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石斛类ISSR标记研究与ITS序列分析

英文缩写词表第1-7页
中文摘要第7-8页
英文摘要第8-10页
第一章 引言第10-26页
 一、 石斛的历史与鉴定研究概述第10-15页
   ·分布与生境第10页
   ·石斛的本草考证和相关记载第10-11页
   ·主要的商品石斛第11-12页
   ·石斛属植物化学成分研究第12-13页
   ·石斛类药材的应用记载及临床研究第13页
   ·石斛类药材的原植物与生药鉴定研究第13-15页
 二、 分子标记技术及其在石斛中的应用第15-17页
   ·蛋白质标记在兰科中的应用第15页
   ·DNA分子标记技术在兰科中的应用第15-16页
   ·DNA分子标记技术在石斛中的应用第16-17页
     ·ITS序列分析第16-17页
     ·matK基因序列第17页
 三、 ISSR分子标记技术概况第17-22页
   ·分子标记的种类第17-18页
   ·分子标记技术在中药研究中的应用第18页
   ·SSR标记和ISSR标记第18-19页
   ·ISSR标记的应用领域第19-22页
 四、 本实验的立题依据和意义第22-26页
第二章 主要实验仪器及试剂第26-28页
 一、 主要实验仪器第26页
 二、 主要试剂第26-28页
第三章 材料的收集与保存第28-30页
 一、 材料来源第28-29页
 二、 材料的运输与保存第29-30页
第四章 基因组DNA提取第30-37页
 一、 四种DNA提取方法的比较第30-32页
 二、 四种方法结果比较第32-34页
 三、 DNA质量的凝胶电泳检测第34页
 四、 讨论第34-37页
第五章 ISSR引物初步筛选及ISSR-PCR反应体系优化第37-48页
 一、 引物来源第37-39页
 二、 PCR反应体系和参数的初步建立第39-40页
   ·PCR反应体系第39页
   ·PCR反应参数第39-40页
 三、 PCR产物凝胶电泳分析第40页
 四、 初步筛选结果分析第40-42页
 五、 PCR反应体系优化第42-48页
   ·PCR反应体系调整第42-44页
     ·模板浓度对PCR反应的影响第42-43页
     ·引物浓度对PCR反应的影响第43-44页
     ·Mg~(2+)浓度对PCR反应的影响第44页
   ·PCR反应参数调整第44-45页
     ·循环参数的调整第44-45页
     ·退火温度的调整第45页
     ·PCR反应体积的调整第45页
   ·添加去离子甲酰胺的作用第45-46页
   ·优化后的PCR反应条件及电泳条件第46-48页
第六章 不同种石斛ISSR分析第48-56页
 一、 材料和方法第48页
 二、 结果与分析第48-54页
   ·所有引物的筛选第48-50页
   ·所有样本扩增模式及分析第50-54页
 三、 讨论第54-56页
第七章 不同居群铁皮石斛的ISSR分析第56-61页
 一、 材料和方法第56页
 二、 结果与分析第56-60页
   ·电泳结果及分析第56-59页
   ·数据的处理和分析第59-60页
 三、 特异条带测序结果第60-61页
第八章 铁皮石斛、细叶石斛ITS序列分析第61-74页
 一、 实验方法第61-65页
   ·PCR反应和凝胶电泳第61-62页
   ·凝胶回收PCR产物第62-63页
   ·TA克隆连接回收产物并转化大肠杆菌第63-65页
     ·连接载体第63-64页
     ·转化大肠杆菌第64页
     ·质粒DNA提取(小提)第64-65页
   ·外源片段的检测第65页
   ·ITS区域测序第65页
 二、 实验结果第65-72页
   ·PCR产物电泳结果第65-66页
   ·质粒DNA电泳结果第66页
   ·外源片段检测结果第66页
   ·测序结果与分析第66-72页
     ·BLASTn比较第66-70页
     ·CLASTAL X比较第70-72页
 三、 讨论第72-74页
致谢第74-75页
硕士期间发表的论文第75页

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