| 缩略语表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-15页 |
| 英文摘要 | 第15-21页 |
| 前言 | 第21-23页 |
| 文献回顾 | 第23-66页 |
| 实验一 MSP58 基因在人脑胶质瘤中的表达及意义 | 第66-76页 |
| 1 材料 | 第66-69页 |
| ·组织标本和细胞系 | 第66-67页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第67-69页 |
| 2 方法 | 第69-72页 |
| ·器具准备 | 第69页 |
| ·总RNA提取 | 第69-70页 |
| ·RT反应 | 第70页 |
| ·PCR反应 | 第70页 |
| ·Western blot | 第70-71页 |
| ·统计学分析 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-73页 |
| ·MSP58 在四种人脑胶质瘤细胞系中的表达情况 | 第72页 |
| ·MSP58 在不同级别人脑胶质瘤中的表达情况 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| 实验二 稳定整合MSP58 基因RNA干涉载体的胶质瘤细胞系的建立 | 第76-88页 |
| 1 材料 | 第76-79页 |
| ·细胞系、菌种、质粒 | 第76-77页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第77-79页 |
| 2 方法 | 第79-82页 |
| ·人MSP58 基因RNAi特异性片段的设计及合成 | 第79页 |
| ·人 MSP58 基因 shRNA 真核干涉表达载体 pSilencer-MSP58 的构建和鉴定 | 第79-80页 |
| ·基因转染及稳定转染细胞系 U251-S、U251-H1neo 和 U251-NC 的建立 | 第80-81页 |
| ·RT-PCR反应 | 第81页 |
| ·Western blot | 第81页 |
| ·统计学分析 | 第81-82页 |
| 3 结果 | 第82-84页 |
| ·人MSP58 基因真核干涉表达载体的构建和鉴定 | 第82页 |
| ·稳定转染细胞系的建立 | 第82-83页 |
| ·shRNA抑制MSP58 mRNA在U251-S细胞中的表达 | 第83页 |
| ·shRNA抑制MSP58 蛋白在U251-S细胞中的表达 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-88页 |
| ·RNA干涉现象 | 第84-85页 |
| ·shRNA对MSP58 基因表达的抑制作用 | 第85-88页 |
| 实验三 MSP58 基因RNAi对人脑胶质瘤细胞体外增殖及侵袭的影响 | 第88-117页 |
| 1 材料 | 第88-90页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第88-90页 |
| 2 方法 | 第90-95页 |
| ·细胞培养 | 第90页 |
| ·化学合成小片段siRNA瞬转胶质瘤细胞系 | 第90-91页 |
| ·倒置相差显微镜观察 | 第91页 |
| ·四唑兰显色法（MTT法）绘制细胞生长曲线 | 第91页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第91-92页 |
| ·软琼脂集落形成实验 | 第92页 |
| ·流式细胞术（FCM）检测细胞周期 | 第92-93页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第93页 |
| ·单层细胞划痕实验检测细胞的迁移能力 | 第93页 |
| ·Transwell侵袭小室实验检测细胞的侵袭能力 | 第93-94页 |
| ·美国SuperArray公司基因功能分类芯片实验 | 第94-95页 |
| ·统计学分析 | 第95页 |
| 3 结果 | 第95-109页 |
| ·化学合成小片段siRNA瞬转胶质瘤细胞转染效率的确认 | 第95-96页 |
| ·化学合成小片段siRNA瞬转胶质瘤细胞干涉效果的确认 | 第96-97页 |
| ·倒置相差显微镜观察稳转细胞系U251-S形态的变化 | 第97-98页 |
| ·MTT法测定细胞生长增殖曲线 | 第98页 |
| ·平板克隆形成实验 | 第98-99页 |
| ·软琼脂集落形成实验 | 第99-101页 |
| ·流式细胞术测定细胞周期 | 第101-103页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡结果 | 第103页 |
| ·单层细胞划痕实验检测细胞的迁移能力 | 第103-105页 |
| ·Transwell侵袭小室实验检测细胞的侵袭能力 | 第105-106页 |
| ·基因表功能分类芯片检测 MSP58RNAi后对细胞周期和肿瘤相关达的影响 | 第106-109页 |
| 4 讨论 | 第109-117页 |
| ·MSP58 RNAi对U251 细胞体外增殖、侵袭和迁移能力的影响 | 第109-112页 |
| ·肿瘤发生发展的细胞周期机制 | 第109-110页 |
| ·Cyclin的异常 | 第110页 |
| ·CDK的增多 | 第110-111页 |
| ·CKI表达不足和突变 | 第111-112页 |
| ·基因芯片技术观察对肿瘤细胞周期和肿瘤相关基因的影响 | 第112-117页 |
| 实验四 MSP58 基因RNAi对胶质瘤裸鼠体内成瘤、增殖、侵袭的影响 | 第117-124页 |
| 1 材料 | 第117-118页 |
| ·细胞系和裸鼠 | 第117页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第117-118页 |
| 2 方法 | 第118-119页 |
| ·人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型的建立及观测 | 第118页 |
| ·HE染色 | 第118页 |
| ·统计学分析 | 第118-119页 |
| 3 结果 | 第119-122页 |
| ·裸鼠皮下移植瘤生长的观察与测量 | 第119-122页 |
| ·HE染色结果 | 第122页 |
| 4 讨论 | 第122-124页 |
| 小结 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-146页 |
| 个人简历和研究成果 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
