| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-28页 |
| ·L-半胱氨酸结构 | 第12页 |
| ·L-半胱氨酸的理化性质 | 第12-13页 |
| ·L-半胱氨酸的应用 | 第13-17页 |
| ·L-半胱氨酸的生产方法 | 第17-22页 |
| ·从DL-ATC合成L-半胱氨酸的酶法转化机制 | 第22-25页 |
| ·用基因工程技术构建产L-半胱氨酸工程菌 | 第25-27页 |
| ·论文立题背景 | 第27-28页 |
| 第二章 假单胞菌TS1138菌株基因组随机文库的构建和转化酶基因的克隆和表达 | 第28-54页 |
| ·引言 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29-33页 |
| ·实验方法 | 第33-44页 |
| ·TS1138菌株基因组DNA随机文库的构建 | 第33-38页 |
| ·L-ATC水解酶基因和L-SCC酰胺水解酶基因的筛选 | 第38-39页 |
| ·目的基因的克隆和序列分析 | 第39页 |
| ·两个水解酶基因的表达产物分析 | 第39-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-53页 |
| ·TS1138基因组DNA部分酶切预实验结果 | 第44页 |
| ·质粒的酶切和去磷酸化以及DNA片段的回收 | 第44-45页 |
| ·L-ATC水解酶和L-SCC酰胺水解酶基因的筛选 | 第45-46页 |
| ·pBM32质粒插入片段基因的功能分析 | 第46页 |
| ·pBM32质粒中插入片段的序列分析 | 第46-49页 |
| ·两个水解酶基因表达产物的分析 | 第49-53页 |
| ·相似性序列分析及序列提交 | 第53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 第三章 TS1138菌株L-半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆和表达 | 第54-75页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-66页 |
| ·L-半胱氨酸脱巯基酶基因引物的设计 | 第56-57页 |
| ·TS1138菌株L-半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆 | 第57-59页 |
| ·L-半胱氨酸脱巯基酶基因的杂交 | 第59-63页 |
| ·L-半胱氨酸脱巯基酶基因的表达 | 第63页 |
| ·利用Ni-NTA His-Bind螯合层析系统对表达蛋白分离纯化 | 第63-64页 |
| ·表达产物的蛋白质电泳分析 | 第64-65页 |
| ·TS1138菌株的系统进化关系 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-73页 |
| ·TS1138基因组DNA的提取以及PCR扩增 | 第66页 |
| ·克隆载体构建以及重组质粒的鉴定 | 第66-67页 |
| ·pB-cd质粒中插入片段的序列分析 | 第67-68页 |
| ·核酸杂交 | 第68-69页 |
| ·L-半胱氨酸脱巯基酶基因表达产物的分析 | 第69-72页 |
| ·TS1138菌株进化关系及进化树 | 第72-73页 |
| ·向GenBank提交序列 | 第73页 |
| ·本章小结 | 第73-75页 |
| 讨论与展望 | 第75-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 在学期间发表文章目录 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
