| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 大肠杆菌热敏性肠毒素作为粘膜免疫佐剂的研究进展 | 第13-18页 |
| 1 LT 的理化性质及分类 | 第13页 |
| 2 LT 的分子结构及生物学特性 | 第13页 |
| 3 LT 的功能 | 第13-14页 |
| 4 LT 作为佐剂的研究 | 第14-18页 |
| ·ADP-核糖转移酶失活突变体的研究 | 第14-15页 |
| ·胰酶敏感位点突变体LTG192 的研究 | 第15-16页 |
| ·LTB 的研究 | 第16-18页 |
| 第二章 实验部分 | 第18-43页 |
| 实验一 大肠杆菌热敏性肠毒素双突变体(LTK63/G192 、LTR72/G192)基因的克隆及表达载体的构建 | 第18-24页 |
| 1 材料和方法 | 第18-22页 |
| ·实验材料及溶液配制 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-22页 |
| 2 结果 | 第22-23页 |
| ·LTK63/G192 表达载体构建 | 第22-23页 |
| ·LTR72/G192 表达载体构建 | 第23页 |
| ·突变体阳性质粒测序结果 | 第23页 |
| 3. 讨论 | 第23-24页 |
| 实验二 LT 双突变体重组蛋白的表达及毒性活性检测 | 第24-35页 |
| 1. 材料和方法 | 第24-29页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| 2. 结果 | 第29-34页 |
| ·重组质粒的表达 | 第29-31页 |
| ·蛋白的Western-blot 检测 | 第31页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·BCA 蛋白定量结果 | 第31-32页 |
| ·ADP-核糖转移酶实验标准曲线绘制 | 第32-33页 |
| ·ADP-核糖转移酶活性检测结果 | 第33页 |
| ·小鼠毒性实验 | 第33-34页 |
| 3. 讨论 | 第34-35页 |
| 实验三 LT 双突变体的粘膜佐剂活性研究 | 第35-43页 |
| 1. 材料和方法 | 第35-38页 |
| ·实验材料与溶液配制 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| 2. 结果 | 第38-41页 |
| ·血凝实验的结果 | 第38页 |
| ·小鼠免疫水平检测 | 第38-39页 |
| ·鸡免疫水平检测 | 第39-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43页 |
| 创新点 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52-53页 |
| 导师评阅表 | 第53页 |