| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·油菜转基因研究的意义 | 第11-12页 |
| ·油菜转基因方法体系 | 第12-14页 |
| ·油菜转基因受体系统 | 第12页 |
| ·油菜转基因常用方法 | 第12-13页 |
| ·受体系统与常见转化方法的缺点 | 第13页 |
| ·活体植株受体系统 | 第13页 |
| ·floral-dip法的系统优缺点 | 第13-14页 |
| ·农杆菌介导的floral-dip法的研究 | 第14-23页 |
| ·floral-dip转化法的建立与发展 | 第14-16页 |
| ·转化相关影响因子的研究 | 第16-19页 |
| ·植株发育时期 | 第16-17页 |
| ·表面活性剂的应用 | 第17-18页 |
| ·转化缓冲液的影响 | 第18页 |
| ·浸渍时间、次数以及菌液浓度 | 第18-19页 |
| ·转化机理的研究 | 第19-22页 |
| ·报告基因GUS活性的组织化学定位 | 第19-20页 |
| ·杂交实验 | 第20-21页 |
| ·转基因后代植株的遗传分析 | 第21页 |
| ·植株体内农杆菌体的生存 | 第21-22页 |
| ·转化后代的遗传稳定性 | 第22页 |
| ·对floral-dip转基因方法的评价 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-30页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·受体材料 | 第24页 |
| ·质粒及工程菌 | 第24页 |
| ·外源基因及形态表现 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-29页 |
| ·农杆菌制备 | 第24-25页 |
| ·农杆菌培养基 | 第24-25页 |
| ·农杆菌培养 | 第25页 |
| ·转化buffer | 第25页 |
| ·floral-dip转化处理及田间管理 | 第25页 |
| ·实验设计 | 第25-27页 |
| ·处理油菜花序不同发育时期 | 第25-26页 |
| ·silwet-77处理浓度 | 第26页 |
| ·浸渍次数的处理 | 第26页 |
| ·浸渍时间的处理 | 第26页 |
| ·蔗糖浓度的处理 | 第26-27页 |
| ·细胞分裂素的处理 | 第27页 |
| ·种子收获及数据收集 | 第27页 |
| ·报告基因检测 | 第27-28页 |
| ·GUS瞬间检测 | 第27-28页 |
| ·方法与步骤 | 第27页 |
| ·处理药品 | 第27-28页 |
| ·绿色荧光蛋白报告基因(gfp)的瞬间检测 | 第28页 |
| ·转化后代植株的筛选 | 第28-29页 |
| ·卡那霉素(Km)最佳致死浓度的确定 | 第28页 |
| ·T1代种子的抗性筛选及田间移栽 | 第28-29页 |
| ·抗性植株GUS报告基因稳定检测 | 第29页 |
| ·抗性植株田间性状观察 | 第29页 |
| ·数据处理 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-46页 |
| ·油菜花序不同分枝部位对转化效果的影响 | 第30-31页 |
| ·表面活性剂silwet-77的效果 | 第31-33页 |
| ·表面活性剂silwet-77对油菜结实的影响 | 第31-33页 |
| ·不同浓度silwet-77对转基因频率的影响 | 第33页 |
| ·浸渍次数与浸渍时间对转化效果的影响 | 第33-37页 |
| ·不同浸渍次数对转化效果的影响 | 第34-35页 |
| ·浸渍次数与silwet-77浓度的相互作用 | 第35页 |
| ·浸渍时间对转化效果的影响 | 第35-37页 |
| ·蔗糖浓度对转化效果的影响 | 第37-41页 |
| ·不同蔗糖浓度下转化效果比较 | 第37-39页 |
| ·保护花粉活力的适宜蔗糖浓度 | 第39-41页 |
| ·细胞分裂素对转化效果的影响 | 第41-44页 |
| ·卡那霉素(Km)致死浓度的确定和T1代种子的抗性筛选 | 第44-45页 |
| ·转基因后代的形态变异 | 第45页 |
| ·农杆菌进入受体植株的路径观察 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·适宜的floral-dip处理时期 | 第46页 |
| ·floral-dip处理的次数 | 第46-47页 |
| ·表面活性剂silwet-77对floral-djp转化处理的促进作用 | 第47页 |
| ·蔗糖的辅助转化效果 | 第47-48页 |
| ·细胞分裂素的辅助转化作用 | 第48页 |
| ·转化后代的筛选和形态变异 | 第48-49页 |
| ·关于农杆菌进入植株体内的可能途径与方式 | 第49页 |
| ·提高floral-dip转化效果的技术措施 | 第49-50页 |
| ·需进一步开展的工作 | 第50-51页 |
| 版图说明 | 第51-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |