| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-26页 |
| ·植物RNA病毒寄主因子 | 第8-13页 |
| ·研究寄主因子的方法 | 第9页 |
| ·研究植物RNA病毒寄主因子的两个系统 | 第9-13页 |
| ·基因沉默 | 第13-21页 |
| ·基因沉默的类型 | 第13-14页 |
| ·转录后基因沉默的特征 | 第14页 |
| ·转录后基因沉默的假说 | 第14-18页 |
| ·与沉默有关的植物与病毒相互作用机制 | 第18-20页 |
| ·RNA沉默在基因功能研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·基因沉默方法 | 第21-24页 |
| ·反义RNA技术 | 第21-23页 |
| ·RNA干涉(RNA interference)技术 | 第23页 |
| ·病毒介导的基因沉默 | 第23-24页 |
| ·辣椒的遗传转化 | 第24页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·辣椒品种 | 第26页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·抗生素 | 第26-27页 |
| ·酶、化学试剂 | 第27页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第27页 |
| ·常规分子生物学操作方法 | 第27-35页 |
| ·辣椒总DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·辣椒总RNA的提取纯化 | 第28页 |
| ·凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·辣椒cDNA的合成 | 第29-31页 |
| ·PCR反应 | 第31页 |
| ·辣椒gDNA片段的获得 | 第31页 |
| ·从凝胶中回收目的DNA片段 | 第31页 |
| ·DNA连接反应 | 第31页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第32页 |
| ·内切酶反应 | 第32页 |
| ·三亲结合方法向农杆菌导入目的质粒 | 第32-33页 |
| ·辣椒的遗传转化 | 第33页 |
| ·转基因辣椒的PCR检测 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的抗病性检测 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-67页 |
| ·辣椒全长CTOM1基因cDNA的克隆 | 第35-43页 |
| ·辣椒总RNA的浓度及质量 | 第35页 |
| ·CTOM1的RT-PCR | 第35-36页 |
| ·CTOM1全长cDNA的克隆 | 第36-38页 |
| ·CTOM1基因分析 | 第38-43页 |
| ·辣椒CTOM1基因组DNA片段的克隆 | 第43-45页 |
| ·CTOM1基因组DNA片段与CTOM1全长cDNA的比较 | 第45页 |
| ·CTOM1基因沉默表达质粒的构建 | 第45-61页 |
| ·CTOM1反义RNA表达质粒的构建 | 第46-49页 |
| ·CTOM1 RNAi表达质粒的构建 | 第49-57页 |
| ·携带CTOM1基因的病毒表达质粒的构建 | 第57-61页 |
| ·辣椒的遗传转化 | 第61-64页 |
| ·不同激素对不同外植体诱芽分化的影响 | 第61-62页 |
| ·辣椒对卡那霉素的敏感性 | 第62页 |
| ·农杆菌转化辣椒的组培条件 | 第62-64页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第64-65页 |
| ·转基因植株的抗病性检测 | 第65-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-71页 |
| ·辣椒CTOM1基因 | 第67-68页 |
| ·应用不同的表达质粒验证CTOM1基因的功能 | 第68页 |
| ·不同辣椒外植体对农杆菌介导的遗传转化效率的影响 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 附录1 缩略词及中文对照 | 第81-82页 |
| 附录2 常用培养基、溶液及其配制 | 第82-85页 |
| 附录3 实验中用到的主要仪器 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |