| 第一章 绪论 | 第1-30页 |
| 1．1 引言 | 第14页 |
| 1．2 海藻糖的存在形式和结构 | 第14-15页 |
| 1．3 海藻糖的性质 | 第15页 |
| 1．3．1 海藻糖的稳定性 | 第15页 |
| 1．3．2 海藻糖的吸水性 | 第15页 |
| 1．4 海藻糖的生物学特性 | 第15-16页 |
| 1．5 海藻糖的应用 | 第16-20页 |
| 1．5．1 在食品方面的应用 | 第17-18页 |
| 1．5．2 在生物学上的应用 | 第18-20页 |
| 1．6 海藻糖的合成与代谢 | 第20-22页 |
| 1．7 海藻糖在生物体内的积累及与外界条件的关系 | 第22-24页 |
| 1．8 海藻糖的生物合成方法 | 第24-27页 |
| 1．8．1 酵母提取法 | 第24-25页 |
| 1．8．2 酶法 | 第25-26页 |
| 1．8．3 基因工程法 | 第26-27页 |
| 1．9 论文选题的背景、意义及思路 | 第27-30页 |
| 第二章 海藻糖测定方法的研究 | 第30-48页 |
| 2．1 引言 | 第30页 |
| 2．2 实验材料 | 第30-31页 |
| 2．2．1 主要仪器 | 第30页 |
| 2．2．2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2．2．3 主要溶液 | 第31页 |
| 2．2．4 主要培养基 | 第31页 |
| 2．3 实验方法 | 第31-35页 |
| 2．3．1 海藻糖的定性测定 | 第31-32页 |
| 2．3．2 海藻糖的定量测定 | 第32-33页 |
| 2．3．3 研究技术路线 | 第33-35页 |
| 2．4 结果与讨论 | 第35-46页 |
| 2．4．1 样品预处理 | 第35页 |
| 2．4．1．1 菌体内海藻糖测定 | 第35页 |
| 2．4．1．2 胞外海藻糖测定 | 第35页 |
| 2．4．2 海藻糖定性测定 | 第35-36页 |
| 2．4．2．1 纸层析法 | 第35-36页 |
| 2．4．2．2 薄层层析法 | 第36页 |
| 2．4．3 海藻糖的定量测定 | 第36-46页 |
| 2．4．3．1 硫酸蒽酮法 | 第36-39页 |
| 2．4．3．2 纸层析分离洗脱法 | 第39-42页 |
| 2．4．3．3 酶-DNS比色法 | 第42-46页 |
| 2．5 本章小结 | 第46-48页 |
| 第三章 海藻糖高产菌株的选育 | 第48-62页 |
| 3．1 引言 | 第48页 |
| 3．2 实验材料 | 第48-50页 |
| 3．2．1 菌种 | 第48页 |
| 3．2．2 主要仪器 | 第48页 |
| 3．2．3 主要试剂 | 第48-49页 |
| 3．2．4 相关溶液 | 第49页 |
| 3．2．5 主要培养基 | 第49-50页 |
| 3．3 实验与分析方法 | 第50-54页 |
| 3．3．1 鲜酵母干物质含量的测定 | 第50页 |
| 3．3．2 酵母菌体内海藻糖含量的测定 | 第50页 |
| 3．3．3 酵母菌耐性试验 | 第50页 |
| 3．3．4 菌种诱变 | 第50-52页 |
| 3．3．5 分析方法 | 第52页 |
| 3．3．6 诱变育种目标与技术路线 | 第52-54页 |
| 3．4 结果与讨论 | 第54-61页 |
| 3．4．1 初筛方法的确定 | 第54-57页 |
| 3．4．1．1 酵母菌株海藻糖积累试验 | 第54页 |
| 3．4．1．2 酵母菌株耐性的研究 | 第54-57页 |
| 3．4．2 诱变育种 | 第57-61页 |
| 3．4．2．1 出发菌株生长曲线的测定 | 第57页 |
| 3．4．2．2 诱变条件的选择 | 第57-58页 |
| 3．4．2．3 初筛 | 第58-59页 |
| 3．4．2．4 复筛 | 第59页 |
| 3．4．2．5 突变株性能测定 | 第59-61页 |
| 3．4．2．6 突变株稳定性检验 | 第61页 |
| 3．5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第四章 海藻糖积累培养基及培养条件的优化 | 第62-88页 |
| 4．1 引言 | 第62页 |
| 4．2 实验材料 | 第62-63页 |
| 4．2．1 菌种 | 第62页 |
| 4．2．2 主要仪器 | 第62页 |
| 4．2．3 主要试剂 | 第62-63页 |
| 4．2．4 主要培养基 | 第63页 |
| 4．3 实验与分析方法 | 第63-65页 |
| 4．3．1 种子培养 | 第63-64页 |
