| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第15-24页 |
| 1.1 LFY基因的结构与作用 | 第15-17页 |
| 1.1.1 LFY基因的结构 | 第15-16页 |
| 1.1.2 LFY基因在花发育过程中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2 LFY基因与开花诱导途径 | 第17-20页 |
| 1.2.1 LFY基因与光周期途径 | 第17-18页 |
| 1.2.2 LFY基因与赤霉素途径 | 第18页 |
| 1.2.3 LFY基因与自主途径 | 第18-19页 |
| 1.2.4 LFY基因与春化途径 | 第19-20页 |
| 1.3 LFY基因的时空表达 | 第20-21页 |
| 1.4 原核表达 | 第21-22页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 1.6 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 胡桃楸成花相关基因LFY克隆及生物信息学分析 | 第24-48页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 核酸的提取 | 第25-27页 |
| 2.2.2 cDNA的合成 | 第27页 |
| 2.2.3 胡桃楸成花相关基因LFY的 cDNA克隆 | 第27-31页 |
| 2.2.4 胡桃楸成花相关基因LFY的 DNA全长获得 | 第31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-45页 |
| 2.3.1 RNA浓度和质量检测 | 第31-32页 |
| 2.3.2 DNA浓度和质量检测 | 第32-33页 |
| 2.3.3 胡桃楸成花相关基因LFY片段的分离 | 第33-35页 |
| 2.3.4 胡桃楸成花相关基因LFY的 CDS序列全长克隆 | 第35-36页 |
| 2.3.5 胡桃楸成花相关基因LFY的 DNA全长克隆及序列分析 | 第36-39页 |
| 2.3.6 胡桃楸成花相关基因JmLFY生物信息学分析 | 第39-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.4.1 核酸提取方法的比较 | 第45页 |
| 2.4.2 编码基因序列全长的获得 | 第45-46页 |
| 2.4.3 LFY基因的生物信息学分析 | 第46页 |
| 2.5 小结 | 第46-48页 |
| 第三章 胡桃楸成花相关基因JmLFY的表达分析 | 第48-62页 |
| 3.1 试验材料 | 第48页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第48页 |
| 3.1.2 主要实验试剂和仪器 | 第48页 |
| 3.2 试验方法 | 第48-51页 |
| 3.2.1 基因组RNA提取 | 第48-49页 |
| 3.2.2 cDNA合成 | 第49页 |
| 3.2.3 荧光定量引物设计 | 第49-50页 |
| 3.2.4 qRT-PCR扩增 | 第50页 |
| 3.2.5 内参基因筛选 | 第50-51页 |
| 3.3 结果与分析 | 第51-59页 |
| 3.3.1 RNA质量及浓度检测 | 第51页 |
| 3.3.2 引物特异性的检测及扩增效率计算 | 第51-53页 |
| 3.3.3 候选内参基因在不同组织中的平均表达水平 | 第53-54页 |
| 3.3.4 内参基因的表达稳定性分析 | 第54-56页 |
| 3.3.5 胡桃楸成花相关基因JmLFY的表达分析 | 第56-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 3.4.1 内参基因的筛选方法 | 第59-60页 |
| 3.4.2 JmLFY基因的表达特征 | 第60-61页 |
| 3.5 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 胡桃楸JmLFY基因载体构建及原核表达 | 第62-74页 |
| 4.1 试验材料 | 第62-63页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第62页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第62页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第62-63页 |
| 4.2 试验方法 | 第63-67页 |
| 4.2.1 质粒提取 | 第63页 |
| 4.2.2 载体构建引物设计 | 第63-64页 |
| 4.2.3 目的基因扩增 | 第64-65页 |
| 4.2.4 胡桃楸JmLFY基因与pBM30 载体连接 | 第65页 |
| 4.2.5 重组质粒pBM30-JmLFY的转化 | 第65页 |
| 4.2.6 菌液PCR检测 | 第65页 |
| 4.2.7 重组质粒pBM30-JmLFY转化BL21 感受态细胞 | 第65-66页 |
| 4.2.8 IPTG诱导表达 | 第66页 |
| 4.2.9 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第66-67页 |
| 4.3 结果与分析 | 第67-72页 |
| 4.3.1 胡桃楸成花相关基因JmLFY的获得 | 第67-68页 |
| 4.3.2 pBM30-JmLFY原核表达载体构建 | 第68-69页 |
| 4.3.3 pBM30-JmLFY原核表达载体构建序列比对 | 第69-71页 |
| 4.3.4 pBM30-JmLFY原核表达载体构建图谱 | 第71页 |
| 4.3.5 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第71-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-73页 |
| 4.4.1 载体构建 | 第72-73页 |
| 4.4.2 原核表达 | 第73页 |
| 4.5 小结 | 第73-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第86-87页 |
