摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-37页 |
·重组 DNA 导入受体菌研究现状 | 第14-15页 |
·重组DNA 转化方法 | 第14-15页 |
·转化子的筛选与鉴定 | 第15页 |
·植物遗传转化研究进展 | 第15-31页 |
·遗传转化的受体系统 | 第16-17页 |
·遗传转化方法 | 第17-25页 |
·烟草遗传转化研究进展 | 第25-26页 |
·小麦遗传转化研究进展 | 第26-31页 |
·植物耐盐基因工程研究进展 | 第31-35页 |
·植物耐盐基因工程研究意义 | 第31-32页 |
·植物耐盐机理 | 第32-33页 |
·耐盐相关基因的研究及其应用 | 第33-34页 |
·HAL1 基因研究进展 | 第34-35页 |
·本项研究的目的和意义 | 第35-37页 |
第二章 重组质粒导入根癌农杆菌的冻融法转化体系的优化 | 第37-43页 |
·材料与方法 | 第37-38页 |
·材料 | 第37页 |
·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
·转化方法 | 第37-38页 |
·根癌农杆菌质粒 DNA 的提取 | 第38页 |
·转化子中目的基因的PCR 检测 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-42页 |
·培养基类型对感受态细胞制备及转化效率的影响 | 第38-39页 |
·根癌农杆菌菌株生长状态对感受态细胞转化率的影响 | 第39页 |
·转化溶液组成及浓度对转化效率的影响 | 第39页 |
·质粒 DNA 与感受态细胞共放置时间对转化效率的影响 | 第39-40页 |
·质粒 DNA 加入量对转化效率的影响 | 第40页 |
·液氮速冻时间及热激条件对转化效率的影响 | 第40-41页 |
·转化子中目的基因的PCR 检测 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第三章 根癌农杆菌介导的 HAL1 基因转化烟草的研究 | 第43-53页 |
·材料与方法 | 第43-46页 |
·材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·结果与分析 | 第46-50页 |
·烟草叶片愈伤组织诱导和分化芽过程中Kan 筛选浓度的确定 | 第46-47页 |
·生根过程中Kan 筛选浓度的确定 | 第47页 |
·抑菌过程中抗生素浓度的确定 | 第47页 |
·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化体系的优化 | 第47-49页 |
·转化植株的获得 | 第49-50页 |
·转化植株的PCR 检测 | 第50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
第四章 转 HAL1 基因烟草的耐盐性研究 | 第53-57页 |
·材料与方法 | 第53页 |
·材料 | 第53页 |
·方法 | 第53页 |
·结果与分析 | 第53-55页 |
·未转化烟草生根能力评价 | 第53-54页 |
·转基因烟草生根能力评价 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第五章 利用花粉管通道法将耐盐调空基因 HAL1 导入小麦的研究 | 第57-65页 |
·材料与方法 | 第57-60页 |
·材料 | 第57页 |
·方法 | 第57-60页 |
·结果与分析 | 第60-63页 |
·花粉管通道法转化小麦当代结实及种子萌发情况 | 第60-61页 |
·卡那霉素筛选浓度的确定 | 第61页 |
·筛选结果 | 第61-62页 |
·转化植株的分子检测 | 第62页 |
·转化植株的生长发育状况 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
第六章 利用基因枪法将耐盐调控基因 HAL1 导入小麦的研究 | 第65-78页 |
·材料与方法 | 第65-68页 |
·供试材料 | 第65-66页 |
·高渗处理和基因枪转化 | 第66-67页 |
·恢复培养、筛选及植株再生 | 第67-68页 |
·结果与分析 | 第68-75页 |
·普通小麦基因枪转化高效受体系统的建立 | 第68-71页 |
·基因枪法转化小麦幼胚愈伤组织的筛选程序和植株再生 | 第71-75页 |
·讨论 | 第75-78页 |
第七章 转 HAL1 基因小麦植株的获得 | 第78-85页 |
·材料与方法 | 第78-82页 |
·材料 | 第78页 |
·基因组DNA 的提取 | 第78页 |
·PCR 扩增 | 第78页 |
·小麦叶片总RNA 的提取、定量及纯化 | 第78-79页 |
·RT-PCT 检测 | 第79-80页 |
·探针标记 | 第80-81页 |
·Northern 印迹杂交 | 第81-82页 |
·结果与分析 | 第82-83页 |
·转基因T_0 代植株的PCR 检测 | 第82页 |
·转基因T_0 代植株的RT—PCR 检测 | 第82-83页 |
·转基因T_0 代植株的Northern 检测 | 第83页 |
·讨论 | 第83-85页 |
结论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-94页 |
附录 | 第94-99页 |
英文缩写词表 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
作者简介 | 第102页 |