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BRD7与BRD2、BRD3蛋白间交互作用的进一步鉴定及其在鼻咽癌中的表达和作用模式

缩写词简表第1-7页
中文摘要第7-12页
英文摘要第12-17页
前言第17-23页
技术路线第23-24页
一. 材料和方法第24-38页
   ·材料第24-28页
     ·组织与细胞第24页
     ·菌株和质粒载体第24-25页
     ·试剂第25-27页
     ·自配试剂第27-28页
     ·主要仪器第28页
   ·方法第28-38页
     ·生物信息学分析第28页
     ·质粒DNA的提取第28-29页
     ·连接反应第29-30页
     ·转化第30页
     ·pCMV-Myc-BRD7、pCMV-HA-BRD2和pCMV-HA-BRD3表达载体的构建第30-31页
     ·原位杂交第31-33页
     ·RNA抽提第33-34页
     ·差异RT-PCR第34页
     ·灰度扫描与数据处理第34页
     ·BRD7蛋白的亚细胞定位第34-35页
     ·Western blot检测第35-36页
     ·通过特异性酵母双杂交进一步鉴定BRD7与BRD2、BRD3的交互作用第36页
     ·免疫共沉淀实验证实蛋白质交互作用第36-38页
二、 结果第38-70页
   ·BRD7表达蛋白的亚细胞定位及BRD7的原位表达第38-42页
     ·pCMV-myc-BRD7表达载体的构建第38-40页
     ·免疫荧光技术研究BRD7蛋白在Hela和HNE1细胞系中亚细胞定位第40-41页
     ·BRD7在正常鼻咽上皮、鼻咽癌活检组织中的原位表达第41-42页
   ·BRD7与BRD2、BRD3蛋白间交互作用的进一步鉴定第42-59页
     ·通过特异性酵母双杂交技术分别证实BRD7与BRD2、BRD3蛋白间交互用第42-43页
     ·免疫共沉淀技术进一步证实BRD7与BRD2、BRD3蛋白间交互作用第43-59页
   ·BRD7交互作用蛋白基因BRD2、BRD3功能的初步研究第59-70页
     ·生物信息学分析BRD2、BRD3基因的结构和功能第59-65页
     ·通过RT-PCR检测BRD2、BRD3在人正常鼻咽及鼻咽癌活检组织中的表达第65-67页
     ·通过RT-PCR检测BRD2、BRD3在BRD7稳定转染的HNE1细胞系中的表达第67-70页
三、 讨论第70-78页
 (一) BRD7蛋白的免疫荧光定位第70-71页
 (二) BRD7与BRD2、BRD3蛋白间交互作用的进一步鉴定第71-73页
 (三) BRD7交互作用蛋白基因BRD2、BRD3功能的初步研究第73-74页
 (四) BRD7蛋白核移位/活化的分子机制第74-77页
 (五) 进一步研究课题第77-78页
参考文献第78-83页
结论第83-84页
综述第84-91页
致谢第91-92页
个人简历第92页

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