第一章 文献综述 | 第1-19页 |
一. 木聚糖的结构 | 第8-9页 |
二. 木聚糖酶(Xylanase)的分子生物学 | 第9-15页 |
1. 木聚糖酶分子的结构区域 | 第10-12页 |
2. 木聚糖酶的理化性质 | 第12-13页 |
3. 木聚糖酶基因 | 第13-14页 |
4. 木聚糖酶的基因工程和蛋白质工程的研究进展 | 第14-15页 |
三. 木聚糖酶的应用 | 第15-18页 |
1. 在饲料行业上的应用 | 第15-16页 |
2. 在造纸工业上的应用 | 第16-17页 |
3. 在食品工业及其它方面的应用 | 第17-18页 |
四. 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 木聚糖酶XYNA及XYNB的纯化及酶学性质研究 | 第19-33页 |
1. 材料和方法 | 第19-22页 |
1.1 实验材料 | 第19页 |
1.2 实验仪器 | 第19页 |
1.3 试剂 | 第19页 |
1.4 培养基及培养条件 | 第19-20页 |
1.5 确定诱导底物 | 第20页 |
1.6 木聚糖酶活性测定 | 第20页 |
1.7 木聚糖酶XYNA的纯化 | 第20页 |
1.8 木聚糖酶XYNB的纯化 | 第20-21页 |
1.9 木聚糖酶XYNA及XYNB的酶学性质分析 | 第21-22页 |
2. 结果与分析 | 第22-30页 |
2.1 标准曲线的绘制 | 第22-23页 |
2.2 确定诱导底物 | 第23-24页 |
2.3 木聚糖酶XYNA的纯化 | 第24-25页 |
2.4 木聚糖酶XYNA的酶学性质研究 | 第25-27页 |
2.5 木聚糖酶XYNB的纯化 | 第27页 |
2.6 木聚糖酶XYNB的酶学性质研究 | 第27-30页 |
2.7 XYNA及XYNB酶学性质的比较 | 第30页 |
3. 讨论 | 第30-32页 |
本章小结 | 第32-33页 |
第三章 木聚糖酶基因xynA1、xynB1的克隆 | 第33-45页 |
1. 材料与方法 | 第33-38页 |
1.1 实验材料 | 第33页 |
1.2 主要仪器、工具酶与试剂 | 第33页 |
1.3 木聚糖酶XYNA及XYNB转PVDF膜 | 第33-34页 |
1.4 模板DNA的提取 | 第34页 |
1.5 PCR扩增 | 第34-35页 |
1.6 双酶切 | 第35页 |
1.7 DNA电泳回收 | 第35-36页 |
1.8 连接 | 第36页 |
1.9 感受态细胞的制备 | 第36页 |
1.10 电转化 | 第36-37页 |
1.11 筛选重组子 | 第37页 |
1.12 质粒DNA的大量提取 | 第37-38页 |
2. 结果与分析 | 第38-42页 |
2.1 xynA1的克隆 | 第38-40页 |
2.1.1 蛋白质测序及引物设计与合成 | 第38页 |
2.1.2 xynA1-w(无信号肽)的克隆 | 第38-39页 |
2.1.3 xynA1-s(带信号肽)的克隆 | 第39-40页 |
2.2 xynB1的克隆 | 第40-42页 |
2.2.1 蛋白质测序及引物设计与合成 | 第40页 |
2.2.2 PCR扩增 | 第40-42页 |
2.2.3 克隆进pUC19质粒载体 | 第42页 |
3. 讨论 | 第42-43页 |
本章小结 | 第43-45页 |
第四章 木聚糖酶基因xynA1、xynB1的表达 | 第45-58页 |
1. 材料和方法 | 第45-48页 |
1.1 实验材料 | 第45页 |
1.2 主要仪器、工具酶与试剂 | 第45页 |
1.3 表达重组子pET-22b-xynA1-s(包含目的基因信号肽)的构建 | 第45页 |
1.4 表达重组子pET-22b-xynA1-w及pPIC9α-xynA1-w的构建 | 第45页 |
1.5 表达重组子pET-22b-xynB1及pPIC9α-xynB1的构建 | 第45-46页 |
1.6 pET-22b-xynA1-s、pET-22b-xynA1-w、pET-22b-xynB1在大肠杆菌中的表达及检测 | 第46页 |
1.7 xynA1、xynB1在毕赤酵母中的表达及检测 | 第46-48页 |
2. 结果和分析 | 第48-56页 |
2.1 pET-22b-xynA1-s表达重组体的构建过程 | 第48页 |
2.2 pET-22b-xynA1-w及pPIC9α-xynA1-w表达重组体的构建过程 | 第48页 |
2.3 pET-22b-xynB1及pPIC9α-xynB1表达重组体的构建过程 | 第48-52页 |
2.4 pET-22b-xynA1-s、pET-22b-xynA1-w在大肠杆菌中的表达 | 第52-54页 |
2.5 pET-22b-xynB1在大肠杆菌中的表达 | 第54-55页 |
2.6 pPIC9α-xynA1-w、pPIC9α-xynB1在毕赤酵母中的表达 | 第55-56页 |
3. 讨论 | 第56-57页 |
本章小结 | 第57-58页 |
结论 | 第58-59页 |
本论文的创新点 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |