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甘草质膜水通道蛋白GuPIP1的分子克隆、定位和表达调控

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-7页
目录第7-9页
第一部分 引言第9-31页
 一、水通道蛋白的发现及命名第9-10页
 二、水通道蛋白的分子结构第10-12页
  (一) 水通道蛋白的初级结构第10-11页
  (二) 水通道蛋白的高级结构第11-12页
 三、植物水通道蛋白的多样性及分类第12-15页
 四、植物水通道蛋白的功能第15-22页
  (一) 植物水通道蛋白的选择性第15页
  (二) 植物水通道蛋白的选择性的分子基础第15-17页
  (三) 植物水通道蛋白的生理功能第17-22页
 五、植物水通道蛋白的活性调控第22-27页
  (一) 植物水通道蛋白的转录后水平的调控第22-26页
  (二) 植物水通道蛋白的膜运输调控第26页
  (三) 植物水通道蛋白的转录水平的调控第26-27页
 六、植物水通道蛋白的研究方法和手段第27-30页
  (一) 植物水通道蛋白的功能检测第28-29页
  (二) 植物水通道蛋白的定位和表达分析第29-30页
 七、甘草抗旱性研究现状第30页
 八、本研究的目的与意义第30-31页
第二部分 实验材料与方法第31-47页
 一、实验材料第31-33页
  (一) 实验植物和动物第31页
  (二) 分子生物学和生化试剂第31-33页
  (三) 主要实验仪器第33页
 二、实验方法第33-47页
  (一) 植物材料的处理第33-34页
  (二) 植物组织基因组DNA 的抽提第34页
  (三) 植物组织总 RNA 的抽提第34-36页
  (四) 甲醛变性凝胶电泳检查总 RNA 的完整性第36页
  (五) 总 RNA 的浓度测定第36页
  (六) 用QIAGEN Oligotex mRNA 纯化试剂盒从植物总RNA 中纯化mRNA第36-37页
  (七) 用Invitrogen 的cDNA 合成试剂盒合成cDNA 第一链第37页
  (八) RACE cDNA 的合成第37-38页
  (九) RT-PCR 扩增反应第38-39页
  (十) 用QIAGEN凝胶回收纯化试剂盒回收纯化cDNA扩增产物第39页
  (十一) cDNA 与pCR?-XL-TOPOVector 连接第39页
  (十二) 转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α第39页
  (十三) 大肠杆菌感受态细胞的制备第39-40页
  (十四) 碱提法小量制备质粒 DNA第40页
  (十五) 用 QIAGEN 质粒精提试剂盒制备质粒第40-41页
  (十六) 质粒 DNA 的酶解第41页
  (十七) DNA 序列测定第41页
  (十八) DNA 序列分析第41-42页
  (十九) 水通道蛋白多克隆抗体的制备第42-43页
  (二十) 甘草根质膜囊泡的制备及质膜蛋白的增溶第43-44页
  (二十一) Western blot第44-45页
  (二十二) 蛋白免疫组织细胞化学定位第45-46页
  (二十三) Realtime PCR第46-47页
第三部分 实验结果与分析第47-62页
 一、甘草质膜水通道蛋白 GuPIP1 基因的分子克隆第47-55页
 二、甘草质膜水通道蛋白 GuPIP1 的免疫化学组织定位第55-57页
 三、甘草质膜水通道蛋白 GuPIP1 的差异表达第57-62页
第四部分 讨论第62-66页
 一、甘草 GuPIP1 属于植物水通道蛋白 PIP1 亚家族成员第62页
 二、甘草 GuPIP1 可能参与了甘草根系的水分跨膜运输第62-63页
 三、甘草 GuPIP1 可能参与了甘草植株水分平衡的调节第63页
 四、甘草 GuPIP1 活性调节的可能机制第63-65页
 五、甘草 GuPIP1 可能是一种多功能水通道蛋白第65-66页
结论第66-67页
主要创新点第67-68页
参考文献第68-82页
主要英文缩写词表第82-83页
致谢第83-85页
作者简介第85页

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