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橄榄绿链霉菌Streptomyces olivaceoviridis A1所产木聚糖酶的纯化、酶基因的克隆及表达

第一章 文献综述第1-19页
 一. 木聚糖的结构第8-9页
 二. 木聚糖酶(Xylanase)的分子生物学第9-15页
  1. 木聚糖酶分子的结构区域第10-12页
  2. 木聚糖酶的理化性质第12-13页
  3. 木聚糖酶基因第13-14页
  4. 木聚糖酶的基因工程和蛋白质工程的研究进展第14-15页
 三. 木聚糖酶的应用第15-18页
  1. 在饲料行业上的应用第15-16页
  2. 在造纸工业上的应用第16-17页
  3. 在食品工业及其它方面的应用第17-18页
 四. 本研究的目的和意义第18-19页
第二章 木聚糖酶XYNA及XYNB的纯化及酶学性质研究第19-33页
 1. 材料和方法第19-22页
  1.1 实验材料第19页
  1.2 实验仪器第19页
  1.3 试剂第19页
  1.4 培养基及培养条件第19-20页
  1.5 确定诱导底物第20页
  1.6 木聚糖酶活性测定第20页
  1.7 木聚糖酶XYNA的纯化第20页
  1.8 木聚糖酶XYNB的纯化第20-21页
  1.9 木聚糖酶XYNA及XYNB的酶学性质分析第21-22页
 2. 结果与分析第22-30页
  2.1 标准曲线的绘制第22-23页
  2.2 确定诱导底物第23-24页
  2.3 木聚糖酶XYNA的纯化第24-25页
  2.4 木聚糖酶XYNA的酶学性质研究第25-27页
  2.5 木聚糖酶XYNB的纯化第27页
  2.6 木聚糖酶XYNB的酶学性质研究第27-30页
  2.7 XYNA及XYNB酶学性质的比较第30页
 3. 讨论第30-32页
 本章小结第32-33页
第三章 木聚糖酶基因xynA1、xynB1的克隆第33-45页
 1. 材料与方法第33-38页
  1.1 实验材料第33页
  1.2 主要仪器、工具酶与试剂第33页
  1.3 木聚糖酶XYNA及XYNB转PVDF膜第33-34页
  1.4 模板DNA的提取第34页
  1.5 PCR扩增第34-35页
  1.6 双酶切第35页
  1.7 DNA电泳回收第35-36页
  1.8 连接第36页
  1.9 感受态细胞的制备第36页
  1.10 电转化第36-37页
  1.11 筛选重组子第37页
  1.12 质粒DNA的大量提取第37-38页
 2. 结果与分析第38-42页
  2.1 xynA1的克隆第38-40页
   2.1.1 蛋白质测序及引物设计与合成第38页
   2.1.2 xynA1-w(无信号肽)的克隆第38-39页
   2.1.3 xynA1-s(带信号肽)的克隆第39-40页
  2.2 xynB1的克隆第40-42页
   2.2.1 蛋白质测序及引物设计与合成第40页
   2.2.2 PCR扩增第40-42页
   2.2.3 克隆进pUC19质粒载体第42页
 3. 讨论第42-43页
 本章小结第43-45页
第四章 木聚糖酶基因xynA1、xynB1的表达第45-58页
 1. 材料和方法第45-48页
  1.1 实验材料第45页
  1.2 主要仪器、工具酶与试剂第45页
  1.3 表达重组子pET-22b-xynA1-s(包含目的基因信号肽)的构建第45页
  1.4 表达重组子pET-22b-xynA1-w及pPIC9α-xynA1-w的构建第45页
  1.5 表达重组子pET-22b-xynB1及pPIC9α-xynB1的构建第45-46页
  1.6 pET-22b-xynA1-s、pET-22b-xynA1-w、pET-22b-xynB1在大肠杆菌中的表达及检测第46页
  1.7 xynA1、xynB1在毕赤酵母中的表达及检测第46-48页
 2. 结果和分析第48-56页
  2.1 pET-22b-xynA1-s表达重组体的构建过程第48页
  2.2 pET-22b-xynA1-w及pPIC9α-xynA1-w表达重组体的构建过程第48页
  2.3 pET-22b-xynB1及pPIC9α-xynB1表达重组体的构建过程第48-52页
  2.4 pET-22b-xynA1-s、pET-22b-xynA1-w在大肠杆菌中的表达第52-54页
  2.5 pET-22b-xynB1在大肠杆菌中的表达第54-55页
  2.6 pPIC9α-xynA1-w、pPIC9α-xynB1在毕赤酵母中的表达第55-56页
 3. 讨论第56-57页
 本章小结第57-58页
结论第58-59页
本论文的创新点第59-60页
参考文献第60-68页

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