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链格孢菌强产毒菌株的筛选和限制性内切酶介导整合(REMI)转化的产毒诱变

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
前言第11-13页
第一章 文献综述第13-25页
 1 链格孢菌毒素的种类第13-14页
 2 链格孢菌毒素除草活性的研究第14-15页
 3 植物病原真菌致病基因的研究进展第15-25页
   ·植物病原真菌致病基因的类型第15-19页
   ·植物病原真菌致病基因克隆策略第19-21页
   ·限制性内切酶介导整合(REMI)在真菌致病基因克隆中的应用第21-25页
第二章 链格孢菌菌株间生物学特性比较及强产毒菌株的筛选第25-34页
 1 材料与方法第25-27页
   ·材料第25页
   ·方法第25-27页
 2 结果分析第27-33页
   ·菌落生长速率的比较第27-28页
   ·液体培养菌丝体生长量的比较第28页
   ·菌株产孢量的比较第28-30页
   ·孢子萌发率比较第30页
   ·粗毒素致病力比较结果第30页
   ·菌苔致病力比较结果第30-32页
   ·生物学特性相关性分析第32-33页
 3 讨论第33-34页
第三章 链格孢菌强产毒菌株的紫外诱变筛选第34-38页
 1 材料和方法第34页
   ·材料第34页
   ·方法第34页
 2 结果分析第34-36页
   ·紫外诱变时间对孢子萌发率的影响第34-35页
   ·紫外诱变时间的选择第35-36页
   ·致病力突变株的初筛第36页
   ·致病力突变株的复筛第36页
   ·致病力突变菌株的产毒力验证第36页
 3 讨论第36-38页
第四章 链格孢菌原生质体的制备和再生第38-46页
 1 材料与方法第38-39页
   ·供试菌株第38页
   ·培养基第38页
   ·试剂第38页
   ·原生质体制备第38-39页
   ·原生质体的检测和再生第39页
   ·再生菌株主要生物学特性比较第39页
 2 结果第39-44页
   ·菌龄对原生质体制备的影响第39-40页
   ·酶系统对原生质体制备的影响第40-41页
   ·酶解时间对原生质体制备的影响第41-42页
   ·酶解温度对原生质体制备的影响第42页
   ·稳渗剂对原生质体制备的影响第42页
   ·原生质体的检测与再生第42-43页
   ·再生菌株的生物学特性比较第43-44页
 3 讨论第44-46页
第五章 链格孢菌限制性内切酶介导整合(REMI)转化及筛选第46-54页
 1 材料和方法第46-49页
   ·材料与试剂第46-47页
   ·方法第47-49页
 2 结果第49-52页
   ·质粒的提取、酶切及 PCR检测第49页
   ·转化子的筛选第49-50页
   ·限制性内切酶用量对转化的影响第50页
   ·质粒对转化的影响第50-51页
   ·弱致病菌株的筛选第51-52页
   ·弱致病菌株产毒量测定第52页
 3 讨论第52-54页
第六章 产毒减弱突变株的生物学特性分析和REMI插入突变的 PCR验证第54-62页
 1 材料和方法第54-55页
   ·材料、试剂和溶液第54页
   ·方法第54-55页
 2 结果第55-61页
   ·突变株的生物学特性比较分析第55-60页
   ·产毒减弱突变株 REMI插入突变的PCR验证第60-61页
 3 讨论第61-62页
全文讨论第62-65页
 1 链格孢菌强产毒菌株的筛选第62页
 2 链格孢菌原生质体的制备第62-63页
 3 REMI转化和产毒突变株的筛选和鉴定第63-64页
 4 产毒相关基因克隆的展望第64-65页
结论第65-66页
参考文献第66-73页
致谢第73-74页
攻读硕士期间发表的论文第74页

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