| 4．3．2 摇瓶培养 | 第64页 |
| 4．3．3 种子生长曲线的测定 | 第64页 |
| 4．3．4 分析方法 | 第64页 |
| 4．3．5 实验设计及统计方法 | 第64页 |
| 4．3．6 研究技术路线 | 第64-65页 |
| 4．4 结果与讨论 | 第65-86页 |
| 4．4．1 种子培养时间（种龄）的确定 | 第65-66页 |
| 4．4．2 基础培养基的选择 | 第66-67页 |
| 4．4．3 摇瓶培养基的单因子实验 | 第67-69页 |
| 4．4．3．1 添加Mn~（2+）、Fe~（2+）、Co~（2+）对海藻糖积累的影响 | 第67页 |
| 4．4．3．2 缓冲液浓度对海藻糖积累的影响 | 第67-68页 |
| 4．4．3．3 加盐对海藻糖积累的影响 | 第68页 |
| 4．4．3．4 烟酰胺对海藻糖积累的影响 | 第68-69页 |
| 4．4．4 摇瓶培养基多因子实验 | 第69-79页 |
| 4．4．4．1 微量元素的筛选 | 第69-70页 |
| 4．4．4．2 维生素的筛选 | 第70-71页 |
| 4．4．4．3 微量元素和维生素筛选的Plackett-Burman实验 | 第71-72页 |
| 4．4．4．4 响应面分析法优化培养基配比 | 第72-76页 |
| 4．4．4．5 第二次响应面回归模型的拟合 | 第76-79页 |
| 4．4．5 摇瓶培养条件的研究 | 第79-81页 |
| 4．4．5．1 温度对海藻糖积累的影响 | 第80页 |
| 4．4．5．2 装液量对海藻糖积累的影响 | 第80-81页 |
| 4．4．5．3 pH值对海藻糖积累的影响 | 第81页 |
| 4．4．6 优化条件与初始条件摇瓶培养的比较 | 第81-82页 |
| 4．4．7 接种量与培养基中微量成分浓度之间的关系 | 第82-84页 |
| 4．4．8 补料培养的研究 | 第84-86页 |
| 4．4．8．1 初始糖浓度对海藻糖积累的影响 | 第84页 |
| 4．4．8．2 补糖方式对海藻糖积累的影响 | 第84-85页 |
| 4．4．8．3 补加维生素、微量元素方式对海藻糖积累的影响 | 第85页 |
| 4．4．8．4 补料分批培养试验 | 第85-86页 |
| 4．4．9 分批和补料培养海藻糖积累结果比较 | 第86页 |
| 4．5 本章小结 | 第86-88页 |
| 第五章 胞外海藻糖的研究 | 第88-100页 |
| 5．1 引言 | 第88-89页 |
| 5．2 实验材料 | 第89页 |
| 5．2．1 菌种 | 第89页 |
| 5．2．2 主要仪器 | 第89页 |
| 5．2．3 主要试剂 | 第89页 |
| 5．2．4 主要培养基 | 第89页 |
| 5．3 实验与分析方法 | 第89页 |
| 5．3．1 菌体培养 | 第89页 |
| 5．3．2 菌体胞壁处理 | 第89页 |
| 5．3．3 摇瓶培养 | 第89页 |
| 5．3．4 分析方法 | 第89页 |
| 5．4 结果与讨论 | 第89-98页 |
| 5．4．1 胞壁处理方法对海藻糖合成的影响 | 第90页 |
| 5．4．2 刺激培养方式对胞内海藻糖积累的影响 | 第90-91页 |
| 5．4．3 刺激培养方式对胞外海藻糖合成的影响 | 第91-92页 |
| 5．4．4 合成温度的确定 | 第92-93页 |
| 5．4．5 合成时间的确定 | 第93页 |
| 5．4．6 pH对胞外海藻糖合成的影响 | 第93-94页 |
| 5．4．7 振荡频率对胞外海藻糖合成的影响 | 第94-95页 |
| 5．4．8 初糖浓度对胞外海藻糖合成的影响 | 第95-96页 |
| 5．4．9 接菌量对胞外海藻糖合成的影响 | 第96-97页 |
| 5．4．10 接菌量与反应液中微量成分浓度之间的关系 | 第97-98页 |
| 5．4．11 优化条件下海藻糖胞外补料合成实验 | 第98页 |
| 5．5 本章小结 | 第98-100页 |
| 第六章 5L罐酵母流加培养的研究 | 第100-110页 |
| 6．1 引言 | 第100页 |
| 6．2 实验材料 | 第100-101页 |
| 6．2．1 菌种 | 第100-101页 |
| 6．2．2 主要仪器 | 第101页 |
| 6．2．3 主要试剂 | 第101页 |
| 6．2．4 主要培养基 | 第101页 |
| 6．2．5 主要溶液 | 第101页 |
| 6．3 实验与分析方法 | 第101-102页 |
| 6．3．1 糖蜜的处理 | 第101页 |
| 6．3．2 种子培养 | 第101页 |
| 6．3．3 种子活化 | 第101-102页 |
