前言 | 第1-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-24页 |
第一章 EHEC O157 主要致病因子 | 第11-18页 |
1 LEE 致病岛 | 第12-15页 |
2 志贺毒素 | 第15-16页 |
3 p0157 质粒 | 第16-18页 |
第二章 EHEC O157 主要保护性抗原与免疫预防 | 第18-24页 |
1 多糖-蛋白结合菌苗 | 第19页 |
2 Stx 类毒素/亚单位菌苗 | 第19-20页 |
3 重组活菌苗载体 | 第20页 |
4 减毒活菌苗 | 第20-21页 |
5 转基因植物疫苗 | 第21-22页 |
6 粘膜免疫 | 第22页 |
7 抗O157 单克隆抗体 | 第22-24页 |
第二篇 实验研究 | 第24-51页 |
第一章 EHEC O157 主要保护性抗原重组融合蛋白的制备和纯化 | 第24-31页 |
1 材料与方法 | 第24-28页 |
2 结果 | 第28页 |
·纯化融合蛋白浓度测定 | 第28页 |
·纯化融合蛋白的SDS-PAGE 电泳分析 | 第28页 |
3 讨论 | 第28-30页 |
4 小结 | 第30-31页 |
第二章 EHEC O157 主要保护性抗原单克隆抗体的制备和鉴定 | 第31-44页 |
1 材料与方法 | 第31-38页 |
2 结果 | 第38-41页 |
·动物免疫和抗体间接ELISA 检测方法的建立 | 第38页 |
·阳性杂交瘤细胞系的建立 | 第38页 |
·腹水的制备和纯化 | 第38-39页 |
·阳性杂交瘤细胞培养上清及腹水效价 | 第39页 |
·单克隆抗体亚类鉴定 | 第39-40页 |
·杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体的稳定性 | 第40页 |
·Western-blot 鉴定单抗识别抗原特异性 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
·抗原的选择和动物免疫 | 第41页 |
·选择高质量的胎牛血清 | 第41页 |
·骨髓瘤细胞的筛选 | 第41-42页 |
·细胞融合和克隆 | 第42-43页 |
4 小结 | 第43-44页 |
第三章 单克隆抗体检测EHEC O157 的研究 | 第44-51页 |
1 材料与方法 | 第44-46页 |
2 结果 | 第46-49页 |
·EHEC O157中stx基因的PCR鉴定 | 第46页 |
·单抗对EHEC O157 的初步检测 | 第46-47页 |
·单抗对EHEC O157 的检出限 | 第47页 |
·EHEC O157 细菌培养上清中志贺毒素的检测 | 第47-48页 |
·EHEC O157 细胞周质中志贺毒素的提取和检测 | 第48页 |
·EHEC O157 外膜蛋白的提取和检测 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
4 小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
中文摘要 | 第61-64页 |
英文摘要 | 第64-66页 |