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小麦(Triticum aestivum)基因工程研究--Ⅰ. 玉米C_4型pepc和ppdk基因的克隆及其在转基因小麦中的表达 Ⅱ. 改良面包烘烤品质转基因小麦后代品质特性分析

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
缩略语第11-13页
第一章 文献综述第13-30页
 第一节 转基因小麦研究概况第13-15页
 第二节 C_4与C_3光合作用途径及C_4高光效基因转化C_3植物的研究进展第15-26页
  1.C4与C3光合作用途径的异同(CO2浓缩机制)第15-17页
  2.C4光合作用途径的关键酶及其基因第17-20页
   ·CA及其基因Cah第17-18页
   ·PEPC及其基因Pepc第18-19页
   ·NADP-MDH及其基因Mdh第19页
   ·NADP-ME及其基因Me第19页
   ·PPDK及其基因Ppdk第19-20页
  3.C_4光合作用相关基因的表达与调控第20页
  4.C_4基因的进化与表达调控第20-23页
   ·ppdk基因第21-22页
   ·pepc基因第22页
   ·NADP-me基因第22页
   ·mdh基因第22页
   ·cah基因第22-23页
  5.C_4基因在C_3转基因植物中的表达第23-26页
 第三节 小麦面包烘烤品质谷物化学和分子生物学研究进展第26-30页
  1.小麦籽粒胚乳储藏蛋白的组成第26-27页
  2.小麦高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)及其编码基因的研究进展第27-28页
  3.HMW-GS转基因研究进展第28-30页
第二章 玉米C_4 pepc和ppdk基因的克隆及转化小麦研究第30-58页
 第一节 玉米C_4型pepc与ppdk基因的LA-PCR克隆第32-37页
 第二节 玉米C_4型pepc基因的克隆及转化小麦的研究第37-45页
 第三节 玉米ppdk基因序列分析及表达载体的构建第45-52页
  1.材料与方法第45-47页
   ·植物材料第45页
   ·玉米C_4型ppdk基因的克隆与序列分析第45页
   ·玉米C_4型ppdk基因表达载体pBAC216的构建第45-47页
   ·LA-PCR方法第47页
  2.结果与分析第47-50页
   ·玉米C_4型ppdk基因的克隆、表达载体的构建及序列分析第47-50页
  3.讨论第50-52页
 第四节 玉米ppdk基因的小麦遗传转化研究第52-55页
  1.材料与方法第52-53页
   ·植物材料第52页
   ·小麦PDS1000/He转化体系第52-53页
     ·微粒子弹的准备第52页
     ·培养基第52-53页
   ·再生株的PCR鉴定第53页
   ·再生植株的点杂交鉴定第53页
  2.结果与分析第53-54页
   ·玉米ppdk基因的遗传转化与转基因植株的鉴定第53-54页
  3.讨论第54-55页
 第五节 转玉米pepc基因小麦及其后代的光合生理研究第55-58页
  1.材料与方法第55页
   ·植物材料第55页
   ·转基因植株光合作用生理指标测定第55页
  2.结果与讨论第55-58页
第三章 HMW 1Dx5+1Dy10基因的转基因小麦后代遗传分析第58-86页
 第一节 转基因小麦后代的SDS-PAGE电泳分析及其HMW-GS表达类型研究第59-65页
  1.材料与方法第59页
   ·植物材料第59页
   ·小麦种子蛋白的提取第59页
   ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第59页
  2.结果与分析第59-63页
   ·不同转基因株系HMW-GS的表达类型第59-61页
   ·转基因株系HMW-GS表达的分离与纯合第61-63页
     ·转基因株系3-74的分离后代第61-62页
     ·转基因株系2-73B的分离后代第62页
     ·转基因株系5-23的分离后代第62页
     ·转基因株系5-99的分离后代第62-63页
     ·转基因株系5-98的纯合后代品系第63页
  3.讨论第63-65页
 第二节 转基因株系的品质性状研究第65-72页
  1.材料与方法第65-66页
   ·籽粒品质性状分析第65页
   ·Zeleny微量法测定沉淀值第65-66页
   ·SDS常量法测定沉淀值第66页
     ·试剂第66页
     ·操作步骤第66页
  2.结果与分析第66-72页
   ·面粉沉淀值分析第66-67页
   ·蛋白质含量分析与改良效果第67-69页
   ·性状分析与优良稳定株系筛选第69-72页
       ·TG5-23b第69页
       ·TG5-98第69页
       ·TG5-99第69-70页
       ·TG3-76b第70-72页
 第三节 转基因株系的面团流变学特性和面包烘烤品质第72-79页
  1.材料方法:第72页
   ·粉质图:第72页
   ·面团拉伸曲线第72页
   ·面粉粉质、面团柔和性及加工品质分析第72页
  2.结果与分析第72-79页
   ·转基因小麦面粉粉质分析第72-73页
   ·转基因品系的粉质图、拉伸曲线与面包烘烤评分第73-79页
     ·转基因小麦品系5-98和5-99的粉质图分析第74-76页
     ·转基因小麦品系5-98和5-99的拉伸仪分析第76-77页
     ·转基因小麦品系5-98和5-99的面包烘烤试验第77-79页
 第四节转 基因品系比较试验第79-86页
  1.材料与方法第79-80页
   ·选用的转基因品系材料与对照品种第79页
   ·品比试验的产量与方差分析第79-80页
   ·差异显著性检验第80页
  2.结果与分析第80-83页
   ·测产结果第80页
   ·差异显著性检验结果第80-83页
     ·以京411为对照品种,用PLSD法测验第80-81页
     ·以京冬8号为对照品种,用PLSD法测验第81-83页
  3 讨论第83-86页
第四章 结论和展望第86-89页
 1.玉米C4型pepc和ppdk基因的克隆及转化小麦试验第86-87页
 2.高分子量谷蛋白亚基基因转基因小麦后代遗传分析第87-89页
参考文献第89-97页
致谢第97-98页
附录1 玉米pepc基因序列及其比较第98-106页
附录2 玉米ppdk基因序列及其比较第106-119页

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