMADS1基因Northern和Southern探针的制备 | 第34页 |
| ·EgPLE基因Southern探针的制备 | 第34-35页 |
| ·草原龙胆各部分总RNA的提取 | 第35页 |
| ·草原龙胆花芽DNA的提取 | 第35页 |
| ·Northern杂交 | 第35-36页 |
| ·Southern杂交 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·Northern杂交结果 | 第37-39页 |
| ·Southern杂交结果 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 5 草原龙胆EgMADS1基因过量表达载体和RNAi载体的构建 | 第43-56页 |
| ·试验材料 | 第43-44页 |
| ·载体构建的试验材料 | 第43页 |
| ·试剂及仪器 | 第43-44页 |
| ·试验方法 | 第44-50页 |
| ·全长基因的扩增及纯化: | 第44-45页 |
| ·纯化产物与attB adapter的连接 | 第45-46页 |
| ·attB-PCR产物纯化 | 第46页 |
| ·BP反应 | 第46页 |
| ·BP反应目的基因克隆的筛选及鉴定 | 第46-47页 |
| ·LR反应 | 第47页 |
| ·LR反应目的基因克隆的筛选及鉴定 | 第47-48页 |
| ·农杆菌转化 | 第48-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·全长基因的PCR扩增产物及纯化 | 第50页 |
| ·attB adapter的连接及纯化 | 第50-52页 |
| ·通过BP反应获得入门克隆(Entry Clones) | 第52页 |
| ·通过LR反应获得Expression Clones | 第52-53页 |
| ·酶切鉴定图谱 | 第53-54页 |
| ·农杆菌转化 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
