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肠出血性大肠杆菌O157:H7主要保护性抗原单克隆抗体的研制及特性分析

前言第1-11页
第一篇 文献综述第11-24页
 第一章 EHEC O157 主要致病因子第11-18页
  1 LEE 致病岛第12-15页
  2 志贺毒素第15-16页
  3 p0157 质粒第16-18页
 第二章 EHEC O157 主要保护性抗原与免疫预防第18-24页
  1 多糖-蛋白结合菌苗第19页
  2 Stx 类毒素/亚单位菌苗第19-20页
  3 重组活菌苗载体第20页
  4 减毒活菌苗第20-21页
  5 转基因植物疫苗第21-22页
  6 粘膜免疫第22页
  7 抗O157 单克隆抗体第22-24页
第二篇 实验研究第24-51页
 第一章 EHEC O157 主要保护性抗原重组融合蛋白的制备和纯化第24-31页
  1 材料与方法第24-28页
  2 结果第28页
   ·纯化融合蛋白浓度测定第28页
   ·纯化融合蛋白的SDS-PAGE 电泳分析第28页
  3 讨论第28-30页
  4 小结第30-31页
 第二章 EHEC O157 主要保护性抗原单克隆抗体的制备和鉴定第31-44页
  1 材料与方法第31-38页
  2 结果第38-41页
   ·动物免疫和抗体间接ELISA 检测方法的建立第38页
   ·阳性杂交瘤细胞系的建立第38页
   ·腹水的制备和纯化第38-39页
   ·阳性杂交瘤细胞培养上清及腹水效价第39页
   ·单克隆抗体亚类鉴定第39-40页
   ·杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体的稳定性第40页
   ·Western-blot 鉴定单抗识别抗原特异性第40-41页
  3 讨论第41-43页
   ·抗原的选择和动物免疫第41页
   ·选择高质量的胎牛血清第41页
   ·骨髓瘤细胞的筛选第41-42页
   ·细胞融合和克隆第42-43页
  4 小结第43-44页
 第三章 单克隆抗体检测EHEC O157 的研究第44-51页
  1 材料与方法第44-46页
  2 结果第46-49页
   ·EHEC O157中stx基因的PCR鉴定第46页
   ·单抗对EHEC O157 的初步检测第46-47页
   ·单抗对EHEC O157 的检出限第47页
   ·EHEC O157 细菌培养上清中志贺毒素的检测第47-48页
   ·EHEC O157 细胞周质中志贺毒素的提取和检测第48页
   ·EHEC O157 外膜蛋白的提取和检测第48-49页
  3 讨论第49-50页
  4 小结第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-61页
中文摘要第61-64页
英文摘要第64-66页

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