| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 第一章 综述 | 第8-24页 |
| ·前言 | 第8页 |
| ·生物固氮简介 | 第8-10页 |
| ·共生固氮的分子遗传研究进展 | 第10-12页 |
| ·竞争结瘤的分子遗传研究进展 | 第12-18页 |
| ·豆科植物固氮研究的发展趋势 | 第18-19页 |
| ·根瘤菌共生固氮的分子遗传学研究方法 | 第19-22页 |
| ·与共生固氮相关的鸟氨酸代谢 | 第22-23页 |
| ·本工作目的 | 第23-24页 |
| 第二章 材料和方法 | 第24-41页 |
| ·菌株与质粒 | 第24-25页 |
| ·培养基及生长条件 | 第25-27页 |
| ·抗生素 | 第27页 |
| ·溶液、缓冲液和试剂 | 第27-28页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第28-30页 |
| ·质粒DNA的纯化、定量与沉淀 | 第30-31页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第31页 |
| ·电泳 | 第31页 |
| ·DNA酶切 | 第31-32页 |
| ·DNA酶切片段的分离与回收 | 第32-34页 |
| ·DNA的连接 | 第34页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第34-35页 |
| ·根瘤菌总DNA的提取 | 第35-37页 |
| ·DNA-DNA杂交 | 第37-39页 |
| ·三亲本结合 | 第39-40页 |
| ·PK18nob诱变野生型菌染色体DNA | 第40页 |
| ·DNA序列分析 | 第40-41页 |
| 第三章 同源单交换重组质粒的构建 | 第41-55页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·pK18mob(Pknockout vector)单交换重组质粒构建 | 第41-53页 |
| ·SMC01053／DH5a构建 | 第42-44页 |
| ·SMC02124／DH5a构建 | 第44-47页 |
| ·SMC02123／DH5a构建 | 第47-49页 |
| ·SMC02122／DH5a构建 | 第49-51页 |
| ·SMC01054／DH5a构建 | 第51-53页 |
| ·测序结果及比较 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 苜蓿根瘤菌Rm1021突变体构建 | 第55-70页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·突变体构建 | 第55-56页 |
| ·三亲本接合及电转化 | 第55页 |
| ·三亲本接合 | 第55页 |
| ·电转化 | 第55页 |
| ·筛选 | 第55-56页 |
| ·突变体验证 | 第56-58页 |
| ·突变体的生长情况 | 第58-68页 |
| ·结果 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第五章 互补菌的构建 | 第70-75页 |
| 引言 | 第70页 |
| ·互补菌株构建 | 第70页 |
| ·三亲本接合法 | 第70页 |
| ·电转化法 | 第70页 |
| ·验证 | 第70-73页 |
| ·r SMC02123／Rm1021互补验证 | 第70-72页 |
| ·r SMC02123／Rm1021酶切验证 | 第70-71页 |
| ·r SMC02123／Rm1021鸟氨酸生长 | 第71页 |
| ·r SMC02123／Rm1021脯氨酸生长 | 第71-72页 |
| ·r SMC02122／Rm1021互补验证 | 第72-73页 |
| ·r SMC02122／Rm1021酶切验证 | 第72页 |
| ·r SMC02122／Rm1021鸟氨酸生长 | 第72-73页 |
| ·r SMC02123／Rm1021脯氨酸生长 | 第73页 |
| ·结果 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| 第六章 总结与讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 致谢 | 第82页 |