致谢 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-42页 |
第一章 核盘菌的病原学特性及作物抗菌核病育种研究进展 | 第16-18页 |
1 农业生产上的重要性 | 第16页 |
2 核盘菌的病原学特性 | 第16-17页 |
3 抗病育种与病害防治现状 | 第17-18页 |
·抗病育种 | 第17页 |
·病害防治现状 | 第17-18页 |
第二章 植物病原真菌致病机理 | 第18-20页 |
1 病原真菌致病毒素 | 第18页 |
2 致病相关的酶系 | 第18页 |
3 核盘菌致病机理的研究现状 | 第18-20页 |
第三章 植物病原菌与拟南芥的互作 | 第20-32页 |
1 拟南芥作为模式植物的优点 | 第20页 |
2 植物病原菌与拟南芥互作的研究现状 | 第20-23页 |
·植物病原细菌与拟南芥互作的研究现状 | 第20-21页 |
·植物病毒与拟南芥互作的研究现状 | 第21页 |
·植物病原真菌与拟南芥互作的研究现状 | 第21-23页 |
·活体寄生菌(Biotroph) | 第21-22页 |
·死体寄生菌(Necrotroph) | 第22-23页 |
3 寄主抗性与非寄主抗性 | 第23-24页 |
·非寄主抗性 | 第23页 |
·寄主抗性 | 第23-24页 |
4 病原菌植物信号传导网络 | 第24-32页 |
·基因对基因的学说 | 第24-26页 |
·激发子和无毒基因 | 第26页 |
·抗性基因和植物防卫物质 | 第26-28页 |
·植物防卫反应的途径 | 第28-29页 |
·防卫反应信号网络 | 第29-32页 |
第四章 木霉菌胞壁降解酶基因及抗病基因工程 | 第32-37页 |
1 木霉产生的胞壁降解酶种类和特征 | 第32-33页 |
2 木霉菌胞壁降解酶基因 | 第33-35页 |
·种类 | 第33-35页 |
·特征 | 第35页 |
3 木霉菌胞壁降解酶基因在植病生防上的应用 | 第35-37页 |
·利用木霉胞壁降解酶基因提高植物的抗病性 | 第35-36页 |
·不同木霉几丁质酶基因对植物生长的影响 | 第36-37页 |
第五章 拟南芥突变库的构建及与核盘菌、黄单胞菌相关的功能基因研究 | 第37-41页 |
1. 拟南芥突变体库的构建方法 | 第37-39页 |
·物理诱变突变体库的构建及其利用 | 第37页 |
·化学诱变突变体库的构建及其利用 | 第37-38页 |
·T-DNA插入突变体库的构建及其利用 | 第38-39页 |
2. 核盘菌相关的拟南芥功能基因研究 | 第39页 |
3. 黄单胞菌相关的拟南芥功能基因研究 | 第39-41页 |
第六章 研究目的和内容 | 第41-42页 |
1. 研究目的 | 第41页 |
2. 研究内容 | 第41-42页 |
第二部分 研究报告 | 第42-78页 |
第七章 核盘菌侵染拟南芥体系的建立 | 第42-47页 |
1 材料与方法 | 第42-43页 |
·材料 | 第42-43页 |
·病原菌菌株 | 第42页 |
·植物材料 | 第42页 |
·使用肥料 | 第42页 |
·培养基 | 第42-43页 |
·方法 | 第43页 |
·麦粒培养基的制备 | 第43页 |
·小米培养基的制备 | 第43页 |
·稻壳培养基的制备 | 第43页 |
·病原菌的培养和接种体的制备 | 第43页 |
·拟南芥的生长 | 第43页 |
·病原菌的接种和拟南芥感病性的测定 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-46页 |
·接种体制备方法的比较 | 第43-44页 |
·核盘菌在拟南芥上的侵染观察 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-47页 |
第八章 核盘菌侵染拟南芥细胞学观察和致病机理分析 | 第47-53页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
·材料 | 第47页 |
·植物材料 | 第47页 |
·病原菌菌株 | 第47页 |
·试剂 | 第47页 |
·培养基 | 第47页 |
·酶活性测定的底物 | 第47页 |
·方法 | 第47-48页 |
·拟南芥叶片接种 | 第47-48页 |
·拟南芥叶片上病菌菌丝的Trypan blue染色 | 第48页 |
·病菌液体培养 | 第48页 |
·病菌分泌的水解酶活性测定 | 第48页 |
·pH对核盘菌分泌水解酶的影响 | 第48页 |
