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拟南芥与核盘菌互作及与核盘菌、水稻白叶枯病菌相关的拟南芥突变体筛选

致谢第1-5页
中文摘要第5-7页
英文摘要第7-16页
第一部分 文献综述第16-42页
 第一章 核盘菌的病原学特性及作物抗菌核病育种研究进展第16-18页
  1 农业生产上的重要性第16页
  2 核盘菌的病原学特性第16-17页
  3 抗病育种与病害防治现状第17-18页
   ·抗病育种第17页
   ·病害防治现状第17-18页
 第二章 植物病原真菌致病机理第18-20页
  1 病原真菌致病毒素第18页
  2 致病相关的酶系第18页
  3 核盘菌致病机理的研究现状第18-20页
 第三章 植物病原菌与拟南芥的互作第20-32页
  1 拟南芥作为模式植物的优点第20页
  2 植物病原菌与拟南芥互作的研究现状第20-23页
   ·植物病原细菌与拟南芥互作的研究现状第20-21页
   ·植物病毒与拟南芥互作的研究现状第21页
   ·植物病原真菌与拟南芥互作的研究现状第21-23页
     ·活体寄生菌(Biotroph)第21-22页
     ·死体寄生菌(Necrotroph)第22-23页
  3 寄主抗性与非寄主抗性第23-24页
   ·非寄主抗性第23页
   ·寄主抗性第23-24页
  4 病原菌植物信号传导网络第24-32页
   ·基因对基因的学说第24-26页
   ·激发子和无毒基因第26页
   ·抗性基因和植物防卫物质第26-28页
   ·植物防卫反应的途径第28-29页
   ·防卫反应信号网络第29-32页
 第四章 木霉菌胞壁降解酶基因及抗病基因工程第32-37页
  1 木霉产生的胞壁降解酶种类和特征第32-33页
  2 木霉菌胞壁降解酶基因第33-35页
   ·种类第33-35页
   ·特征第35页
  3 木霉菌胞壁降解酶基因在植病生防上的应用第35-37页
   ·利用木霉胞壁降解酶基因提高植物的抗病性第35-36页
   ·不同木霉几丁质酶基因对植物生长的影响第36-37页
 第五章 拟南芥突变库的构建及与核盘菌、黄单胞菌相关的功能基因研究第37-41页
  1. 拟南芥突变体库的构建方法第37-39页
   ·物理诱变突变体库的构建及其利用第37页
   ·化学诱变突变体库的构建及其利用第37-38页
   ·T-DNA插入突变体库的构建及其利用第38-39页
  2. 核盘菌相关的拟南芥功能基因研究第39页
  3. 黄单胞菌相关的拟南芥功能基因研究第39-41页
 第六章 研究目的和内容第41-42页
  1. 研究目的第41页
  2. 研究内容第41-42页
第二部分 研究报告第42-78页
 第七章 核盘菌侵染拟南芥体系的建立第42-47页
  1 材料与方法第42-43页
   ·材料第42-43页
     ·病原菌菌株第42页
     ·植物材料第42页
     ·使用肥料第42页
     ·培养基第42-43页
   ·方法第43页
     ·麦粒培养基的制备第43页
     ·小米培养基的制备第43页
     ·稻壳培养基的制备第43页
     ·病原菌的培养和接种体的制备第43页
     ·拟南芥的生长第43页
     ·病原菌的接种和拟南芥感病性的测定第43页
  2 结果与分析第43-46页
   ·接种体制备方法的比较第43-44页
   ·核盘菌在拟南芥上的侵染观察第44-46页
  3 讨论第46-47页
 第八章 核盘菌侵染拟南芥细胞学观察和致病机理分析第47-53页
  1 材料与方法第47-48页
   ·材料第47页
     ·植物材料第47页
     ·病原菌菌株第47页
     ·试剂第47页
     ·培养基第47页
     ·酶活性测定的底物第47页
   ·方法第47-48页
     ·拟南芥叶片接种第47-48页
     ·拟南芥叶片上病菌菌丝的Trypan blue染色第48页
