| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-13页 |
| ·灰葡萄孢的生物学特征及其危害 | 第9页 |
| ·灰葡萄孢的致病机制 | 第9-11页 |
| ·灰葡萄孢中调控发育与致病的信号分子 | 第10页 |
| ·灰葡萄孢产生的致病毒素 | 第10-11页 |
| ·灰葡萄孢产生的水解酶类 | 第11页 |
| ·灰葡萄孢产生的激素类物质 | 第11页 |
| ·本研究目的和意义 | 第11-13页 |
| 2 材料和方法 | 第13-29页 |
| ·灰葡萄孢菌株及番茄品种 | 第13页 |
| ·主要试剂及缓冲液 | 第13-15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·仪器和设备 | 第15-16页 |
| ·灰葡萄孢转化子的筛选与鉴定 | 第16-20页 |
| ·灰葡萄孢基因组DNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第17页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第17-20页 |
| ·灰葡萄孢发育相关基因的克隆及分析 | 第20-23页 |
| ·TAIL-PCT 技术 | 第20-21页 |
| ·TAIL-PCR 扩增产物的凝胶回收 | 第21页 |
| ·PCR 产物克隆、测序 | 第21页 |
| ·PCR 检测阳性克隆 | 第21-22页 |
| ·序列分析 | 第22页 |
| ·T-DNA 插入位点的PCR 验证 | 第22-23页 |
| ·突变基因的RT-PCR 鉴定 | 第23-25页 |
| ·总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·总RNA 的纯化 | 第24页 |
| ·RNA 的检测 | 第24页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第24-25页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第25页 |
| ·灰葡萄孢突变基因的功能分析 | 第25-27页 |
| ·突变菌株的表型观察及生长速率测定 | 第25页 |
| ·突变菌株的致病性测定 | 第25-26页 |
| ·突变菌株的毒素活性测定 | 第26页 |
| ·突变菌株胞壁降解酶活性的测定 | 第26-27页 |
| ·部分致病相关基因的表达检测 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-35页 |
| ·灰葡萄孢突变体BCt78 的产孢情况 | 第29页 |
| ·灰葡萄孢突变体BCt78 的PCR 和Southern Blot 鉴定 | 第29-30页 |
| ·T-DNA 插入位点侧翼序列的扩增 | 第30页 |
| ·TAIL-PCR 扩增 | 第30页 |
| ·PCR 产物的克隆与测序 | 第30页 |
| ·T-DNA 侧翼序列分析 | 第30-31页 |
| ·T-DNA 插入位点的PCR 验证 | 第31页 |
| ·突变基因的RT-PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·突变体的表型特征与生长速率 | 第32页 |
| ·突变体对番茄片的致病性 | 第32-33页 |
| ·突变体的致病毒素活性 | 第33页 |
| ·突变体的胞壁降解酶活力 | 第33-34页 |
| ·突变体中致病相关基因的表达分析 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| ·灰葡萄孢分生孢子产生相关基因 | 第35页 |
| ·细胞壁降解酶在灰葡萄孢致病过程中的作用 | 第35-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第44-45页 |
| 作者简历 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |