| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 材料与方法 | 第17-30页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第17页 |
| ·细胞系、菌株和质粒 | 第17页 |
| ·主要实验试剂 | 第17页 |
| 2 主要实验仪器 | 第17-18页 |
| 3 实验方法 | 第18-29页 |
| ·hTERT 干扰真核表达载体的构建、鉴定 | 第18-22页 |
| ·PUMA 真核表达质粒载体的构建、鉴定 | 第22-25页 |
| ·人乳腺癌MCF-7 细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第25-26页 |
| ·MCF-7 细胞转染 | 第26页 |
| ·Western blot 免疫印迹法检测蛋白表达变化 | 第26-29页 |
| 4 统计学处理 | 第29-30页 |
| 结果 | 第30-43页 |
| 1 pYr-2.1-hTERT-shRNA 经SacⅠ单酶切鉴定结果 | 第30页 |
| 2 pYr-ads-1-PUMA 经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定结果 | 第30-31页 |
| 3 pYr-2.1-hTERT-shRNA 和pYr-ads-1-PUMA 的测序鉴定 | 第31-32页 |
| 4 转染48h 后荧光显微镜下观察细胞转染效率（见图6） | 第32-34页 |
| 5 Western blot 法检测hTERT、PUMA、Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达 | 第34-43页 |
| 讨论 | 第43-51页 |
| 1 抑制hTERT 基因与细胞凋亡 | 第43-45页 |
| 2 PUMA 基因与肿瘤 | 第45-48页 |
| 3 抑制hTERT 与导入外源性PUMA 联合作用对MCF-7 细胞线粒体凋亡通路的影响. | 第48-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 英汉缩略名词对照表 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| PUMA 研究若干进展 | 第60-74页 |
| 1 PUMA 的发现和生化特性 | 第60-61页 |
| 2 PUMA 的转录调控 | 第61-63页 |
| ·p53 | 第62页 |
| ·p73 | 第62页 |
| ·Fox03a | 第62页 |
| ·c-Myc 和E2F1 | 第62-63页 |
| ·一般转录因子 | 第63页 |
| ·负调控转录因子 | 第63页 |
| 3 PUMA 与凋亡 | 第63-67页 |
| ·PUMA 在p53 依赖凋亡途径中的作用 | 第64-65页 |
| ·PUMA 在p53 非依赖凋亡途径中的作用 | 第65-66页 |
| ·PUMA 诱导凋亡的机制 | 第66-67页 |
| 4 PUMA 与肿瘤 | 第67-69页 |
| ·PUMA 与肿瘤发生 | 第67-68页 |
| ·PUMA 与肿瘤治疗 | 第68-69页 |
| 5 PUMA 与类风湿性关节炎 | 第69页 |
| 6 PUMA 与心力衰竭 | 第69-70页 |
| 7 PUMA 与自体吞噬 | 第70页 |
| 8 问题与展望 | 第70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
