| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-29页 |
| 1 淡水生态系统中微囊藻毒素的产生原因及其污染现状 | 第10页 |
| 2 微囊藻毒素的结构、毒性与危害 | 第10-12页 |
| 3 淡水生态系统中微囊藻毒素的代谢途径 | 第12-21页 |
| ·微囊藻毒素的非生物净化 | 第12-13页 |
| ·微囊藻毒素的生物净化 | 第13-21页 |
| ·微囊藻毒素在水栖微生物体内的降解 | 第13-14页 |
| ·食物链在微囊藻毒素代谢中的作用 | 第14-17页 |
| ·微囊藻毒素的生物聚集 | 第15页 |
| ·藻类和水生维管束植物对微囊藻毒素的聚集 | 第15-16页 |
| ·浮游动物和贝类对微囊藻毒素的聚集 | 第16页 |
| ·鱼类对微囊藻毒素的聚集 | 第16-17页 |
| ·微囊藻毒素在淡水生态系统食物链中的净化 | 第17-21页 |
| 4 水生生物微囊藻毒素去毒分子机理及调控机制 | 第21-25页 |
| 5 GPX的研究进展 | 第25-26页 |
| ·GPX及其基因分类 | 第25页 |
| ·GPX-1的功能及结构 | 第25-26页 |
| 6 本文的研究目的与意义 | 第26-28页 |
| 7 研究思路 | 第28-29页 |
| 第二章 鲢鱼、鳙鱼、草鱼谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆及组织表达研究 | 第29-64页 |
| 1 材料与方法 | 第29-45页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·实验鱼 | 第29页 |
| ·试剂盒,试剂,引物合成与序列测定 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-41页 |
| ·总RNA提取 | 第29页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPX cDNA核心序列的克隆 | 第29-35页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR扩增鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPX cDNA核心片段 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的T载体克隆 | 第31-35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳回收PCR产物 | 第31-32页 |
| ·重组T质粒的构建 | 第32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的转化 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆的筛选(蓝白斑筛选) | 第34页 |
| ·阳性克隆的鉴定(菌落PCR鉴定) | 第34-35页 |
| ·序列测定与分析 | 第35页 |
| ·3’-RACE法扩增鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPXcDNA 3’末端序列 | 第35-39页 |
| ·引物设计 | 第35-37页 |
| ·半巢式PCR反应 | 第37-39页 |
| ·3’-RACE PCR产物的T载体克隆 | 第39页 |
| ·5’-RACE法扩增鲢鱼GPX cDNA 5’末端序列 | 第39-41页 |
| ·引物设计 | 第39-40页 |
| ·半巢式PCR反应 | 第40-41页 |
| ·5’-RACE PCR产物的T载体克隆 | 第41页 |
| ·基因组步行法克隆鲢鱼GPX基因5’-侧翼区序列 | 第41-44页 |
| ·同源性分析及系统进化树重建 | 第44-45页 |
| ·鲢鱼GPX在肝脏、脂肪肠、肌肉、脑中的表达 | 第45页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼肝脏GPX mRNA水平的测定 | 第45页 |
| ·统计分析 | 第45页 |
| 2 实验结果 | 第45-57页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼肝脏总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPX cDNA核心片段的克隆 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR扩增鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPX cDNA核心片段 | 第46-47页 |
| ·PCR产物的T载体克隆和序列测定 | 第47页 |
| ·’-RACE法扩增鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPX cDNA 3’末端序列 | 第47-49页 |
| ·鲢鱼GPX基因全长cDNA序列的克隆 | 第49-50页 |
| ·5’-RACE法扩增鲢鱼GPX基因cDNA 5’末端序列 | 第49-50页 |
| ·基因组步行法克隆鲢鱼GPX基因5’-侧翼区序列 | 第50-51页 |
| ·克隆所得鳞鱼、缩鱼、草鱼GPI cNDA核苷酸序列及推导的氨基酸序列 | 第51-53页 |
| ·鲢鱼GPX基因全长cDNA序列及推导的氨基酸序列 | 第53-54页 |
| ·鲢鱼GPX基因基因5’-侧翼区序列 | 第54-55页 |
| ·GPX基因在鲢鱼肝脏、脂肪肠、肌肉、脑中的表达 | 第55-56页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼肝脏GPX基因的表达 | 第56-57页 |
| 4 实验结果分析 | 第57-64页 |
| ·不同物种GPX cDNA序列分析 | 第57-59页 |
| ·鲢鱼GPX基因5’-侧翼区序列结构分析 | 第59-60页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼与其他物种GPX cDNA的氨基酸序列同源性比较 | 第60页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼GPX与其它生物GPX的系统进化分析 | 第60-63页 |
| ·鲢鱼、鳙鱼、草鱼肝脏GPX cDNA表达差异比较 | 第63-64页 |
| 第三章 讨论 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 附录一 常用试剂与缓冲液的配置 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
