英文缩写词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一章 引言 | 第10-26页 |
一、 石斛的历史与鉴定研究概述 | 第10-15页 |
·分布与生境 | 第10页 |
·石斛的本草考证和相关记载 | 第10-11页 |
·主要的商品石斛 | 第11-12页 |
·石斛属植物化学成分研究 | 第12-13页 |
·石斛类药材的应用记载及临床研究 | 第13页 |
·石斛类药材的原植物与生药鉴定研究 | 第13-15页 |
二、 分子标记技术及其在石斛中的应用 | 第15-17页 |
·蛋白质标记在兰科中的应用 | 第15页 |
·DNA分子标记技术在兰科中的应用 | 第15-16页 |
·DNA分子标记技术在石斛中的应用 | 第16-17页 |
·ITS序列分析 | 第16-17页 |
·matK基因序列 | 第17页 |
三、 ISSR分子标记技术概况 | 第17-22页 |
·分子标记的种类 | 第17-18页 |
·分子标记技术在中药研究中的应用 | 第18页 |
·SSR标记和ISSR标记 | 第18-19页 |
·ISSR标记的应用领域 | 第19-22页 |
四、 本实验的立题依据和意义 | 第22-26页 |
第二章 主要实验仪器及试剂 | 第26-28页 |
一、 主要实验仪器 | 第26页 |
二、 主要试剂 | 第26-28页 |
第三章 材料的收集与保存 | 第28-30页 |
一、 材料来源 | 第28-29页 |
二、 材料的运输与保存 | 第29-30页 |
第四章 基因组DNA提取 | 第30-37页 |
一、 四种DNA提取方法的比较 | 第30-32页 |
二、 四种方法结果比较 | 第32-34页 |
三、 DNA质量的凝胶电泳检测 | 第34页 |
四、 讨论 | 第34-37页 |
第五章 ISSR引物初步筛选及ISSR-PCR反应体系优化 | 第37-48页 |
一、 引物来源 | 第37-39页 |
二、 PCR反应体系和参数的初步建立 | 第39-40页 |
·PCR反应体系 | 第39页 |
·PCR反应参数 | 第39-40页 |
三、 PCR产物凝胶电泳分析 | 第40页 |
四、 初步筛选结果分析 | 第40-42页 |
五、 PCR反应体系优化 | 第42-48页 |
·PCR反应体系调整 | 第42-44页 |
·模板浓度对PCR反应的影响 | 第42-43页 |
·引物浓度对PCR反应的影响 | 第43-44页 |
·Mg~(2+)浓度对PCR反应的影响 | 第44页 |
·PCR反应参数调整 | 第44-45页 |
·循环参数的调整 | 第44-45页 |
·退火温度的调整 | 第45页 |
·PCR反应体积的调整 | 第45页 |
·添加去离子甲酰胺的作用 | 第45-46页 |
·优化后的PCR反应条件及电泳条件 | 第46-48页 |
第六章 不同种石斛ISSR分析 | 第48-56页 |
一、 材料和方法 | 第48页 |
二、 结果与分析 | 第48-54页 |
·所有引物的筛选 | 第48-50页 |
·所有样本扩增模式及分析 | 第50-54页 |
三、 讨论 | 第54-56页 |
第七章 不同居群铁皮石斛的ISSR分析 | 第56-61页 |
一、 材料和方法 | 第56页 |
二、 结果与分析 | 第56-60页 |
·电泳结果及分析 | 第56-59页 |
·数据的处理和分析 | 第59-60页 |
三、 特异条带测序结果 | 第60-61页 |
第八章 铁皮石斛、细叶石斛ITS序列分析 | 第61-74页 |
一、 实验方法 | 第61-65页 |
·PCR反应和凝胶电泳 | 第61-62页 |
·凝胶回收PCR产物 | 第62-63页 |
·TA克隆连接回收产物并转化大肠杆菌 | 第63-65页 |
·连接载体 | 第63-64页 |
·转化大肠杆菌 | 第64页 |
·质粒DNA提取(小提) | 第64-65页 |
·外源片段的检测 | 第65页 |
·ITS区域测序 | 第65页 |
二、 实验结果 | 第65-72页 |
·PCR产物电泳结果 | 第65-66页 |
·质粒DNA电泳结果 | 第66页 |
·外源片段检测结果 | 第66页 |
·测序结果与分析 | 第66-72页 |
·BLASTn比较 | 第66-70页 |
·CLASTAL X比较 | 第70-72页 |
三、 讨论 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
硕士期间发表的论文 | 第75页 |