| 第一章 前言 | 第1-23页 |
| 1． 根癌农杆菌转化系统的作用机理 | 第8-10页 |
| 1．1 Ti质粒的结构与功能 | 第8-10页 |
| 2． Ti质粒衍生的载体系统 | 第10页 |
| 2．1 目的基因克隆载体 | 第10页 |
| 2．2 中间载体和卸甲载体 | 第10页 |
| 3． 植物基因转化载体系统 | 第10-11页 |
| 3．1 一元载体 | 第10-11页 |
| 3．2 双元载体 | 第11页 |
| 4． 根癌农杆菌对单子叶植物的转化 | 第11-12页 |
| 5． 植物抗病分子机理 | 第12-17页 |
| 5．1 植物的抗病反应 | 第13-14页 |
| 5．2 植物抗病基因的克隆 | 第14页 |
| 5．3 植物抗病基因的结构、功能及其作用机制 | 第14-16页 |
| 5．4 植物抗病过程的信号传导 | 第16-17页 |
| 6． 植物系统获得抗性 | 第17-19页 |
| 6．1 基本概念及特征 | 第17-18页 |
| 6．2 水杨酸在SAR中的信号传导 | 第18页 |
| 6．3 涉及SAR信号传导途径和SAR反应的突变体 | 第18-19页 |
| 7． 反义RNA技术 | 第19-21页 |
| 7．1 反义RNA的作用机理 | 第20页 |
| 7．2 反义RNA的应用 | 第20-21页 |
| 8． 拟南芥NPR1基因及本研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 8．1 拟南芥NPR1基因 | 第21-22页 |
| 8．2 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-37页 |
| 1． 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2． 水稻品种 | 第23页 |
| 3． 培养基及培养条件 | 第23-25页 |
| 4． 菌株培养条件及保存 | 第25-26页 |
| 5． 抗生素及其使用浓度 | 第26页 |
| 6． 常用溶液及缓冲液 | 第26-27页 |
| 7． 质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| 7．1 快速碱裂解少量质粒DNA的提取 | 第27页 |
| 7．2 质粒DNA的大量提取 | 第27-28页 |
| 8． DNA沉淀 | 第28页 |
| 9． DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第28页 |
| 10． 植物总DNA的提取 | 第28-29页 |
| 10．1 植物总DNA的大量提取 | 第29页 |
| 10．2 植物总DNA的微量提取 | 第29页 |
| 11． DNA的酶切、电泳及DNA片段浓度大小测算 | 第29-30页 |
| 11．1 DNA的酶切 | 第29-30页 |
| 11．2 DNA的酶切、电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第30页 |
| 12． DNA片段的回收 | 第30-31页 |
| 12．1 低熔点琼脂糖凝胶法 | 第30页 |
| 12．2 电透析法回收DNA片段 | 第30-31页 |
| 13． 载体的脱磷酸化处理 | 第31页 |
| 14． DNA连接 | 第31-32页 |
| 15． 质粒DNA的电脉冲转化 | 第32页 |
| 16． 三亲本接合 | 第32-33页 |
| 17． 水稻的遗传转化过程 | 第33-34页 |
| 17．1 组织培养和转化的培养基 | 第33页 |
| 17．2 水稻种子的灭菌 | 第33页 |
| 17．3 愈伤组织的继代 | 第33页 |
| 17．4 水稻转化的基本路线 | 第33-34页 |
| 18． 根癌农杆菌对头孢噻肟钠（Cef）敏感性测定 | 第34页 |
| 19． 桂99愈伤组织对潮霉素（Hyg）的敏感性测定 | 第34-35页 |
| 20． PCR检测 | 第35页 |
| 20．1 引物序列 | 第35页 |
| 20．2 PCR反应体系 | 第35页 |
| 20．3 反应参数 | 第35页 |
| 21． PCR产物测序 | 第35-36页 |
| 22． 水稻抗病性检测 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-53页 |
| 1． 表达载体的构建 | 第37-41页 |
| 1．1 水稻反义表达载体pGXN5310的构建 | 第37-40页 |
| 1．2 水稻NPR1同源基因的反义表达载体向农杆菌EHA105的导入 | 第40-41页 |
| 2． 水稻NPR1基因反义表达载体对桂99愈伤组织的转化及再生 | 第41-46页 |
| 2．1 转化受体的准备 | 第41-42页 |
| 2．2 头孢噻肟钠（Cef）抑制农杆菌的有效浓度的测定 | 第42页 |
| 2．3 愈伤组织对潮霉素的敏感性 | 第42-43页 |
| 2．4． 根癌农杆菌对桂99愈伤组织的转化和筛选 | 第43-45页 |
| 2．5 水稻植株再生 | 第45-46页 |
| 3． 再生植株的鉴定和转化效率的分析 | 第46-53页 |
| 3．1 转化效率的分析 | 第46-47页 |
| 3．2 转基因植株的PCR检测 | 第47-51页 |
| 3．3 转基因植株的抗病性鉴定 | 第51-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-55页 |
| 1． 根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第53-54页 |
| 2． 桂99转反义NPR1基因植株的表现型 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