·草酸及其它无机酸对拟南芥叶片的死亡斑诱导 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-51页 |
·核盘菌在拟南芥叶片上侵染过程观察 | 第49页 |
·核盘菌人工培养过程中分泌水解酶的测定 | 第49-50页 |
·培养基的pH值对核盘菌产生水解酶能力的影响 | 第50页 |
·草酸及无机酸对拟南芥叶片的诱导死亡 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第九章 核盘菌侵染后拟南芥的防卫反应 | 第53-58页 |
1 材料与方法 | 第53-55页 |
·材料 | 第53页 |
·植物材料 | 第53页 |
·病原菌菌株 | 第53页 |
·常用试剂 | 第53页 |
·培养基 | 第53页 |
·方法 | 第53-55页 |
·核盘菌接种 | 第53页 |
·酶的提取 | 第53-54页 |
·酶活性的测定 | 第54页 |
·RNA的提取 | 第54页 |
·RNA杂交 | 第54-55页 |
2 结果与分析 | 第55-57页 |
·病菌侵染后叶片中酶活性的变化 | 第55-56页 |
·病菌侵染后防卫基因的激活 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
第十章 木霉菌对油菜菌核病菌的寄生作用及转木霉胞璧降解酶基因ThEn4对拟南芥的遗传转化 | 第58-68页 |
1 材料与方法 | 第58-63页 |
·材料 | 第58-59页 |
·受体拟南芥 | 第58页 |
·转化菌株、病菌菌株和生防菌株 | 第58页 |
·目的基因和植物表达载体 | 第58-59页 |
·目的基因ThEn42检测的特异性引物 | 第59页 |
·培养基与缓冲液 | 第59页 |
·方法 | 第59-63页 |
·木霉菌对核盘菌拮抗作用的观察 | 第59页 |
·拟南芥基因组 DNA的提取 | 第59-60页 |
·质粒 DNA的农杆菌转化 | 第60页 |
·根癌农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第60页 |
·转化植株种子的抗生素筛选 | 第60页 |
·转化植株的PCR鉴定 | 第60-61页 |
·转基因植物的southern杂交 | 第61-62页 |
·转基因植物的northern杂交 | 第62-63页 |
·转基因植株的抗病性测定 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-66页 |
·哈茨木霉对油菜菌核病菌寄生作用 | 第63页 |
·农杆菌转化 | 第63-64页 |
·农杆菌介导转化拟南芥后 T1代种子的潮霉素检测 | 第64页 |
·转基因植株分子检测和表型观察 | 第64-65页 |
·转基因拟南芥对油菜菌核病菌的抗性 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
第十一章 与核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)相关拟南芥突变体的筛选 | 第68-77页 |
1. 材料与方法 | 第68-72页 |
·植物材料 | 第68页 |
·菌株和质粒 | 第68-69页 |
·实验试剂与营养液 | 第69页 |
·拟南芥的种植 | 第69-70页 |
·农杆菌的制备 | 第70页 |
·拟南芥的转化 | 第70页 |
·拟南芥 T1代转化植株的筛选 | 第70页 |
·EMS处理拟南芥种子后 M2代种子的制备 | 第70页 |
·抗核盘菌和感水稻白叶枯菌拟南芥突变体筛选 | 第70-71页 |
·水稻白叶枯病菌敏感拟南芥突变体验证 | 第71-72页 |
2. 结果与分析 | 第72-76页 |
·激活标签以及 EMS处理拟南芥种子的抗核盘菌突变体筛选 | 第72页 |
·EMS处理拟南芥的种子对水稻白叶枯菌敏感的突变体筛选 | 第72-74页 |
·可能水稻白叶枯病菌敏感拟南芥突变体验证 | 第74-76页 |
3. 讨论 | 第76-77页 |
第十二章 全文小结 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-94页 |
附录1 主要试剂和仪器 | 第94-95页 |
附录2 常用培养基、缓冲液配方 | 第95-99页 |
附录3 本文所用缩略词-中英文对照 | 第99-101页 |
附录4 发表、录用论文及主持项目 | 第101页 |