| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-28页 |
| ·F-box蛋白家族 | 第15-19页 |
| ·F-box蛋白与泛素-蛋白酶水解途径 | 第15-16页 |
| ·F-box蛋白家族的分类 | 第16-19页 |
| ·FBXO31的序列与结构分析 | 第19-20页 |
| ·FBXO31的表达特性 | 第20-21页 |
| ·FBXO31的功能 | 第21-24页 |
| ·FBXO31是衰老基因和乳腺癌候选抑癌基因 | 第21页 |
| ·FBXO31与DNA损伤反应信号转导通路 | 第21-24页 |
| ·待解决的问题 | 第24-26页 |
| ·降解机制 | 第24-25页 |
| ·表达模式 | 第25-26页 |
| ·细胞定位 | 第26页 |
| ·展望和启示 | 第26-28页 |
| 第二章 F-box蛋白FBXO31降解机制的研究 | 第28-53页 |
| ·前言 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-45页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·方法 | 第32-39页 |
| ·重组质粒myc-FBXO31、FLAG-CDH1和FLAG-CDC20的构建 | 第39-43页 |
| ·蛋白酶体抑制剂MG132对FBXO31内源表达的影响 | 第43页 |
| ·增强CDC20或CDH1表达对FBXO31内源表达的影响 | 第43页 |
| ·免疫共沉淀实验鉴定蛋白质间的相互作用 | 第43-45页 |
| ·泛素化实验 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-51页 |
| ·重组质粒myc-FBXO31的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒FLAG-CDC20和FLAG-CDH1的构建及鉴定 | 第46-47页 |
| ·蛋白酶体抑制剂MG132对FBXO31内源表达的影响 | 第47-48页 |
| ·增强CDC20或CDH1表达对FBXO31内源表达的影响 | 第48-49页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第49-50页 |
| ·泛素化实验 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第三章 FBXO31与CDH1相互作用位点的确定 | 第53-62页 |
| ·前言 | 第53-55页 |
| ·方法 | 第55-58页 |
| ·含有点突变的重组质粒的构建 | 第55-57页 |
| ·免疫共沉淀实验检测FBXO31突变体与CDH1的相互作用 | 第57页 |
| ·免疫共沉淀实验检测FBXO31突变体与Skp1的相互作用 | 第57页 |
| ·免疫共沉淀实验检测FBXO31突变体与Cyclin D1的相互作用 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-60页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第58页 |
| ·D-box突变对FBXO31-CDH1结合的影响 | 第58-59页 |
| ·D-box突变对FBXO31-Skp1结合的影响 | 第59页 |
| ·D-box突变对FBXO31-cyclin D1结合的影响 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第四章 FBXO31基因在肝癌细胞系和临床样本中的表达水平及功能分析 | 第62-83页 |
| ·材料与方法 | 第62-70页 |
| ·材料 | 第62-65页 |
| ·方法 | 第65-70页 |
| ·主要器材 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-80页 |
| ·FBXO31在白血病细胞系中表达水平的分析 | 第70-75页 |
| ·FBXO31在肝癌组织中的表达 | 第75-76页 |
| ·重组质粒EGFP-FBXO31的构建及鉴定 | 第76页 |
| ·FBXO31对细胞增殖的影响 | 第76-77页 |
| ·FBXO31对细胞周期的影响 | 第77-78页 |
| ·FBXO31对细胞周期素D1的内源水平的影响 | 第78-79页 |
| ·FBXO31细胞衰老和凋亡的影响 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 总结 | 第83-84页 |
| 主要创新点 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 英文缩写词表 | 第94-96页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 统计学审稿证明 | 第99页 |