| 6．3．4 5L罐酵母菌体流加培养 | 第102页 |
| 6．4．5 分析方法 | 第102页 |
| 6．4 结果与讨论 | 第102-109页 |
| 6．4．1 酵母流加培养工艺 | 第102-103页 |
| 6．4．1．1 种子培养 | 第102页 |
| 6．4．1．2 5L罐流加培养工艺控制 | 第102-103页 |
| 6．4．2 5L罐酵母流加培养动态曲线 | 第103-104页 |
| 6．4．3 流加培养动力学方程的建立 | 第104-107页 |
| 6．4．4 糖流加方程拟合 | 第107-109页 |
| 6．5 本章小结 | 第109-110页 |
| 第七章 5L罐酵母胞外海藻糖合成的研究 | 第110-117页 |
| 7．1 引言 | 第110页 |
| 7．2 实验材料 | 第110页 |
| 7．2．1 菌种 | 第110页 |
| 7．2．2 主要仪器 | 第110页 |
| 7．2．3 主要试剂 | 第110页 |
| 7．2．4 主要培养基 | 第110页 |
| 7．3 实验与分析方法 | 第110-111页 |
| 7．3．1 菌体培养 | 第110页 |
| 7．3．2 5L罐胞外海藻糖合成 | 第110页 |
| 7．3．3 分析方法 | 第110-111页 |
| 7．4 结果与讨论 | 第111-116页 |
| 7．4．1 菌体培养后期海藻糖合成酶活力的研究 | 第111-113页 |
| 7．4．1．1 pH的影响 | 第111-112页 |
| 7．4．1．2 温度休克培养 | 第112页 |
| 7．4．1．3 加盐培养 | 第112-113页 |
| 7．4．2 不同接种量对菌体胞内海藻糖合成的影响 | 第113页 |
| 7．4．3 5L罐胞外海藻糖合成的研究 | 第113-115页 |
| 7．4．3．1 不同培养菌体对胞外海藻糖合成的影响 | 第114页 |
| 7．4．3．2 不同底物浓度对胞外海藻糖合成的影响 | 第114-115页 |
| 7．4．3．3 pH对胞外流加培养海藻糖合成的影响 | 第115页 |
| 7．4．4 不同培养方式海藻糖合成实验结果比较 | 第115-116页 |
| 7．5 本章小结 | 第116-117页 |
| 第八章 海藻糖的提取 | 第117-128页 |
| 8．1 引言 | 第117页 |
| 8．2 实验材料 | 第117-118页 |
| 8．2．1 菌种 | 第117页 |
| 8．2．2 提取样品 | 第117-118页 |
| 8．2．3 主要仪器 | 第118页 |
| 8．2．4 主要试剂 | 第118页 |
| 8．2．5 主要溶液 | 第118页 |
| 8．3 实验方法 | 第118-120页 |
| 8．3．1 菌体预处理 | 第118页 |
| 8．3．2 胞内海藻糖提取 | 第118页 |
| 8．3．3 胞内提取液精制 | 第118页 |
| 8．3．4 反应液组分分析方法 | 第118-119页 |
| 8．3．5 胞外海藻糖分离提纯方法 | 第119页 |
| 8．3．6 提纯产物鉴定方法 | 第119页 |
| 8．3．7 研究技术路线 | 第119-120页 |
| 8．4 结果与讨论 | 第120-126页 |
| 8．4．1 胞内海藻糖的提取 | 第120-123页 |
| 8．4．1．1 菌体预处理 | 第120-121页 |
| 8．4．1．2 胞内海藻糖的提取 | 第121-122页 |
| 8．4．1．3 海藻糖的精制 | 第122-123页 |
| 8．4．2 胞外海藻糖的提取 | 第123-126页 |
| 8．4．2．1 反应液预处理 | 第123页 |
| 8．4．2．2 反应液成分初步分析 | 第123-124页 |
| 8．4．2．3 超滤 | 第124页 |
| 8．4．2．4 离子交换 | 第124-125页 |
| 8．4．2．5 蒸发浓缩 | 第125页 |
| 8．4．2．6 结晶与干燥 | 第125-126页 |
| 8．4．3 产品鉴定 | 第126页 |
| 8．5 本章小结 | 第126-128页 |
| 第九章 结论与展望 | 第128-132页 |
| 9．1 结论 | 第128-130页 |
| 9．2 论文创新点 | 第130页 |
| 9．3 展望 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-141页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第141-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
