中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一部分 引言 | 第9-31页 |
一、水通道蛋白的发现及命名 | 第9-10页 |
二、水通道蛋白的分子结构 | 第10-12页 |
(一) 水通道蛋白的初级结构 | 第10-11页 |
(二) 水通道蛋白的高级结构 | 第11-12页 |
三、植物水通道蛋白的多样性及分类 | 第12-15页 |
四、植物水通道蛋白的功能 | 第15-22页 |
(一) 植物水通道蛋白的选择性 | 第15页 |
(二) 植物水通道蛋白的选择性的分子基础 | 第15-17页 |
(三) 植物水通道蛋白的生理功能 | 第17-22页 |
五、植物水通道蛋白的活性调控 | 第22-27页 |
(一) 植物水通道蛋白的转录后水平的调控 | 第22-26页 |
(二) 植物水通道蛋白的膜运输调控 | 第26页 |
(三) 植物水通道蛋白的转录水平的调控 | 第26-27页 |
六、植物水通道蛋白的研究方法和手段 | 第27-30页 |
(一) 植物水通道蛋白的功能检测 | 第28-29页 |
(二) 植物水通道蛋白的定位和表达分析 | 第29-30页 |
七、甘草抗旱性研究现状 | 第30页 |
八、本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第31-47页 |
一、实验材料 | 第31-33页 |
(一) 实验植物和动物 | 第31页 |
(二) 分子生物学和生化试剂 | 第31-33页 |
(三) 主要实验仪器 | 第33页 |
二、实验方法 | 第33-47页 |
(一) 植物材料的处理 | 第33-34页 |
(二) 植物组织基因组DNA 的抽提 | 第34页 |
(三) 植物组织总 RNA 的抽提 | 第34-36页 |
(四) 甲醛变性凝胶电泳检查总 RNA 的完整性 | 第36页 |
(五) 总 RNA 的浓度测定 | 第36页 |
(六) 用QIAGEN Oligotex mRNA 纯化试剂盒从植物总RNA 中纯化mRNA | 第36-37页 |
(七) 用Invitrogen 的cDNA 合成试剂盒合成cDNA 第一链 | 第37页 |
(八) RACE cDNA 的合成 | 第37-38页 |
(九) RT-PCR 扩增反应 | 第38-39页 |
(十) 用QIAGEN凝胶回收纯化试剂盒回收纯化cDNA扩增产物 | 第39页 |
(十一) cDNA 与pCR?-XL-TOPOVector 连接 | 第39页 |
(十二) 转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α | 第39页 |
(十三) 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
(十四) 碱提法小量制备质粒 DNA | 第40页 |
(十五) 用 QIAGEN 质粒精提试剂盒制备质粒 | 第40-41页 |
(十六) 质粒 DNA 的酶解 | 第41页 |
(十七) DNA 序列测定 | 第41页 |
(十八) DNA 序列分析 | 第41-42页 |
(十九) 水通道蛋白多克隆抗体的制备 | 第42-43页 |
(二十) 甘草根质膜囊泡的制备及质膜蛋白的增溶 | 第43-44页 |
(二十一) Western blot | 第44-45页 |
(二十二) 蛋白免疫组织细胞化学定位 | 第45-46页 |
(二十三) Realtime PCR | 第46-47页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第47-62页 |
一、甘草质膜水通道蛋白 GuPIP1 基因的分子克隆 | 第47-55页 |
二、甘草质膜水通道蛋白 GuPIP1 的免疫化学组织定位 | 第55-57页 |
三、甘草质膜水通道蛋白 GuPIP1 的差异表达 | 第57-62页 |
第四部分 讨论 | 第62-66页 |
一、甘草 GuPIP1 属于植物水通道蛋白 PIP1 亚家族成员 | 第62页 |
二、甘草 GuPIP1 可能参与了甘草根系的水分跨膜运输 | 第62-63页 |
三、甘草 GuPIP1 可能参与了甘草植株水分平衡的调节 | 第63页 |
四、甘草 GuPIP1 活性调节的可能机制 | 第63-65页 |
五、甘草 GuPIP1 可能是一种多功能水通道蛋白 | 第65-66页 |
结论 | 第66-67页 |
主要创新点 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-82页 |
主要英文缩写词表 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
作者简介 | 第85页 |