     ·病菌液体培养第48页
     ·病菌分泌的水解酶活性测定第48页
     ·pH对核盘菌分泌水解酶的影响第48页
     ·草酸及其它无机酸对拟南芥叶片的死亡斑诱导第48页
  2 结果与分析第48-51页
   ·核盘菌在拟南芥叶片上侵染过程观察第49页
   ·核盘菌人工培养过程中分泌水解酶的测定第49-50页
   ·培养基的pH值对核盘菌产生水解酶能力的影响第50页
   ·草酸及无机酸对拟南芥叶片的诱导死亡第50-51页
  3 讨论第51-53页
 第九章 核盘菌侵染后拟南芥的防卫反应第53-58页
  1 材料与方法第53-55页
   ·材料第53页
     ·植物材料第53页
     ·病原菌菌株第53页
     ·常用试剂第53页
     ·培养基第53页
   ·方法第53-55页
     ·核盘菌接种第53页
     ·酶的提取第53-54页
     ·酶活性的测定第54页
     ·RNA的提取第54页
     ·RNA杂交第54-55页
  2 结果与分析第55-57页
   ·病菌侵染后叶片中酶活性的变化第55-56页
   ·病菌侵染后防卫基因的激活第56-57页
  3 讨论第57-58页
 第十章 木霉菌对油菜菌核病菌的寄生作用及转木霉胞璧降解酶基因ThEn4对拟南芥的遗传转化第58-68页
  1 材料与方法第58-63页
   ·材料第58-59页
     ·受体拟南芥第58页
     ·转化菌株、病菌菌株和生防菌株第58页
     ·目的基因和植物表达载体第58-59页
     ·目的基因ThEn42检测的特异性引物第59页
     ·培养基与缓冲液第59页
   ·方法第59-63页
     ·木霉菌对核盘菌拮抗作用的观察第59页
     ·拟南芥基因组 DNA的提取第59-60页
     ·质粒 DNA的农杆菌转化第60页
     ·根癌农杆菌介导的拟南芥遗传转化第60页
     ·转化植株种子的抗生素筛选第60页
     ·转化植株的PCR鉴定第60-61页
     ·转基因植物的southern杂交第61-62页
     ·转基因植物的northern杂交第62-63页
     ·转基因植株的抗病性测定第63页
  2 结果与分析第63-66页
   ·哈茨木霉对油菜菌核病菌寄生作用第63页
   ·农杆菌转化第63-64页
   ·农杆菌介导转化拟南芥后 T1代种子的潮霉素检测第64页
   ·转基因植株分子检测和表型观察第64-65页
   ·转基因拟南芥对油菜菌核病菌的抗性第65-66页
  3 讨论第66-68页
 第十一章 与核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)相关拟南芥突变体的筛选第68-77页
  1. 材料与方法第68-72页
   ·植物材料第68页
   ·菌株和质粒第68-69页
   ·实验试剂与营养液第69页
   ·拟南芥的种植第69-70页
   ·农杆菌的制备第70页
   ·拟南芥的转化第70页
   ·拟南芥 T1代转化植株的筛选第70页
   ·EMS处理拟南芥种子后 M2代种子的制备第70页
   ·抗核盘菌和感水稻白叶枯菌拟南芥突变体筛选第70-71页
   ·水稻白叶枯病菌敏感拟南芥突变体验证第71-72页
  2. 结果与分析第72-76页
   ·激活标签以及 EMS处理拟南芥种子的抗核盘菌突变体筛选第72页
   ·EMS处理拟南芥的种子对水稻白叶枯菌敏感的突变体筛选第72-74页
   ·可能水稻白叶枯病菌敏感拟南芥突变体验证第74-76页
  3. 讨论第76-77页
 第十二章 全文小结第77-78页
参考文献第78-94页
附录1 主要试剂和仪器第94-95页
附录2 常用培养基、缓冲液配方第95-99页
附录3 本文所用缩略词-中英文对照第99-101页
附录4 发表、录用论文及主持项目第101页

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