| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| 1.研究目的及意义 | 第11-12页 |
| 2.细菌鉴定检测方法 | 第12-18页 |
| ·传统的细菌分类、鉴定和检测方法 | 第12页 |
| ·数值分类法 | 第12页 |
| ·化学分类法 | 第12-14页 |
| ·血清学 | 第14页 |
| ·分子生物学和遗传学方法 | 第14-18页 |
| ·DNA的碱基组成即G+C mol% | 第14页 |
| ·DNA同源性测定 | 第14-15页 |
| ·DNA—RNA重配试验 | 第15页 |
| ·蛋白质分析法 | 第15页 |
| ·RFLP | 第15页 |
| ·rDNA-PCR | 第15-17页 |
| ·RAPD基因指纹图谱分析 | 第17页 |
| ·rep-PCR基因指纹图谱分析 | 第17页 |
| ·AFLP遗传分析 | 第17-18页 |
| ·SCAR标记和ITS研究进展 | 第18页 |
| 3.细菌的定量方法 | 第18-28页 |
| ·传统的细菌计数方法 | 第18-19页 |
| ·测数计计数法 | 第18页 |
| ·混浊度计数法 | 第18-19页 |
| ·平板菌落计数法 | 第19页 |
| ·其他方法 | 第19页 |
| ·PCR定量法 | 第19-28页 |
| ·传统PCR定量方法 | 第19页 |
| ·内参照法 | 第19页 |
| ·竞争法 | 第19页 |
| ·PCR—ELISA法 | 第19页 |
| ·内标在传统定量中的作用 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第19-28页 |
| ·原理 | 第21-22页 |
| ·荧光化学 | 第22-25页 |
| ·定量方法 | 第25页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的应用 | 第25-27页 |
| ·存在的问题及应用前景 | 第27-28页 |
| 第二章 研究内容 | 第28-53页 |
| 1.材料与方法 | 第28-39页 |
| ·参试菌株 | 第28-31页 |
| ·试剂及培养基 | 第31-32页 |
| ·通用引物扩增 | 第32-34页 |
| ·细菌基因组DNA的提取和纯化 | 第32-33页 |
| ·DNA样品的浓度测定 | 第33页 |
| ·通用引物扩增16s及16S-23SrDNA间的ITS | 第33-34页 |
| ·电泳 | 第34页 |
| ·PCR产物的回收、克隆和测序 | 第34-37页 |
| ·试剂盒回收DNA | 第34页 |
| ·多态性片段的克隆 | 第34-37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·DNA片段的连接 | 第35页 |
| ·DNA片段的转化 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的验证 | 第36页 |
| ·质粒的少量提取(碱裂解法) | 第36-37页 |
| ·DNA序列的测定 | 第37页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·特异性引物的常规PCR扩增及电泳 | 第37-38页 |
| ·实时荧光定量PCR的扩增 | 第38-39页 |
| ·实时荧光定量PCR的扩增体系及程序 | 第38页 |
| ·标准曲线的制备 | 第38-39页 |
| ·植物组织中病原菌的检测 | 第39页 |
| 2.结果与分析 | 第39-50页 |
| ·特异性引物的设计 | 第39页 |
| ·引物的特异性验证 | 第39-40页 |
| ·实时荧光PCR检测 | 第40-44页 |
| ·标准曲线的制备 | 第44-48页 |
| ·实时荧光PCR的灵敏度检测 | 第48-49页 |
| ·糖甜菜叶片中Tc7的实时荧光PCR检测 | 第49-50页 |
| 3.结论及讨论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |