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猪附红细胞体病PCR诊断方法的建立

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
引言第8-15页
 1. 附红细胞体病的概况第8-10页
 2. 附红细胞体病的分布和危害第10-12页
 3. 猪附红细胞体病的诊断方法的研究进展第12-14页
 4. 本研究的目的和意义第14-15页
试验研究第15-32页
 1. 试验材料第15-19页
   ·试验猪血第15页
   ·对照病原体第15页
   ·菌种与质粒第15-16页
   ·试剂第16页
   ·试验用溶液及其配制第16-19页
 2. 试验方法第19-23页
   ·猪附红细胞体的培养第19页
   ·猪附红细胞体DNA的制备第19页
   ·引物的设计与合成第19页
   ·PCR反应第19-20页
   ·PCR产物的纯化回收第20页
   ·感受态细胞的制备第20-21页
   ·E.suis-DNA与pGEM-T Easy载体的重组连接第21页
   ·重组连接后质粒DNA的转化第21页
   ·克隆的筛选第21页
   ·质粒DNA的小量制备——碱裂解法第21-22页
   ·重组质粒的单酶切鉴定第22页
   ·阳性质粒的PCR鉴定第22页
   ·最适退火温度的筛选第22-23页
   ·特异性试验第23页
   ·敏感性试验第23页
   ·区域性试验第23页
 3. 序列测定及分析第23-24页
   ·序列测定第23页
   ·序列分析第23-24页
 4. 试验结果第24-32页
   ·PCR扩增第24页
   ·目的基因的克隆及重组质粒的鉴定第24-25页
   ·序列测定及同源性分析第25-27页
   ·系统发育进化分析第27-29页
   ·退火温度的筛选第29-30页
   ·特异性试验第30页
   ·敏感性试验结果第30-31页
   ·区域性试验结果第31-32页
讨论第32-35页
结论第35-36页
致谢第36-37页
参考文献第37-43页
作者简介第43页

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