摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1 链格孢菌毒素的种类 | 第13-14页 |
2 链格孢菌毒素除草活性的研究 | 第14-15页 |
3 植物病原真菌致病基因的研究进展 | 第15-25页 |
·植物病原真菌致病基因的类型 | 第15-19页 |
·植物病原真菌致病基因克隆策略 | 第19-21页 |
·限制性内切酶介导整合(REMI)在真菌致病基因克隆中的应用 | 第21-25页 |
第二章 链格孢菌菌株间生物学特性比较及强产毒菌株的筛选 | 第25-34页 |
1 材料与方法 | 第25-27页 |
·材料 | 第25页 |
·方法 | 第25-27页 |
2 结果分析 | 第27-33页 |
·菌落生长速率的比较 | 第27-28页 |
·液体培养菌丝体生长量的比较 | 第28页 |
·菌株产孢量的比较 | 第28-30页 |
·孢子萌发率比较 | 第30页 |
·粗毒素致病力比较结果 | 第30页 |
·菌苔致病力比较结果 | 第30-32页 |
·生物学特性相关性分析 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
第三章 链格孢菌强产毒菌株的紫外诱变筛选 | 第34-38页 |
1 材料和方法 | 第34页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34页 |
2 结果分析 | 第34-36页 |
·紫外诱变时间对孢子萌发率的影响 | 第34-35页 |
·紫外诱变时间的选择 | 第35-36页 |
·致病力突变株的初筛 | 第36页 |
·致病力突变株的复筛 | 第36页 |
·致病力突变菌株的产毒力验证 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 链格孢菌原生质体的制备和再生 | 第38-46页 |
1 材料与方法 | 第38-39页 |
·供试菌株 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·试剂 | 第38页 |
·原生质体制备 | 第38-39页 |
·原生质体的检测和再生 | 第39页 |
·再生菌株主要生物学特性比较 | 第39页 |
2 结果 | 第39-44页 |
·菌龄对原生质体制备的影响 | 第39-40页 |
·酶系统对原生质体制备的影响 | 第40-41页 |
·酶解时间对原生质体制备的影响 | 第41-42页 |
·酶解温度对原生质体制备的影响 | 第42页 |
·稳渗剂对原生质体制备的影响 | 第42页 |
·原生质体的检测与再生 | 第42-43页 |
·再生菌株的生物学特性比较 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
第五章 链格孢菌限制性内切酶介导整合(REMI)转化及筛选 | 第46-54页 |
1 材料和方法 | 第46-49页 |
·材料与试剂 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-49页 |
2 结果 | 第49-52页 |
·质粒的提取、酶切及 PCR检测 | 第49页 |
·转化子的筛选 | 第49-50页 |
·限制性内切酶用量对转化的影响 | 第50页 |
·质粒对转化的影响 | 第50-51页 |
·弱致病菌株的筛选 | 第51-52页 |
·弱致病菌株产毒量测定 | 第52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
第六章 产毒减弱突变株的生物学特性分析和REMI插入突变的 PCR验证 | 第54-62页 |
1 材料和方法 | 第54-55页 |
·材料、试剂和溶液 | 第54页 |
·方法 | 第54-55页 |
2 结果 | 第55-61页 |
·突变株的生物学特性比较分析 | 第55-60页 |
·产毒减弱突变株 REMI插入突变的PCR验证 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
全文讨论 | 第62-65页 |
1 链格孢菌强产毒菌株的筛选 | 第62页 |
2 链格孢菌原生质体的制备 | 第62-63页 |
3 REMI转化和产毒突变株的筛选和鉴定 | 第63-64页 |
4 产毒相关基因克隆的展望 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第74页 |