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梅花鹿卵泡刺激素的基因克隆、表达和活性分析

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
1 前言第12-30页
   ·卵泡刺激素研究概况第12-14页
     ·卵泡刺激素简介第13页
     ·卵泡刺激素国内外研究进展简介第13-14页
   ·卵泡刺激素作用机理研究第14-23页
     ·卵泡刺激素的基因结构第14-16页
     ·卵泡刺激素的生理作用第16-18页
     ·卵泡刺激素的合成与代谢第18-19页
     ·精子、卵子的形成第19-20页
     ·卵泡刺激素与卵泡生长类型和主卵泡关系第20-21页
     ·卵泡刺激素作用的分子生物学机制第21-23页
   ·重组卵泡刺激素研究第23-25页
   ·卵泡刺激素的应用研究第25-28页
     ·卵泡刺激素在临床上的应用研究第25-27页
     ·卵泡刺激素在牛超排上的应用研究第27页
     ·卵泡刺激素在羊超排上的应用研究第27-28页
   ·本实验研究的目的和意义第28-30页
2 材料与方法第30-52页
   ·实验材料第30-32页
     ·实验动物第30页
     ·主要仪器设备第30页
     ·主要药品、试剂第30-32页
   ·实验方法第32-52页
     ·样品采集第32页
     ·TRIZOL试剂盒提取RNA第32-33页
     ·分光光度法和RNA变性电泳法测定RNA浓度和质量第33-34页
     ·使用TakaRa试剂盒进行反转录及PCR反应克隆卵泡刺激素基因第34-43页
     ·卵泡刺激素基因在真核细胞中的表达研究第43-49页
     ·H.E染色法制备卵巢光镜切片第49-50页
     ·放免法测定血清中E_2含量第50页
     ·动物实验设计第50页
     ·实验数据统计方法第50页
     ·棉铃虫淋巴细胞的冻存和复苏第50-52页
3 实验结果第52-68页
   ·RNA提取第52页
   ·梅花鹿FSH基因克隆第52-56页
     ·梅花鹿FSH-α亚基基因克隆第52-54页
     ·梅花鹿FSH-β亚基基因克隆第54-56页
   ·梅花鹿FSH基因在真核细胞中的表达第56-68页
     ·表达载体的构建第56-60页
     ·重组质粒转位到杆状病毒基因组中第60-62页
     ·重组质粒转染昆虫细胞第62页
     ·表达产物的检测第62-63页
     ·重组FSH活性分析第63-68页
4 讨论第68-77页
   ·RNA提取过程中如何避免RNase的污染第68-69页
   ·梅花鹿FSH基因克隆中出现的主要问题第69页
   ·梅花鹿FSH基因与其它动物该基因序列的比较第69-70页
     ·梅花鹿FSH-α亚基基因与其它动物FSH-α亚基基因序列的比较第69页
     ·梅花鹿FSH-β亚基基因与其它动物FSH-β亚基基因序列的比较第69-70页
   ·梅花鹿FSH基因的氨基酸序列与其它动物该序列的比较第70-71页
     ·梅花鹿FSH-α亚基的氨基酸序列与其它动物该序列的比较第70-71页
     ·梅花鹿FSH-β亚基的氨基酸序列与其它动物该序列的比较第71页
   ·脂质体介导的转染第71页
   ·利用昆虫杆状病毒表达载体的优越性第71-72页
   ·重组梅花鹿FSH活性分析第72-77页
     ·FSH体内外生物活性的检测方法第72-74页
     ·Western blot结果分析第74页
     ·重组梅花鹿FSH对小鼠卵泡发育的影响第74-75页
     ·重组梅花鹿FSH对小鼠卵巢重量的影响第75页
     ·重组梅花鹿FSH对小鼠子宫重量的影响第75-76页
     ·重组梅花鹿FSH对小鼠血清中E_2的影响第76-77页
5 结论第77-78页
   ·成功地克隆了梅花鹿FSH-α和β亚基基因第77页
   ·有效地进行了梅花鹿FSH基因的表达第77-78页
参考文献第78-89页
附表第89-96页
图版及图版说明第96-109页
在博士期间发表的论文第109-110页
致谢第110页

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