农杆菌介导不育基因转化悬铃木及长期继代培养植株的遗传稳定性分析的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一部分 根癌农杆菌介导不育基因转化悬铃木的研究 | 第11-38页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·问题的提出 | 第11-12页 |
| ·前人的研究进展 | 第12-17页 |
| ·植物遗传转化的研究进展 | 第12-13页 |
| ·木本植物遗传转化的研究进展 | 第13-15页 |
| ·雄性不育基因工程的研究概述 | 第15-17页 |
| ·悬铃木遗传转化的研究进展 | 第17页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·根癌农杆菌菌株及质粒 | 第18页 |
| ·培养基及主要试剂配方 | 第18-20页 |
| ·外植体的准备 | 第20页 |
| ·根癌农杆菌的准备 | 第20-22页 |
| ·根癌农杆菌培养 | 第20-21页 |
| ·农杆菌浸染液的制备 | 第21页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第21-22页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·质粒转化农杆菌(冻融法) | 第22页 |
| ·根癌农杆菌介导的悬铃木遗传转化体系的优化 | 第22-24页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化的方法 | 第22-23页 |
| ·不同菌株对转化的影响 | 第23页 |
| ·不同表面活性剂浓度对转化的影响 | 第23页 |
| ·不同细菌悬浮液对转化的影响 | 第23页 |
| ·共培养培养基中蔗糖浓度对转化的影响 | 第23-24页 |
| ·GUS基因表达的组织化学检测 | 第24页 |
| ·根癌农杆菌介导不育基因转化悬铃木 | 第24-27页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第24-25页 |
| ·优化的根癌农杆菌介导遗传转化的方法 | 第25页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第25-27页 |
| ·转基因植株总DNA提取(SDS法) | 第25-26页 |
| ·PCR检测 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-33页 |
| ·根癌农杆菌介导的悬铃木遗传转化体系的优化 | 第27-31页 |
| ·不同农杆菌菌株对转化的影响 | 第27-28页 |
| ·不同表面活性剂浓度对转化的影响 | 第28-29页 |
| ·不同细菌悬浮液对转化的影响 | 第29页 |
| ·共培养培养基中蔗糖浓度对转化的影响 | 第29-30页 |
| ·GUS基因表达的组织化学检测 | 第30-31页 |
| ·根癌农杆菌介导不育基因转化悬铃木 | 第31-33页 |
| ·不育基因转化悬铃木 | 第31页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第31-33页 |
| 4 讨论 | 第33-38页 |
| ·根癌农杆菌菌株浸染能力的比较 | 第33-34页 |
| ·转基因植株玻璃化问题 | 第34-35页 |
| ·假转化体问题 | 第35页 |
| ·瞬间表达和稳定表达之间的关系 | 第35-36页 |
| ·再生能力及其遗传稳定性 | 第36页 |
| ·关于转化频率低的问题 | 第36-37页 |
| ·下一步的工作 | 第37-38页 |
| 第二部分 悬铃木长期继代培养植株的遗传稳定性分析 | 第38-47页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 方法 | 第39-41页 |
| ·植物材料 | 第39-40页 |
| ·总DNA提取 | 第40页 |
| ·引物筛选和ISSR | 第40页 |
| ·数据统计分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 图版说明 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
