中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-19页 |
1 概述 | 第10-11页 |
2 胆红素神经毒性的研究背景 | 第11-15页 |
2.1 胆红素的来源及性质 | 第11页 |
2.2 胆红素的生理功能与神经毒性 | 第11-13页 |
2.3 胆红素对神经元损伤的可能作用机制 | 第13-15页 |
3 表观遗传学 | 第15-19页 |
第二章 实验材料与方法 | 第19-30页 |
1 实验动物的饲养 | 第19页 |
2 实验主要试剂 | 第19-21页 |
2.1 细胞培养主要试剂 | 第19-20页 |
2.2 Western blot实验主要试剂 | 第20页 |
2.3 RT-PCR实验主要试剂 | 第20-21页 |
2.4 其他实验主要试剂 | 第21页 |
3 主要仪器和设备 | 第21页 |
4 溶液配制 | 第21-23页 |
4.1 神经元培养基 | 第21-22页 |
4.2 含 10%胎牛血清的DMEM培养基 | 第22页 |
4.3 HBSS-2 溶液 | 第22页 |
4.4 0.025%胰酶 | 第22页 |
4.5 多聚赖氨酸(Poly-L-lysine,PLL) | 第22页 |
4.6 0.01mol/L磷酸缓冲盐溶液溶液 | 第22页 |
4.7 噻唑蓝(MTT)溶液 | 第22页 |
4.8 抗体 | 第22-23页 |
5 实验方法 | 第23-29页 |
5.1 皮质神经元原代培养 | 第23页 |
5.2 细胞染毒 | 第23-24页 |
5.3 MTT法检测细胞活性 | 第24页 |
5.4 Caspase-3 的活性检测 | 第24-25页 |
5.5 ROS检测 | 第25页 |
5.6 细胞蛋白定量 | 第25-26页 |
5.7 Western blot检测 | 第26-27页 |
5.8 RT-PCR检测 | 第27-29页 |
6 数据统计处理 | 第29-30页 |
第三章 实验结果 | 第30-38页 |
1 胆红素对神经元活性毒性评价 | 第30-31页 |
1.1 神经元的培养鉴定 | 第30页 |
1.2 不同时间不同浓度胆红素对神经元活力的影响 | 第30-31页 |
2 不同浓度的胆红素对神经元中Caspase-3 活性的影响 | 第31-32页 |
3 胆红素对神经细胞总ROS水平的影响 | 第32-33页 |
4 不同浓度胆红素对神经元中Tet1表达水平的影响 | 第33-35页 |
4.1 不同浓度的胆红素对神经元中Tet1蛋白质表达水平的影响 | 第33-34页 |
4.2 不同浓度胆红素对神经元中Tet1基因表达水平的影响 | 第34-35页 |
5 不同浓度胆红素对神经元中Klotho表达水平的评价 | 第35-38页 |
5.1 不同浓度胆红素对神经元中Klotho蛋白质表达水平的影响 | 第35-36页 |
5.2 不同浓度胆红素对神经元中Klotho基因表达水平的影响 | 第36-38页 |
第四章 讨论 | 第38-46页 |
1 神经元的原代培养与处理 | 第38-39页 |
1.1 神经元贴壁生长的影响因素 | 第38页 |
1.2 神经元提取时间的控制 | 第38页 |
1.3 培养基的选择 | 第38-39页 |
1.4 组织的剥离与消化 | 第39页 |
2 神经元的确定及胆红素模型的建立 | 第39-40页 |
3 胆红素对神经元活性的影响 | 第40页 |
4 胆红素对神经元Caspase-3 活性的影响 | 第40-41页 |
5 胆红素对神经元中ROS含量的影响 | 第41-42页 |
6 胆红素对神经元中Tet1表达的影响 | 第42-44页 |
7 胆红素对神经元中Klotho表达的影响 | 第44-46页 |
第五章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
在学期间的研究成果 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
英文缩略词表 | 第57页 |