前言 | 第1-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
第二章 实验研究 | 第17-41页 |
第一节 hMSCS和hUVECS基因表达差异分析 | 第17-33页 |
一 实验材料 | 第17-19页 |
二 实验方法 | 第19-26页 |
(一) hMSCS的分离、培养和扩增 | 第19-20页 |
(二) hMSCS的鉴定 | 第20-22页 |
(三) hMSCS的电镜分析 | 第22页 |
(四) hMSCS的总RNA抽提 | 第22-23页 |
(五) hUVECS的分离、培养及扩增 | 第23-24页 |
(六) hUVECS的鉴定、电镜分析和总RNA抽提 | 第24页 |
(七) cDNA芯片检测 | 第24-26页 |
三 实验结果 | 第26-33页 |
(一) hMSCS的形态特征 | 第26页 |
(二) hMSCS的超微结构 | 第26页 |
(三) hMSCS的免疫细胞化学染色 | 第26页 |
(四) hMSCS的免疫荧光染色 | 第26页 |
(五) hMSCS的FACS分析 | 第26-27页 |
(六) hUVECS的形态观察 | 第27页 |
(七) hUVECS的超微结构 | 第27-28页 |
(八) hUVECS的免疫细胞化学染色 | 第28页 |
(九) hUVECS的免疫荧光染色 | 第28页 |
(十) hUVECS的FACS分析 | 第28页 |
(十一) hMSCS和hUVECS的基因表达差异分析 | 第28-33页 |
第二节 人骨髓间充质干细胞的体外VEGF-165基因黑心染 | 第33-41页 |
一 材料与方法 | 第33页 |
二 实验方法 | 第33-39页 |
(一) 含目的基因质粒pcDNA3.1/GS的扩增和检测 | 第33-35页 |
(二) hMSCS的VEGF165基因转染步骤 | 第35页 |
(三) 转染hMSCS的mRNA和蛋白表达水平检测 | 第35-39页 |
三 实验结果 | 第39-41页 |
(一) 质粒的质量检测和基因测序 | 第39页 |
(二) 转染hMSCS的形态观察 | 第39页 |
(三) 转染hMSCS的RT-PCR | 第39-40页 |
(四) 转染hMSCS的免疫荧光染色 | 第40页 |
(五) VEGF165分泌蛋白的ELISA 定量分析 | 第40页 |
(六) 转染hMSCS的FACS测试 | 第40-41页 |
第三章 讨论 | 第41-48页 |
一 材料的选择及鉴定 | 第41-42页 |
二 hMSCS和hUVECS基因表达差异分析 | 第42-45页 |
三 hMSCS的内皮诱导分化 | 第45-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
照片 | 第56-59页 |
中文摘要 | 第59-63页 |
英文摘要 | 第63-67页 |
致谢 | 第67-68页 |