摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
引言 | 第8-15页 |
1. 附红细胞体病的概况 | 第8-10页 |
2. 附红细胞体病的分布和危害 | 第10-12页 |
3. 猪附红细胞体病的诊断方法的研究进展 | 第12-14页 |
4. 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
试验研究 | 第15-32页 |
1. 试验材料 | 第15-19页 |
·试验猪血 | 第15页 |
·对照病原体 | 第15页 |
·菌种与质粒 | 第15-16页 |
·试剂 | 第16页 |
·试验用溶液及其配制 | 第16-19页 |
2. 试验方法 | 第19-23页 |
·猪附红细胞体的培养 | 第19页 |
·猪附红细胞体DNA的制备 | 第19页 |
·引物的设计与合成 | 第19页 |
·PCR反应 | 第19-20页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第20页 |
·感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
·E.suis-DNA与pGEM-T Easy载体的重组连接 | 第21页 |
·重组连接后质粒DNA的转化 | 第21页 |
·克隆的筛选 | 第21页 |
·质粒DNA的小量制备——碱裂解法 | 第21-22页 |
·重组质粒的单酶切鉴定 | 第22页 |
·阳性质粒的PCR鉴定 | 第22页 |
·最适退火温度的筛选 | 第22-23页 |
·特异性试验 | 第23页 |
·敏感性试验 | 第23页 |
·区域性试验 | 第23页 |
3. 序列测定及分析 | 第23-24页 |
·序列测定 | 第23页 |
·序列分析 | 第23-24页 |
4. 试验结果 | 第24-32页 |
·PCR扩增 | 第24页 |
·目的基因的克隆及重组质粒的鉴定 | 第24-25页 |
·序列测定及同源性分析 | 第25-27页 |
·系统发育进化分析 | 第27-29页 |
·退火温度的筛选 | 第29-30页 |
·特异性试验 | 第30页 |
·敏感性试验结果 | 第30-31页 |
·区域性试验结果 | 第31-32页 |
讨论 | 第32-35页 |
结论 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
作者简介 | 第43页 |