中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-30页 |
·卵泡刺激素研究概况 | 第12-14页 |
·卵泡刺激素简介 | 第13页 |
·卵泡刺激素国内外研究进展简介 | 第13-14页 |
·卵泡刺激素作用机理研究 | 第14-23页 |
·卵泡刺激素的基因结构 | 第14-16页 |
·卵泡刺激素的生理作用 | 第16-18页 |
·卵泡刺激素的合成与代谢 | 第18-19页 |
·精子、卵子的形成 | 第19-20页 |
·卵泡刺激素与卵泡生长类型和主卵泡关系 | 第20-21页 |
·卵泡刺激素作用的分子生物学机制 | 第21-23页 |
·重组卵泡刺激素研究 | 第23-25页 |
·卵泡刺激素的应用研究 | 第25-28页 |
·卵泡刺激素在临床上的应用研究 | 第25-27页 |
·卵泡刺激素在牛超排上的应用研究 | 第27页 |
·卵泡刺激素在羊超排上的应用研究 | 第27-28页 |
·本实验研究的目的和意义 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-52页 |
·实验材料 | 第30-32页 |
·实验动物 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·主要药品、试剂 | 第30-32页 |
·实验方法 | 第32-52页 |
·样品采集 | 第32页 |
·TRIZOL试剂盒提取RNA | 第32-33页 |
·分光光度法和RNA变性电泳法测定RNA浓度和质量 | 第33-34页 |
·使用TakaRa试剂盒进行反转录及PCR反应克隆卵泡刺激素基因 | 第34-43页 |
·卵泡刺激素基因在真核细胞中的表达研究 | 第43-49页 |
·H.E染色法制备卵巢光镜切片 | 第49-50页 |
·放免法测定血清中E_2含量 | 第50页 |
·动物实验设计 | 第50页 |
·实验数据统计方法 | 第50页 |
·棉铃虫淋巴细胞的冻存和复苏 | 第50-52页 |
3 实验结果 | 第52-68页 |
·RNA提取 | 第52页 |
·梅花鹿FSH基因克隆 | 第52-56页 |
·梅花鹿FSH-α亚基基因克隆 | 第52-54页 |
·梅花鹿FSH-β亚基基因克隆 | 第54-56页 |
·梅花鹿FSH基因在真核细胞中的表达 | 第56-68页 |
·表达载体的构建 | 第56-60页 |
·重组质粒转位到杆状病毒基因组中 | 第60-62页 |
·重组质粒转染昆虫细胞 | 第62页 |
·表达产物的检测 | 第62-63页 |
·重组FSH活性分析 | 第63-68页 |
4 讨论 | 第68-77页 |
·RNA提取过程中如何避免RNase的污染 | 第68-69页 |
·梅花鹿FSH基因克隆中出现的主要问题 | 第69页 |
·梅花鹿FSH基因与其它动物该基因序列的比较 | 第69-70页 |
·梅花鹿FSH-α亚基基因与其它动物FSH-α亚基基因序列的比较 | 第69页 |
·梅花鹿FSH-β亚基基因与其它动物FSH-β亚基基因序列的比较 | 第69-70页 |
·梅花鹿FSH基因的氨基酸序列与其它动物该序列的比较 | 第70-71页 |
·梅花鹿FSH-α亚基的氨基酸序列与其它动物该序列的比较 | 第70-71页 |
·梅花鹿FSH-β亚基的氨基酸序列与其它动物该序列的比较 | 第71页 |
·脂质体介导的转染 | 第71页 |
·利用昆虫杆状病毒表达载体的优越性 | 第71-72页 |
·重组梅花鹿FSH活性分析 | 第72-77页 |
·FSH体内外生物活性的检测方法 | 第72-74页 |
·Western blot结果分析 | 第74页 |
·重组梅花鹿FSH对小鼠卵泡发育的影响 | 第74-75页 |
·重组梅花鹿FSH对小鼠卵巢重量的影响 | 第75页 |
·重组梅花鹿FSH对小鼠子宫重量的影响 | 第75-76页 |
·重组梅花鹿FSH对小鼠血清中E_2的影响 | 第76-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
·成功地克隆了梅花鹿FSH-α和β亚基基因 | 第77页 |
·有效地进行了梅花鹿FSH基因的表达 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-89页 |
附表 | 第89-96页 |
图版及图版说明 | 第96-109页 |
在博士期间发表的论文 | 第109-110页 |
致谢 | 第110页 |